Форумы ANCHEM.RU: HPLC комплексного растительного препарата

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

HPLC комплексного растительного препарата >>>

  Ответов в этой теме: 80
  Страница: 1 2 3 4 5 6 7 8
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]

Леонид
VIP Member
Ранг: 5266

04.12.2003 // 12:20:50

Ну что ж, Вы все правильно поняли. Приятно пообщаться с сообразительным человеком. Если будут проблемы - обращайтесь, всегда рад помочь.
Успехов!

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

leshich
Пользователь
Ранг: 69

04.12.2003 // 16:01:23

snsychev пишет:
Извините, а Вы откуда? Дело в том, что слова:"ето", "екстракт" и "етанол" пишутся через букву "э". Например: "это", "экстракт", "этанол".
Опыт решения Ваших задач есть, начинать нужно с обзорных многоволновых хроматограмм в ОФ ВЭЖХ на универсальных элюентах типа: 0.02 М КН2РО4 + фосфорная кислота + диэтил или триэтиламин с рН=2.5 - 3 в градиенте метанола от 0 до 45%.
Сычев

Скажите пожалуйста, а диэтил или триэтиламин в какой концентрации брать?

Леонид
VIP Member
Ранг: 5266

04.12.2003 // 16:12:30

Обычно эти добавки делают на уровне 0,5 - 2 %. Но если у Вас нет среди компонентов органических оснований (в чем, пожалуй, Вы уверенными быть не можете), то можно вполне обойтись и без добавки амина.

leshich
Пользователь
Ранг: 69

08.12.2003 // 18:08:43

А что нужно ставить в Reference Wavelength?

По умолчанию стоит 550 nm, Bandwidth 100.
Насколько это правильно, может вообще его вырубить?

Andrew
VIP Member
Ранг: 1370

08.12.2003 // 20:57:04

Леонид пишет:
Обычно эти добавки делают на уровне 0,5 - 2 %. Но если у Вас нет среди компонентов органических оснований (в чем, пожалуй, Вы уверенными быть не можете), то можно вполне обойтись и без добавки амина.

А при наличии органических оснований (да и без них)хорошо вместо фосфорной работает трифторуксусная кислота, которая, кстати гораздо стабильнее в разбавленных растворах. 0,025 М ТФУ стоит при комнатной температуре месяц и не жужжит (в смысле - микроорганизмы не заводятся). У меня универсальный градиент 5-70% АН ,(а остальное 0,025М ТФУ)за 3000 мкл на 2 мм колонке.

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Испытательный лабораторный центр ЦГЭ Москвы
ИЛЦ аккредитован в «Системе аккредитации лабораторий, осуществляющих санитарно-эпидемиологические исследования, испытания».

Леонид
VIP Member
Ранг: 5266

09.12.2003 // 8:56:08

leshich пишет:
А что нужно ставить в Reference Wavelength?
По умолчанию стоит 550 nm, Bandwidth 100.
Насколько это правильно, может вообще его вырубить?

Если дословно перевести, то это "длина волны сравнения" и "ширина диапазона". Возможны и вариации толкования, так как английский язык очень беден и неконкретен, не то, что немецкий.
Мне трудно представить, что этим хотели сказать производители прибора.
Если нет инструкции, то попробуйте методом тыка: по очереди произвольно измените эти параметры вверх и вниз и посмотрите, что изменится на хроматограмме.

Леонид
VIP Member
Ранг: 5266

09.12.2003 // 9:09:48

Andrew пишет:

Леонид пишет:
Обычно эти добавки делают на уровне 0,5 - 2 %. Но если у Вас нет среди компонентов органических оснований (в чем, пожалуй, Вы уверенными быть не можете), то можно вполне обойтись и без добавки амина.
А при наличии органических оснований (да и без них)хорошо вместо фосфорной работает трифторуксусная кислота, которая, кстати гораздо стабильнее в разбавленных растворах. 0,025 М ТФУ стоит при комнатной температуре месяц и не жужжит (в смысле - микроорганизмы не заводятся). У меня универсальный градиент 5-70% АН ,(а остальное 0,025М ТФУ)за 3000 мкл на 2 мм колонке.

Андрей! Можно работать с добавкой любой достаточно сильной кислоты, но фосфорная предпочтительней, чем ТФУ по трем причинам:
Во-первых, она дешевле и доступней,
Во-вторых, обладает буферным (т.е. рН-стабилизирующим) действием, а ТФУ - нет.
В-третьих фосфорка прозрачна в более широком спектральном диапазоне, чем ТФУ.
Если эти доводы менее существенны, чем сохранность элюента, - что ж, цвет веревки - дело вкуса.

leshich
Пользователь
Ранг: 69

09.12.2003 // 10:35:05

Редактировано 1 раз(а)

Леонид пишет:
[Если дословно перевести, то это "длина волны сравнения" и "ширина диапазона". Возможны и вариации толкования, так как английский язык очень беден и неконкретен, не то, что немецкий.
Мне трудно представить, что этим хотели сказать производители прибора.
Если нет инструкции, то попробуйте методом тыка: по очереди произвольно измените эти параметры вверх и вниз и посмотрите, что изменится на хроматограмме.

Прибор HP, причём смесь из 1050 и 1100, насколько понял из Help, на этой волне снимается как бы контроль и вычитается из рабочей длины волны, сделано для того, чтоб базовая линия не ползла при, например, градиенте. Просто вчера возникла бредовая ситуация, аж самому стыдно, но понять не могу, в чем дело - колол отдельные экстракты - выходили плохо, показались пики маленькие, потом решил заколоть сразу смесь, причём в 10 раз большей концентрации- не вышло вообще ничего, причем градиент ставил от 2 до 100% метанола, только на 100 % пару микропиков. Отключал эту волну сравнения- почему и вопрос про нее возник- результата тоже не было никакого. Бред, короче.

Переделал образец, решил перейти на ацетонитрил, сейчас мою колонку, потом попробую заколоть.

Леонид
VIP Member
Ранг: 5266

09.12.2003 // 11:18:43

При таком раскладе надо, конечно, эту опцию отключить. А то еще сожрет несколько пиков, поглощающих на этой длине волны.
Метанол доводить до 100% даже на слабом буфере не стоит. Обязательно вывалится соль и может забить колонку. Будьте готовы к тому, что при переходе с метанола на ацетонитрил вид хроматограммы несколько изменится, в частности, может увеличиться ассиметрия пиков полярных компонентов и даже измениться порядок выхода пиков.
Не увлекайтесь большими концентрациями при дозировании экстрактов. Если компоненты поглощают в УФ, Вы их и так увидите, а перегрузить колонку и сократить срок использования предколонки при больших дозировках более реально.
Если исчезли пики - что-то не так с детектором. Проверьте протекает ли через него элюент из колонки и не слишком ли загрублена чувствительность.
Следите за давлением, если подскочило - пора менять предколонку и регенерировать аналитическую колонку. Довольно эффективен 80% изопропанол, только расход элюента раза в два стоит уменьшить. Не помешает промыть и узел ввода. Может какая грязь села в реодайне.
Это все общие рекомендации, но заочно большим помочь не смогу.

leshich
Пользователь
Ранг: 69

09.12.2003 // 11:45:27

А со 100% ацетонитрилом тоже нельзя работать?


Ответов в этой теме: 80 Страница: 1 2 3 4 5 6 7 8 «« назад \|\| далее »»	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты