Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 



ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

НФ-ВЭЖХ на колонке Zorbax CN >>>

  Ответов в этой теме: 52
  Страница: 1 2 3 4 5 6
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]


vmu
Пользователь
Ранг: 900


03.12.2021 // 18:05:35     

Chamomillablue пишет:
Почему перед пиком всегда следует провал нулевой?.. И как понять странное поведение нулевой во втором случае?
Холостой раствор (без триолеина) кололи? Отрицательные пики там есть? Готовить и колоть раствор триолеина на подвижной фазе пробовали? Основной пик тоже не ахти (горбатый на восходящей стороне).

Давление выглядит странно (большие колебания около 2 бар с периодом около 3 мин на одной картинке), да и маловато (5 бар). Модель насосов какая? Реальную скорость потока измеряли? Три последовательные хроматограммы одного раствора в одних условиях воспроизводимо получаются?
ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Chamomillablue
Пользователь
Ранг: 1300


07.12.2021 // 10:54:36     

OldBrave пишет:

Скорее всего, колонка уже нахватала воды и воспроизводимого разделения на ней получить уже не получится. Чтобы воду выгнать, нужно хорошо ее промыть подготовленным ЭА (для удаления воды можно несколько раз подряд проколоть 2,2-диметоксипропан), а затем перевести в гексан.


А можете подробнее рассказать, как обезвоживать диметоксипропаном?
Я правильно понимаю, что ПФ ставлю н-гексан 100% и несколько раз колю диметоксипропан? Или сперва промывать колонку свежеосушенным и перегнанным ЭТА и с ним же колоть диметоксипропан?




Выше, давал уже ссылку yadi.sk/d/wBI0itMdhTqR7w , откуда можно подсмотреть подходящий элюент, использованный для HILIC:
А) изооктан-ТГФ 99:1
Б) ацетон-дихлорметан 4:1
Элюент: 0,5-4% Б в А по объему следует подобрать на моностеарате. Изооктан, думаю, можно заменить на гексан. ТГФ - сухой и без антиоксидантов, можно заменить на сухой эфир, но он быстро улетает.

Дихлорметан тоже без стабилизаторов?.. или можно с этанолом/метанолом?
Chamomillablue
Пользователь
Ранг: 1300


07.12.2021 // 11:03:28     

vmu пишет:
Модель насосов какая?

Prominence LC20-AP


Реальную скорость потока измеряли? Три последовательные хроматограммы одного раствора в одних условиях воспроизводимо получаются?

Да, поток соответствует. Хроматограммы вопспроизводимы, но вот что странно..
Я заменил ЭТА на ацетон -- гексан:ацетон 70:30 и пик чистого гексана совпал по времени с пиком ТАГ.. я окончательно запутался где есть что..
Почему с НФ так непросто? ((

Раствор Триолеина готовил на ПФ
OldBrave
VIP Member
Ранг: 1226


07.12.2021 // 18:43:31     
Редактировано 5 раз(а)


Chamomillablue пишет:

Да, все правильно, во время промывки сухим ЭА или кондиционирования с гексаном делаете несколько последовательных вколов 2,2-диметоксипропана (~5-10 мкл) и смываете до базовой. Эту процедуру следует проводить при подозрении, что колонка с прямой фазой нахватала воды. Проблем с перегонкой дихлорметана никогда не возникало.

vmu справедливо заметил, рабочее давление на аналитической колонке д.б. без скачков 40-80 bar.
vmu
Пользователь
Ранг: 900


07.12.2021 // 21:33:23     

Chamomillablue пишет:
Prominence LC20-AP
LC-20AP препаративный насос (до 150 мл/мин) с большими рабочими камерами по 250 мкл. На 1 мл/мин, конечно, он работает (а мин. скорость у него 0.01 мл/мин), но теперь ясно, почему после простоя его надо долго качать.
https://www.shimadzu.eu/prep_5
Их все-таки у вас два (каждый качает свой р-ль, а потом смешение) или один (а фазы смешивает FCV-200AL, стоящий до насоса)?

Chamomillablue пишет:
Раствор Триолеина готовил на ПФ
Каждый раз на соответствующей ПФ (90/10, 60/40 и т.п.; хотя смесь, приготовленная вручную, будет слегка отличаться от того, что мешает прибор) или на какой-то одной? Холостой раствор кололи (ту смесь р-лей, в которой триолеин растворяете)?

Chamomillablue пишет:
Хроматограммы вопспроизводимы
RSD времени удерживания и площади пика какие?

OldBrave пишет:
рабочее давление на аналитической колонке д.б. без скачков 40-80 bar
Для обсуждаемой колонки, растворителей и скорости давление должно быть ближе к 40, чем к 80 бар.
Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Атомно-абсорбционный спектрометр (ААС) Thermo Scientific iCE 3300 Атомно-абсорбционный спектрометр (ААС) Thermo Scientific iCE 3300
Компактный друхлучевой АА спектрометр с пламенной и электротермической (опционально) атомизацией. Автоматическая туррель на 6 ламп. Спектральный диапазон: 180 - 900 нм или 185-760 нм.
[ Информация из каталога оборудования ANCHEM.RU ]
Chamomillablue
Пользователь
Ранг: 1300


08.12.2021 // 14:11:31     
Оказывается, я все это время факался неправильно!!

Наконец-то дошло до того, что стоит прислушаться к совету смешать в банке и поставить через один насос в режиме изократического элюирования!

Гексан : ацетон 7:3 (об/об) давление 3,5 МПа, не скачет в пределах 0,2 МПа, ровное, нулевая РД идеальная (по сравнению с той, что было)..

Как-то в ИОХе видел, что они растворители для ВЭЖХ пропускают через стеклянные колонны с прокаленным силикагелем -- прямо на стене висят почти метровой длины.. Способно ли это заменить перегонку?
Chamomillablue
Пользователь
Ранг: 1300


08.12.2021 // 23:41:09     
В общем, весьма любопытная картина получается..

https://cloud.mail.ru/public/6g51/hRJ998n3i

примеры хроматограмм и условия.. выходит, аналиты (метил-пальмитат, три-17:0 и эйкозеновая (арахиновая) кислота элюируются раньше системного пика

Это хорошо видно на этой хроматограмме, когда я заколол смесь их:

https://cloud.mail.ru/public/ysjo/KawsukDEZ

Причем, порядок элюирования странный: ТАГ - МЭЖК -- свободная ЖК..
Видимо, долю ацетона надо убавить и существенно..
И все равно вопросов много (
vmu
Пользователь
Ранг: 900


09.12.2021 // 7:10:27     
Доведите время удерживания наименее удерживаемого компонента до 5-10 мин. Сейчас у вас вещества еле удерживаются колонкой.
Chamomillablue
Пользователь
Ранг: 1300


09.12.2021 // 18:45:54     
Редактировано 1 раз(а)


vmu пишет:
Доведите время удерживания наименее удерживаемого компонента до 5-10 мин. Сейчас у вас вещества еле удерживаются колонкой.
Сделал гексан:ацетон 90:10 -- пик растворителя стабильно воспроизводится на 4,400 (гексан:ацетон 9:10), чистого гексана -- 4,100, а вот пик ТАГ стабильно выходит ДО этого времени даёт пик на 2,50 мин, а потом появляется ещё один пик в районе 10 минуты, скорее всего, это и есть ТАГ (попробую коллектором собрать и ТСХ (ха-ха!) сделать, чтобы проверить это.
Вопрос в том, что за фантомы появляются?..
Перерастворил ТАГ в гексан:ацетон 9-1, а не в 7-3 как вчера.
Неужели колонка CN вообще не держит эти соединения? и перейти на Luna Silica?
vmu
Пользователь
Ранг: 900


09.12.2021 // 19:50:36     
Еще бывает так:
Peaks from Dissolved Air in Sample Solvent
https://www.shimadzu.com/an/service-support/technical-support/analysis-basics/lib/lctalk/37/37lab.html

  Ответов в этой теме: 52
  Страница: 1 2 3 4 5 6
  «« назад || далее »»

Ответ на тему



ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]

ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2022
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты