Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 


ANCHEM.RU » Форумы » Персональные форумы ...
  Персональные форумы | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

ВЭЖХ определение витаминов в кормах, премиксах и прочих продуктах животноводства. >>>

  Ответов в этой теме: 102
  Страница: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]


Верунчик
Пользователь
Ранг: 1


21.08.2007 // 16:34:17     
Редактировано 1 раз(а)



Пожалуйста, помогите с определением биотина методом ВЭЖХ в поливитаминных комплексах.
veragrebennikova{coбaчkа}yandex.ru
ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Senya
Пользователь
Ранг: 49


03.12.2007 // 11:04:41     

Роман пишет:

А вот другие (им я доверяю) поступили так: навеску залили экстрагентом(1% лимонная в смеси этанол80%/вода), добавили гексана, премешали,отцентрифугировали, гексановый слой отделили и повторили еще раз, а потом в хромик. У "Д" рекавери почти 90%.
Понимаешь, А и Е и так нормально переходят в органику, обычная экстракция и все, и выход приличный и пробоподготовка много времени не занимает. Красота да и только! А вот "Д" (засранец такой)нервы всем портит.

Роман скажите как потом делили полученный гексановый экстракт, на НФ или ОФ и при каких условиях. Также не совсем понятно для чего в экстрагенте используется 1% лимонная?
Роман
VIP Member
Ранг: 327


20.01.2008 // 13:22:39     

Senya пишет:

Роман пишет:

А вот другие (им я доверяю) поступили так: навеску залили экстрагентом(1% лимонная в смеси этанол80%/вода), добавили гексана, премешали,отцентрифугировали, гексановый слой отделили и повторили еще раз, а потом в хромик. У "Д" рекавери почти 90%.
Понимаешь, А и Е и так нормально переходят в органику, обычная экстракция и все, и выход приличный и пробоподготовка много времени не занимает. Красота да и только! А вот "Д" (засранец такой)нервы всем портит.

Роман скажите как потом делили полученный гексановый экстракт, на НФ или ОФ и при каких условиях. Также не совсем понятно для чего в экстрагенте используется 1% лимонная?


Лимонная кислота - антиоксидант!
Helen*
Пользователь
Ранг: 2


27.06.2008 // 14:53:10     
Уважаемый Роман!

Недавно я занялась определением витаминов из комплексов, которые у нас производят для животных. А помимо витаминов они содержат дрожжи, сухое молоко, лактозу, сахар, некоторые из них -морские водоросли, некоторые таурин и пр.
Вы писали, что занимались. Очень прошу помогите.
Я начала с биотина, стандарт, сырьё -идёт, методика работает, а вот с пробой сложно.
tatyanab
Пользователь
Ранг: 1


05.11.2008 // 3:18:57     
Уважаемый Роман и др. господа-аналитики! У МЕНЯ ЗАДАЧА- анализ витаминов А и Д в премиксах с возможностью дальнейшего распространения методики (с необходимыми изменениями в связи с более низкими концентрациями вит.) на продукты питания. Я работала ранее с энзимом Максатазой при подготовке проб премиксов, получала 85-90% от спецификации по вит А и Д, но в сравнении с омылением (лаборатория во Франции, работающая с теми же премиксами) мои результаты были ниже,чем у них. Для заказчика это принципиально - он проверяет поставщика премиксов - т.е. в итоге вопрос денег. Так что должна по его требованию перейти на подготовку пробы с омылением. Я работала при обычном освещении (неон или флуоро), м.б. в этом и причина относительно низких результатов. У меня есть методика Ла-Рош с омылением и антиоксидантом. Вопрос: насколько важно освещение, какая нужна лампа для защиты (есть возможность работать в изолированной комнате с вытяжкой) и насколько важно при омылении работать в среде азота, как вы считаете?
Хром. оборудование у меня есть, в плане хроматографии все работает (тьфу-тьфу-тьфу).
Заранее благодарю за ответ.
Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Журнал аналитической химии Журнал аналитической химии
"Журнал аналитической химии" (ЖАХ) издается с 1946 года Российской академией наук (РАН), в настоящее время ежемесячно в двух сериях - на русском и на английском языке. Журнал публикует обзорные и оригинальные статьи по всем направлениям современной аналитической химии.
OldBrave
VIP Member
Ранг: 1331


05.11.2008 // 11:02:02     
Редактировано 3 раз(а)


tatyanab пишет:
Уважаемый Роман и др. господа-аналитики! У МЕНЯ ЗАДАЧА- анализ витаминов А и Д в премиксах с возможностью дальнейшего распространения методики (с необходимыми изменениями в связи с более низкими концентрациями вит.) на продукты питания. Я работала ранее с энзимом Максатазой при подготовке проб премиксов, получала 85-90% от спецификации по вит А и Д, но в сравнении с омылением (лаборатория во Франции, работающая с теми же премиксами) мои результаты были ниже,чем у них. Для заказчика это принципиально - он проверяет поставщика премиксов - т.е. в итоге вопрос денег. Так что должна по его требованию перейти на подготовку пробы с омылением. Я работала при обычном освещении (неон или флуоро), м.б. в этом и причина относительно низких результатов. У меня есть методика Ла-Рош с омылением и антиоксидантом. Вопрос: насколько важно освещение, какая нужна лампа для защиты (есть возможность работать в изолированной комнате с вытяжкой) и насколько важно при омылении работать в среде азота, как вы считаете?
Хром. оборудование у меня есть, в плане хроматографии все работает (тьфу-тьфу-тьфу).
Заранее благодарю за ответ.


Поскольку уважаемый Роман забил на эту тему, отвечу.
Потери витаминов А и Д при омылении - обычное дело. При проведении омыления в стандартных условиях они могут доходить до 40-50%. Это происходит на стадии экстракции и не связано ни с лампами ни с азотом. Работать нужно в отсутствии прямых солнечных лучей. Однако, как проверено на практике, при вводе соответствующих поправок на потери, погрешность в итоге не более 10-15%. Для оценки потерь при экстрагировании калибровку нужно проводить по стандартам, так же подвергнутым процедуре омыления.
Второй способ - избежать стадии промывки экстракта. Экстрагировать после омыления строго небольшой аликвотой гексана, который непосредственно или после фильтрации наносить на колонку.
Третий способ - использовать внутренний стандарт. Я использовал BHT или антрацен, оба не самый лучший выбор. Если найдете лучше, подскажите.

Витамины D2, D3, как показала практика, при детектировании УФ в продуктах питания в интервале разрешенных содержаний без дополнительного концентрирования определить не удается. Однако, при вводе его в составе премиксов с А и Е, в ряде случаев он может быть найден расчетным путем по витамину А (в случае отсутствия в продукте животных жиров).
Что касается премиксов, то D определяется на обратной фазе при увеличении конц. анализируемого раствора в 20 раз.
Фирма Ла-Рош для небольших количеств премиксов анализов не делает, пишут по закладке. Для больших партий у них иногда гуляет содержание витамина А в пределах ~15% от границ, однако содержание D - всегда стабильно.
OldBrave
VIP Member
Ранг: 1331


05.11.2008 // 11:28:05     
Редактировано 2 раз(а)


Helen* пишет:
Уважаемый Роман!

Недавно я занялась определением витаминов из комплексов, которые у нас производят для животных. А помимо витаминов они содержат дрожжи, сухое молоко, лактозу, сахар, некоторые из них -морские водоросли, некоторые таурин и пр.
Вы писали, что занимались. Очень прошу помогите.
Я начала с биотина, стандарт, сырьё -идёт, методика работает, а вот с пробой сложно.


Поскольку уважаемый Роман забил на эту тему, отвечу.
Уважаемая Helen* выбор биотина в качестве "начала" - опрометчивый поступок. Витамин Н - самый трудно-анализируемый ВЭЖХ витамин, по крайней мере для меня.
В качестве исходного может послужить методика определения H в поливитаминных таблетках (НД 42-11256-01):
В одной таблетке содержится 0,085-0,15 мг витамина Н.
Колонка С8 150х4,6 3мкм. Подвижная фаза:85мл ACN + 1г перхлората натрия + 1мл фосфорной к-ты. Объем довести до 1л водой. Скорость потока - 1,2 мл/мин. Детектор - 200 нм. Объем пробы - 100 мкл. Температура - 30С. Время хроматограммы - 30мин. Время удерживания биотина - 6,4мин.
Подготовка стандарта: 67мг биотина в 200мл ДМСО. 2мл, 3 мл, 4мл этого р-ра -> в 200мл, довести водой до метки.
Пробоподготовка: 50г (точная навески) растертых таблеток "Мультивитамин для детей" -> 200 мл колбу, +100мл воды, +3мл ДМСО. Смесь перемешивать на бане (60С) 20 мин, затем довести водой до метки фильтровать и колоть.
Helen*
Пользователь
Ранг: 2


11.11.2008 // 11:33:26     
Огроманое спасибо, методику отработала, использовала как раз все варианты, поняла, что зря с этого начала. Истратила массу времени.
Вся группа В проще.
Если есть мысли об L-карнитине поделитесь, можно ли всё таки обойтись без сорбента с аминофазой, у нас очень сложные смеси по наполнителям, боюсь, что быстро забьём.

мом
Пользователь
Ранг: 296


19.01.2009 // 18:23:53     
Редактировано 1 раз(а)

День добрый. Работает ли тема.
Если да то вопрос такой.
При заколе водного экстракта из листьев, показалось небо в алмазах (цитата коллеги) что делать. Я понимаю, что анализ водарастворимых витаминов в одном флаконе---задача не простая. Но с чего начать. По началу я обрадовался проколов стандарты Аск., Никат., Передок., Тиам., Риб., и наложив их на мою хроматогамму. Но позже прописав на разных длинах, вол я получил разный разное спектральное отношения, то есть это или неоднородные пики, либо вообще не те вещества и это просто со-элюирование. Так что сейчас я в тупике. Что попробовать дальше.
Другой вопрос. Поправите меня если я пне прав, аскорбинка любит низкий pH а фолька pH за 8, что делать если мне нужно приготовить модельную смесь содержащую эти два компонента. При низком pH я не могу растворить толком фольку(приходится растворять при рН 7,5 и выше) если выводить рН позже до 2,5-3 фолька выпадает, что не так.
Еще вопрос, в литературе нашел подвижная фаза 0,8% кислоты в воде на С-18, померил рН 1,42 ограничение для прибора не ниже 2 что делать. Сделал на этой кислоте рН 2 и аск. вышла одним пиком(через 2,5 мин от мерт.) в отличие от фазы 0,4М перхлорат где она выходит почти сразу(за мертвым объемом) да еще и «гребешком».можно ли опускается по рН ниже 2 и чем это чревато.
OldBrave
VIP Member
Ранг: 1331


20.01.2009 // 10:02:14     
Редактировано 3 раз(а)


мом пишет:
День добрый. Работает ли тема.

Достали с водорастворимыми витаминами...

Пишем условия оригинального метода разделения С(2,3;254нм), PP(4,1;254нм), B3(6,2;204нм), B6(11,7;292нм),B1(15,5;254нм), B2(16,4;267нм), Bc(16,8;281нм), B12, H (перечислены в порядке элюирования, время выхода, длина волны детектора):
колонка Luna 5u C18(2) 5мкм 150х2 Phenomenex;
температура колонки - комнатная, 20-25С;
Элюенты готовим разбавляя раствор 20мМ гексансульфоната Na в 0,025н H2SO4;
элюент А - 20мМ гексансульфоната Na в 0,025н H2SO4 + ацетонитрил 1:1 v/v;
элюент В - 10мМ гексансульфоната Na в 0,025н H2SO4;
градиент: 0-0,5мин 5%А
0,5-25мин (5->68)%А
25--25,5мин (68->5)%А
кондиционирование - 20мин, 100%В;
поток - 0,4мл/мин;
объем петли - 5 мкл;
общая продолжительность цикла - 60мин.
Для стабилизации условий разделения необходим один полный холостой цикл.
Пробоподготовка: измельченное растительное сырье 2г +2г 40мМ (возможно меньше) раствора аммиака озвучивают при 30-40С в течение 15мин. Смесь центрифугируют 20мин 4000 об/мин, супернатант фильтруют 0,45мкм, собирая 0,5-1мл фильтрата и хроматографируют.
Удачи!

  Ответов в этой теме: 102
  Страница: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
  «« назад || далее »»

Ответ на тему


ААС, ИСП-АЭС, ИСП-МС - прямые поставки в 2022 году

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]


ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2022
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты