Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 



ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

НФ-ВЭЖХ на колонке Zorbax CN >>>

  Ответов в этой теме: 52
  Страница: 1 2 3 4 5 6
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]


OldBrave
VIP Member
Ранг: 1201


29.11.2021 // 18:35:04     
Редактировано 3 раз(а)


Chamomillablue пишет:
...Я правильно понимаю, что уплотнения -- это вот такие штуки?

https://cloud.mail.ru/public/Xf7M/C4BD1tiKQ

https://cloud.mail.ru/public/eCvX/Q18it3n7H

Нет, я упоминал об уплотнениях плунжеров в самом насосе, это как крайний случай, если все иное исключено. Полную разборку насосных головок выполняет сервис-инженер. Но у Вас, видимо, до этого еще далеко.

cloud.mail.ru/public/Xf7M/C4BD1tiKQ - штуцер с феруллой выполненный из полипропилена - крайне нежный и ненадежный элемент, имеет резьбу, которая любит легко сворачиваться, дешевка, ну как на фотке, - заказывайте из других материалов.

cloud.mail.ru/public/eCvX/Q18it3n7H - не понял, что за трубка, возможно, забор элюента (вероятная причина подсоса), явно пережата и подлежит замене.

Вообще, при работе с RI узел формирования градиента на входе (Low-Pressure Gradient Unit, LPGU) обходят. Элюент подают отдельной заборной линией непосредственно на вход насоса в тройник cloud.mail.ru/public/Xf7M/C4BD1tiKQ
Старую линию отключают и глушат.
Дело все в том, что кран-переключатель в LPGU не герметичен, при установке 100% он все равно дергается и в целевой элюент могут попасть другие элюенты. Для RI это - невозможность стабилизировать нулевую линию.
ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Chamomillablue
Пользователь
Ранг: 1295


29.11.2021 // 22:28:18     

OldBrave пишет:


cloud.mail.ru/public/Xf7M/C4BD1tiKQ - штуцер с феруллой выполненный из полипропилена - крайне нежный и ненадежный элемент, имеет резьбу, которая любит легко сворачиваться, дешевка, ну как на фотке, - заказывайте из других материалов.

А какие лучше? Тефлон? Сталь (бывают ли такие?)


не понял, что за трубка, возможно, забор элюента (вероятная причина подсоса), явно пережата и подлежит замене.

Это силиконовый капилляр, ведущий от склянки промывки плунжера к перистальтическому насосу, кготорый его и промывает. По рекомендации первого сервисного инженера, который всё это собирал -- склянка заполнена 10% 2-пропанолом


Вообще, при работе с RI узел формирования градиента на входе (Low-Pressure Gradient Unit, LPGU) обходят. Элюент подают отдельной заборной линией непосредственно на вход насоса в тройник cloud.mail.ru/public/Xf7M/C4BD1tiKQ
Старую линию отключают и глушат.
Дело все в том, что кран-переключатель в LPGU не герметичен, при установке 100% он все равно дергается и в целевой элюент могут попасть другие элюенты. Для RI это - невозможность стабилизировать нулевую линию.

Да, я уже думал эту мысль
Меня ещё вот что смущает -- разница в давлениях между насосами в 0,2МПа.. потому и проблема образуется, как мне кажется.. при потоке н-гексана в 1 мл/мин через колонку давление максимум 0,2-0,3 МПа, таким образом во втором насосе оно на уровне 0,1-0,0 МПа, а если падает до -0,1 -- то начинается "пила" ((
Chamomillablue
Пользователь
Ранг: 1295


30.11.2021 // 14:09:00     
OldBrave, VMU, спасибо за рекомендации!
Теперь вывод на режим с RID занимает всего 40-50 минут, а за ночь тратится не более 50 мл ПФ -- дикая экономия растворителей, времени и нервов! )
OldBrave
VIP Member
Ранг: 1201


30.11.2021 // 15:23:16     

Chamomillablue пишет:
...А какие лучше? Тефлон? Сталь (бывают ли такие?)

...По рекомендации первого сервисного инженера, который всё это собирал -- склянка заполнена 10% 2-пропанолом

...разница в давлениях между насосами в 0,2МПа.. потому и проблема образуется, как мне кажется.. при потоке н-гексана в 1 мл/мин через колонку давление максимум 0,2-0,3 МПа, таким образом во втором насосе оно на уровне 0,1-0,0 МПа, а если падает до -0,1 -- то начинается "пила" ((

В качестве материала штуцеров и ферул в большинстве случаев используют PEEK.

Не понятно, какая конфигурация насосов у Вас в системе. В случае для двух-плунжерных насосов Шимадзу, даже если один из плунжеров не работает, скачков давления видно быть не должно из-за высокой частоты их работы. Скачки давления - явный признак подсоса воздуха (причины уже указывались) или неисправность демпферной системы. Для начала нужно убедиться в отсутствии засоров в подводящих капиллярах ко второму плунжеру...

Промывка плунжеров задумывалась для удаления крист. отложений солей на плунжере при использовании буферных элюентов. Поэтому в качестве промывочной жидкости рекомендуют воду. Растворимость солей в 10%-ном 2-пропаноле низкая, он там - в качестве консерванта... Нужно просто чаще менять воду. В вашем случае, при подозрении неплотности в уплотнении плунжера, в качестве промывочной жидкости следует использовать элюент.
vmu
Пользователь
Ранг: 809


30.11.2021 // 19:58:06     

Chamomillablue пишет:
при потоке н-гексана в 1 мл/мин через колонку давление максимум 0,2-0,3 МПа
...т.е. 2-3 бар, а должно быть на порядок больше. Либо насос дает неправильные показания давления, либо, более вероятно, хреново работает (чаще всего проблемы с давлением возникают из-за плохой работы (неплотного закрывания) клапанов насоса, особенно входных). Замерьте реальную скорость потока (слив из колонки в мерную колбу на 5-10 мл и секундомером время заполнения колбы). Повторяемость хроматограмм одного раствора нормальная (площади, времена, форма пиков)?
Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
ФР.1.31.2001.00261  «Методика выполнения измерений массовой концентрации нефтепродуктов в сточных водах ИК-фотометрическим методом с использованием концентратомера КН-2» ФР.1.31.2001.00261 «Методика выполнения измерений массовой концентрации нефтепродуктов в сточных водах ИК-фотометрическим методом с использованием концентратомера КН-2»
Диапазон измерения массовых концентраций нефтепродуктов в воде от 0,05 до 100,00 мг/дм3.
[ Информация из каталога оборудования ANCHEM.RU ]
vmu
Пользователь
Ранг: 809


30.11.2021 // 20:06:12     
Редактировано 3 раз(а)


OldBrave пишет:
Растворимость солей в 10%-ном 2-пропаноле низкая
Достаточная растворимость. Это не 50 и не 100 % изопропанола. Да, эти 10 % спирта (можно даже 20 %, можно MeOH (но токсичен и летуч, быстрее уходит из раствора, чем изопропанол), EtOH) позволяют реже менять промывную жидкость + органическую грязь отмывают, хотя основная задача, конечно, смывать соли из буферов. Можно и чистую воду, но менять чаще. Для НФ ВЭЖХ с ПФ гексан/ацетон, разумеется, вода там не нужна. Тут и без промывной жидкости проблем быть не должно, но можно залить какую-то органику (м.б. тот же изопропанол). Не уверен, что линия промывки так же устойчива к вашей ПФ, как основной жидкостный тракт.
Chamomillablue
Пользователь
Ранг: 1295


30.11.2021 // 23:39:01     
Редактировано 1 раз(а)

Понаблюдал сегодня за поведением насосов -- скачков давления не было, но между насосами разница четко в 0,2Мпа: 0,2/0,0; 0,1/-0,1; 0,0/-0,2 -- оно было и при инсталляции системы и тогда инженер сказал, что разница до 0,8Мпа типа приемлема.. но вот на работе с этой ПФ она оказалась ощутима.. при потоке 0,08 мл/мин давление в насосе, качающем ацетон, становится 0,1МПа...
Если взять более вязкий этилацетат, у него элюирующая сила не сильно выше ацетона, но вязкость точно выше в 1,4 раза -- улучшит ли это ситуацию с давлением во втором насосе?
И бОльшая по сравнению с ацентоном кислотность не опасна для колонки?
Chamomillablue
Пользователь
Ранг: 1295


01.12.2021 // 16:48:39     

vmu пишет:

Chamomillablue пишет:
при потоке н-гексана в 1 мл/мин через колонку давление максимум 0,2-0,3 МПа
...т.е. 2-3 бар, а должно быть на порядок больше. Либо насос дает неправильные показания давления, либо, более вероятно, хреново работает (чаще всего проблемы с давлением возникают из-за плохой работы (неплотного закрывания) клапанов насоса, особенно входных). Замерьте реальную скорость потока (слив из колонки в мерную колбу на 5-10 мл и секундомером время заполнения колбы). Повторяемость хроматограмм одного раствора нормальная (площади, времена, форма пиков)?


Попробовал на другой колонке -- Luna Silica 5мкм 250*4,6 -- давления такие же..
но с этилацетатом веселее процесс пошел ))
Chamomillablue
Пользователь
Ранг: 1295


02.12.2021 // 22:40:49     
Помогите разобраться вот с каким явлением:
при изократическом элюировании н-гексан:этилацетат 90:10 об/об пик триолеина выглядит вот так:

https://cloud.mail.ru/public/wCmF/DLQ5nyfyN

увеличение доли этилацетата при постоянном потоке 1 мл/мин вполне закономерно двигает пик, но при этом растет коэффициент асимметрии, а ЧТТ падает..
но при 40% этилацетата пик становится вот таким!

https://cloud.mail.ru/public/UHis/7m2bceq8y

Почему перед пиком всегда следует провал нулевой?.. И как понять странное поведение нулевой во втором случае?..

РИД, в - регистрация
OldBrave
VIP Member
Ранг: 1201


03.12.2021 // 1:14:38     
Редактировано 6 раз(а)


Chamomillablue пишет:
Помогите разобраться вот с таким явлением...

Отрицательный пик RI, - скорее всего, так проявляет себя водичка в элюенте или в пробе. Поскольку, этот отрицательный пик увеличился с увеличением доли ЭА, вода содержится именно в нем. ЭА может растворить до более 10% воды, что может фатально исказить результаты разделения. Кроме того, ЭА всегда загрязнен продуктами своего гидролиза, поэтому перед использованием его перегоняют над прокаленным поташом.

Скорее всего, колонка уже нахватала воды и воспроизводимого разделения на ней получить уже не получится. Чтобы воду выгнать, нужно хорошо ее промыть подготовленным ЭА (для удаления воды можно несколько раз подряд проколоть 2,2-диметоксипропан), а затем перевести в гексан. Проверкой может служить узкий пик OOO сразу после старта при элюировании 100% гексаном.

Как уже намекал, Гекс-ЭА в изократике - далеко не лучший элюент для Ваших целей, - групповое разделение TAG, DAG и MAG. MAG Вы можете не смыть с колонки в допустимое время.

Выше, давал уже ссылку yadi.sk/d/wBI0itMdhTqR7w , откуда можно подсмотреть подходящий элюент, использованный для HILIC:
А) изооктан-ТГФ 99:1
Б) ацетон-дихлорметан 4:1
Элюент: 0,5-4% Б в А по объему следует подобрать на моностеарате. Изооктан, думаю, можно заменить на гексан. ТГФ - сухой и без антиоксидантов, можно заменить на сухой эфир, но он быстро улетает.

  Ответов в этой теме: 52
  Страница: 1 2 3 4 5 6
  «« назад || далее »»

Ответ на тему



ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]

ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2009
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты