| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Информация по ВЭЖХ органических оснований >>>
|
 |
| Автор | Тема: Информация по ВЭЖХ органических оснований | |||||
|
Лидия VIP Member Ранг: 436 |
 30.03.2005 // 9:23:03
Уважаемые коллеги. Не встречал ли кто обзоров и статей общего плана, посвященных современной ВЭЖХ органических оснований. Язык оригинала большого значения не имеет (кроме японского, китайского, арабского, суахили и прочей экзотики  ).
|
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
30.03.2005 // 16:30:35
Лидия, наверное, нет. Никто так задачу, вобщем, не ставит. Есть большие статьи Киркланда по тестированию современных ВЭЖХ фаз на стандартных "основных" тестах. |
|||||
|
Islander VIP Member Ранг: 1065 |
30.03.2005 // 17:27:33
Редактировано 1 раз(а) Есть по катионообменной хроматографии: По обращенке ничего лучше, чем то, что предложил Константин, нет. Ну, еще есть лекция проф. Энгельгардта. Есть кое-какие фирменные публикации по пентафторофенильным фазам: Ничего приличного (в смысле обзоров) нет по хроматографии органических оснований на немодифицированном силикагеле, к которой я лично имею особую слабость. Только фирменные проспекты есть по цирконовым (ZirChrom, Discovery Zr) фазам и по смешанным привитым фазам (Sielc). А такого, чтобы все покрыть, обсудить и оценить, к сожалению, нет. |
|||||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
30.03.2005 // 18:10:33
По повду обращенки и ионной сказали. На стандартных С18 обращенках, без модификации - Киркланд. На всякий фазах с polar embedded group и polar endcapping - есть что-то в LC-GC из обзоров. С модификацией - кто во что горазд. В ионной все очень хорошо выходит на Дионексах, аппликашки на их сайте. Только надо помнить, что емкость у них ограниченная, и зависит от рН элюента и рН пробы. Могу теперь перейти к экзотике. Я, бывало, развлекался анализом азотистых оснований в нормальной фазе. Все обычно развлекаются модификацией солями типа смесей уксусная к-та-триэтиламин, или то же с водой и т.д., но иногда хорошие результаты можно получить и без этого. К примеру, я (кланус!) получал идеально симметричный и эффективный пик никотина на обычной чешской аминофазе на элюенте гексан-3% изопропанола-1% укс.к-ты. Там же симметричным пиком выходил хинин, но он был уже сильно уширен. В этих же условиях на чешском же силикагеле (без аминофазы) оба пика выходили уширенными и страшно хвостатыми, как положено. |
|||||
|
Islander VIP Member Ранг: 1065 |
30.03.2005 // 20:14:55
Я предпочитаю немодифицированный силикагель, подвижные фазы 80-95% ацетонитрила и 5-20% воды с добавками TFA (0.01-01%), муравьиной, уксусной (0.1-5%) и иx аммониевых солей (0.5-5mM). Пример с морфином я уже где-то приводил, метиленовый синий, опять же. На западе обычно этот режим называют HILIC. Работает практически с любыми основаниями, дает симетричные пики. Такие же ПФ работают и на PFP, но не со всеми основаниями, лишь с некоторыми. |
|||||
|
Лидия VIP Member Ранг: 436 |
31.03.2005 // 8:47:06
Большое спасибо всем за информацию. Эти моменты мне были известны, многими из них интенсивно занимается Леонид. Просто я думала, что в этой области появилось нечто принципиально новое, что ускользнуло от моего внимания. |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
31.03.2005 // 12:36:12
Евгений, я с этим HILICом на чистом силикагеле никак не пойму. Привитые фазы в этом режиме у меня всегда работали, а силикагель - нет. То есть работал, но колонка быстро теряла эффективность (недели за две) и быстро набирала сопротивление (15 см через 2 недели давала 200 атм на 80% ацетонитриле). Может, это силикагель у меня какой-то не такой был? Обычный Separon SGX. |
|||||
|
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
31.03.2005 // 13:15:34
Редактировано 1 раз(а) С вашего позволения, коллеги, я тоже встряну в тему...  Костя! Этот режим имеет несколько довольно жестких ограничений: 1. Не рекомендуется работать на ацетонитрильных элюентах при рН выше 5.5, а для метанольных - и того ниже. Трудно сказать, с чем это связано, но кажущийся рН водно-органических растворов сильно повышантся и начинается заметное растворение силикагеля. Как выход из положения, можно применять коротенькую насыщающую колоночку с силикагелем в линии подачи элюента, но не на всех приборах это можно реализовать (на Милихроме это сделать весьма затруднительно). 2. Не следует применять крутой и протяженный градиент, особенно в присутствии метанола. Вполне достаточно изменения его содержания на уровне 5-8%, чтобы значительно изменить удерживание. В противном случае есть опастность, что соль может выпасть прямо в колонке и тотально ее забить. 3. Следует избегать применения солей, склонных образовывать пересыщенные растворы, а также кислот, способных к образованию малорастворимых солей и аддуктов с органическими основаниями (например, лимонную или винную). 4. Если формируется градиент из двух компонентов, не стоит в качестве сильного компонента применять чистый ацетонитрил, равно как и другой растворитель. При соблюдении этих условий тот же Силасорб 600 выдерживал у меня до 800 и более вколов. Для силикагелей с привитыми фазами это все не столь критично, но от греха подальше лучше и там соблюдать эти ограничения, особенно при использовании морально устаревших некачественных сорбентов. |
|||||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
31.03.2005 // 13:48:24
Редактировано 1 раз(а) У меня, по-моему, было закислено, перхлорной. Насчет рН - вроде бы ниже 5.5. Значит, дело в морально устаревшем адсорбенте. Но, позвольте, не мог же я себе позволить развлекаться на рабочих колонках! Тем более, что они тоже набиты, вобщем-то, тоже морально устаревшим силикалегем. А 800-то вколов - это не так-то уж и много. При интенсивной работе - месяца два. Нет уж, увольте. Эдкеппированная аминофаза здесь, наверное, лучший выбор. Кстати, а почему их так редко эндкеппируют? Лень, что ли? |
|||||
|
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
31.03.2005 // 14:07:23
Ну 2-3 месяца работы - это не так мало для копеечной колонки, учитывая что вводился достаточно грязный образец. Ты бы привел полностью условия анализа и объект, чтобы можно было разобраться, где там собака порылась. А что касается аминофазы (нитрила тоже), то у нее коротенькая цепочка и нет таких стерических затруднений, как при пришивке С18. А потому и нет значительных не закрытых участков, которые вносили бы ощутимый вклад в процесс хроматографирования образца. Потому, наверное, и не эндкепируют... |
|||||
|
Islander VIP Member Ранг: 1065 |
31.03.2005 // 15:37:16
Не могу сказать, с такими проблемами не сталкивался. Используем Luna Si (пробовал Inertsil Si, тоже работает), в основном 5мкм 50х4.6мм, последний метод на 3мкм 150х3мм, ни разу давление не росло даже после многих тысяч заколов. Правда, удерживание со временем слегка уменьшается и эффективность тоже, но не быстро. А работаем мы все-таки с экстрактами плазмы крови, иногда всего лишь после осаждения белков ацетонитрилом... Пожалуй, в наших условиях они даже дольше живут, чем обращенка. А потом, HILIC HILICу рознь. У меня соли редко бывает больше 1мМ, а ТФУК чаще всего 0.01%, редко до 0.1%. С градиентом не работаю вообще. Из привитых фаз предпочитаю для этих целей Allure PFP (Restek), совсем другая селективность (сравнивал со многими другими PFP, эта лучше всех). |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 42
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
