| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
НФ-ВЭЖХ на колонке Zorbax CN >>>
|
 |
|
vmu Пользователь Ранг: 1237 |
 03.12.2021 // 18:05:35
Холостой раствор (без триолеина) кололи? Отрицательные пики там есть? Готовить и колоть раствор триолеина на подвижной фазе пробовали? Основной пик тоже не ахти (горбатый на восходящей стороне). Давление выглядит странно (большие колебания около 2 бар с периодом около 3 мин на одной картинке), да и маловато (5 бар). Модель насосов какая? Реальную скорость потока измеряли? Три последовательные хроматограммы одного раствора в одних условиях воспроизводимо получаются? |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
Chamomillablue Пользователь Ранг: 1302 |
07.12.2021 // 10:54:36
А можете подробнее рассказать, как обезвоживать диметоксипропаном? Я правильно понимаю, что ПФ ставлю н-гексан 100% и несколько раз колю диметоксипропан? Или сперва промывать колонку свежеосушенным и перегнанным ЭТА и с ним же колоть диметоксипропан?
Дихлорметан тоже без стабилизаторов?.. или можно с этанолом/метанолом? |
|||||
|
Chamomillablue Пользователь Ранг: 1302 |
07.12.2021 // 11:03:28
Prominence LC20-AP
Да, поток соответствует. Хроматограммы вопспроизводимы, но вот что странно.. Я заменил ЭТА на ацетон -- гексан:ацетон 70:30 и пик чистого гексана совпал по времени с пиком ТАГ.. я окончательно запутался где есть что.. Почему с НФ так непросто? (( Раствор Триолеина готовил на ПФ |
|||||
|
OldBrave VIP Member Ранг: 1314 |
07.12.2021 // 18:43:31
Редактировано 5 раз(а) Да, все правильно, во время промывки сухим ЭА или кондиционирования с гексаном делаете несколько последовательных вколов 2,2-диметоксипропана (~5-10 мкл) и смываете до базовой. Эту процедуру следует проводить при подозрении, что колонка с прямой фазой нахватала воды. Проблем с перегонкой дихлорметана никогда не возникало. vmu справедливо заметил, рабочее давление на аналитической колонке д.б. без скачков 40-80 bar. |
|||||
|
vmu Пользователь Ранг: 1237 |
07.12.2021 // 21:33:23
LC-20AP препаративный насос (до 150 мл/мин) с большими рабочими камерами по 250 мкл. На 1 мл/мин, конечно, он работает (а мин. скорость у него 0.01 мл/мин), но теперь ясно, почему после простоя его надо долго качать. https:// Их все-таки у вас два (каждый качает свой р-ль, а потом смешение) или один (а фазы смешивает FCV-200AL, стоящий до насоса)? Каждый раз на соответствующей ПФ (90/10, 60/40 и т.п.; хотя смесь, приготовленная вручную, будет слегка отличаться от того, что мешает прибор) или на какой-то одной? Холостой раствор кололи (ту смесь р-лей, в которой триолеин растворяете)? RSD времени удерживания и площади пика какие? Для обсуждаемой колонки, растворителей и скорости давление должно быть ближе к 40, чем к 80 бар. |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
Chamomillablue Пользователь Ранг: 1302 |
08.12.2021 // 14:11:31
Оказывается, я все это время факался неправильно!! Наконец-то дошло до того, что стоит прислушаться к совету смешать в банке и поставить через один насос в режиме изократического элюирования! Гексан : ацетон 7:3 (об/об) давление 3,5 МПа, не скачет в пределах 0,2 МПа, ровное, нулевая РД идеальная (по сравнению с той, что было).. Как-то в ИОХе видел, что они растворители для ВЭЖХ пропускают через стеклянные колонны с прокаленным силикагелем -- прямо на стене висят почти метровой длины.. Способно ли это заменить перегонку? |
|||||
|
Chamomillablue Пользователь Ранг: 1302 |
08.12.2021 // 23:41:09
В общем, весьма любопытная картина получается.. https://cloud.mail.ru/public/6g51/hRJ998n3i примеры хроматограмм и условия.. выходит, аналиты (метил-пальмитат, три-17:0 и эйкозеновая (арахиновая) кислота элюируются раньше системного пика Это хорошо видно на этой хроматограмме, когда я заколол смесь их: https://cloud.mail.ru/public/ysjo/KawsukDEZ Причем, порядок элюирования странный: ТАГ - МЭЖК -- свободная ЖК.. Видимо, долю ацетона надо убавить и существенно.. И все равно вопросов много ( |
|||||
|
vmu Пользователь Ранг: 1237 |
09.12.2021 // 7:10:27
Доведите время удерживания наименее удерживаемого компонента до 5-10 мин. Сейчас у вас вещества еле удерживаются колонкой. |
|||||
|
Chamomillablue Пользователь Ранг: 1302 |
09.12.2021 // 18:45:54
Редактировано 1 раз(а) Сделал гексан:ацетон 90:10 -- пик растворителя стабильно воспроизводится на 4,400 (гексан:ацетон 9:10), чистого гексана -- 4,100, а вот пик ТАГ стабильно выходит ДО этого времени даёт пик на 2,50 мин, а потом появляется ещё один пик в районе 10 минуты, скорее всего, это и есть ТАГ (попробую коллектором собрать и ТСХ (ха-ха!) сделать, чтобы проверить это. Вопрос в том, что за фантомы появляются?.. Перерастворил ТАГ в гексан:ацетон 9-1, а не в 7-3 как вчера. Неужели колонка CN вообще не держит эти соединения? и перейти на Luna Silica? |
|||||
|
vmu Пользователь Ранг: 1237 |
09.12.2021 // 19:50:36
Еще бывает так: Peaks from Dissolved Air in Sample Solvent https:// |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 52
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
