Форумы ANCHEM.RU: Высокое давление на ВЭЖХ-колонке

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Высокое давление на ВЭЖХ-колонке >>>

  Ответов в этой теме: 46
  Страница: 1 2 3 4 5
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]

IVA
Пользователь
Ранг: 95

11.01.2010 // 22:18:36

Serga пишет:
Какой придурок ухитрился создать методу с водой в качестве ПФ для аминофазы на силикагеле ????
Разрабатывайте свою методу, потому что по такой методе никаких денег не напасешься. Аминофаза валится уже от 10-15% процентов воды в ацетонитриле, не говоря уже о чистой воде. Валится очень легко, за полгода оно приходит в неработоспособное состояние. Вот кто одобрил этот метод, тот пусть и платит за новую колонку, а также и за каждую последущую. Так и передайте вашему начальству.

И снова здравствуйте!
На 80% ацетонитриле моя колоночка работает не менее года. Без предколонки. Прекрасно делит и не жалуюсь.

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Prolabor
Пользователь
Ранг: 581

12.01.2010 // 7:26:18

IVA пишет:
И снова здравствуйте!
На 80% ацетонитриле моя колоночка работает не менее года. Без предколонки. Прекрасно делит и не жалуюсь.

Аминофаза, год непрерывной работы?

В принципе, выше как раз говорили о сокращении срока службы колонки именно при превышении этого предела содержания воды, о сокращении а не об умирании

Вы бы сразу писали марку колонки, фирму. Хоть какая-то информация будет для людей. А так только возглас и сбивание мыслей.

MeOH
Пользователь
Ранг: 487

25.03.2010 // 18:45:52

Редактировано 1 раз(а)

Продолжим.
У меня несколько другая ситуация
Колонка: Luna (2) C18 5u 250*4.6 - эксплуатировалась более 3х лет, на каких только можно фазах, определяли фарм препараты. Недавно мой "напарник", который как и я работает 2 год, решил попробовать "регенерировать" её по методике Аквилона:
обратный ток
1 водой 25 мл -0,2-0,3 мл
2 Изопропанол 25 мл -0,2-0,3 мл
3 Гексан 50 мл -0.5
4 Метиленхлорид 25 - 0.5
5 Изопропанол 25 мл -0,2-0,3 мл
Обычное направление - АЦН и все!, реактивов он не пожалел
после этого она не эксплуатировалась некоторое время
через месяцок она понадобилась и, эффективность не порадовала, все в тех же пределах
Тогда я позаимствовал немного другую методику
1. Водой с ACN обратный ток немного
2. Столько же метанолом
3. Перевернул и градиентом от 25/75 до 0/100 гексан/изопропанол
4. Потом всю ночь на изопропаноле всего ок 200 мл
5. Немного АЦН и Метанола
И вот приходит препарат, точнее ошейник, содержащий в своём составе фипронил, пирипроксифен, и ивермектин.
На чистом ацетонитриле на новенькой но короткой Symmetry C18 3.5 75*4.6 - хреновенько, перекрываються, пробую Луне, но меняю фазу ACN/MeOH/0.2% - Acetic acid 50/45/5, поток 0.8, Т-43 - все вещества, 4-основных пика выходят на 5й 9й 11й 14й минутах, последний, самый широкий пик не больше минуты шириной-такой хорошей эффективности еще не показывала, и вот на 3 серии, те после 4х заколов по 10мкл (каждой серии по 2 закола) давление начинает переть вверх и к концу 2 закола 3й серии)) насос отключается от превышения лимита давления.
Ошейники, по 1 г растворял в 50 мл тетрагидрофурана, добавлял 50 мл Метанола, осаждал пластификатор, 1 мл до 10 фазой, и еще раз 0.1 мл до 10 фазой того 1г в 80000раз, фильтровал в виалу слоником 0.22мкм.
Перевернул колонку давление не растет выше четверти от предельного.
В чем загвоздка?

MeOH
Пользователь
Ранг: 487

26.03.2010 // 11:35:37

На ночь запустил повторный анализ в обратном направлении. Утром давление было в полтора раза выше. Что делать? Менять фриты, чистить пробу лучше, ....?

Serga
Пользователь
Ранг: 1806

26.03.2010 // 20:17:32

MeOH пишет:
Что делать? Менять фриты, чистить пробу лучше, ....?

Сухари сушить. Если ты и так "классно" готовил пробу, то куда еще улучшать? (Там есть, что улучшать?

).
И какие ты фриты менять собрался? Тогда лучше сразу колонку новую заказывайте.

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Высокотемпературная лабораторная электропечь SNOL 12/1300
Электропечь SNOL 12/1300 предназначена для сушки и термообработки различных материалов в воздушной среде при температуре от 50 °С до 1300 °С. Рабочая камера электропечи выполнена из керамики. Нагревательные спирали находятся в пазах, то есть частично открыты.

[ Информация из каталога оборудования ANCHEM.RU ]

MeOH
Пользователь
Ранг: 487

27.03.2010 // 1:59:13

(Там есть, что улучшать? ).

хз, может пластификаторы, из которых состоит ошейник не осели, хотя осадок плотный выпал

www.vici-jour.se/pat_frits.html
стоит ли их менять?

Заказал YMC Triart, говорят мажорная)))

И самое главное, от чего давление растет???

IvanStyskin
Пользователь
Ранг: 149

27.03.2010 // 16:27:29

Serga пишет:

MeOH пишет:
Что делать? Менять фриты, чистить пробу лучше, ....?
Сухари сушить. Если ты и так "классно" готовил пробу, то куда еще улучшать? (Там есть, что улучшать? ).
И какие ты фриты менять собрался? Тогда лучше сразу колонку новую заказывайте.

Ну можно входные менять, но едва ли поможет уже.
А вообще если есть время и делать нече почему бы не поиграться

OldBrave
VIP Member
Ранг: 1314

27.03.2010 // 16:49:13

Редактировано 6 раз(а)

MeOH ...У меня несколько другая ситуация
...пробую на Луне, но меняю фазу ACN/MeOH/0.2% - Acetic acid 50/45/5... после 4х заколов по 10мкл (каждой серии по 2 закола) давление начинает переть вверх и ...насос отключается от превышения лимита давления.
Ошейники, по 1 г растворял в 50 мл тетрагидрофурана, добавлял 50 мл Метанола, осаждал пластификатор, 1 мл до 10 фазой, и еще раз 0.1 мл до 10 фазой того 1г в 80000раз, фильтровал в виалу слоником 0.22мкм.
Перевернул колонку давление не растет выше четверти от предельного... повторный анализ в обратном направлении. Утром давление было в полтора раза выше..., может пластификаторы, из которых состоит ошейник не осели, хотя осадок плотный выпал...

Описанная картина происходит когда забивается белками или полисахаридами на колонке входной фрит или сразу после него слой сорбента. Указание на возможность образование "плотного осадка" лишний раз подтверждает это. Образовавшийся плотный слой осадка в процессе дальнейшей эксплуатации колонки дополнительно уплотняется за счет нерастворимых микрочастиц элюента и в конечном итоге полностью блокирует поток.
Вывод: дополнительно поработать над пробоподготовкой. Возможно повторное фильтрование через слой "плотного осадка".
Колонку, пока еще она не полностью забита, регенерировать, как Вы уже делали, обратным потоком. При смывании с колонки углеводов и полисахаридов в составе элюента органического модификатора должно быть не более 15-20%.

MeOH
Пользователь
Ранг: 487

27.03.2010 // 17:45:12

OldBrave пишет:
Колонку, пока еще она не полностью забита, регенерировать

В пробе пластификатор, который растворялся тетрагидрофураном, скорее всего он осел, каким образом мне промыть? По какой схеме в данном случае лучше мыть?

OldBrave
VIP Member
Ранг: 1314

30.03.2010 // 22:51:37

Редактировано 2 раз(а)

MeOH пишет:

OldBrave пишет:
Колонку, пока еще она не полностью забита, регенерировать
В пробе пластификатор, который растворялся тетрагидрофураном, скорее всего он осел, каким образом мне промыть? По какой схеме в данном случае лучше мыть?

градиентом ТГФ->i-PrOH->ACN, при переходе ближе к i-PrOH колоночку нужно подогреть до 60С.


Ответов в этой теме: 46 Страница: 1 2 3 4 5 «« назад \|\| далее »»	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты