| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Витамины методом микроколоночной ВЭЖХ >>>
|
 |
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
 06.05.2011 // 17:53:48
И от этого что-то меняется? 
|
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
Анна биохимик Пользователь Ранг: 4 |
30.04.2013 // 16:22:40
Если не секрет расскажите пожалуйста как у вас дела обстоят с жирорастворимыми витаминами? У нас большая проблема с их постановкой, витамин К очень плохо выходит... И пробоподготовка не очень удобная. А в водорастворимых постоянно рибофлавин лезет в холостой, уже как ни промывали, все равно есть. Подскажите, пожалуйста, может кто-то сталкивался с такой же проблемой? |
|||||
|
Serga Пользователь Ранг: 1806 |
01.05.2013 // 8:29:33
Анна (михална?) вы так вопрос ставите, что чел вам должен целый трактат написать. Ни условий, ничего не привОдите, но этот "лезет", а тот "не виден, как и Сатурн"? Что за детские вопросы? По витаминам только ленивый не публиковался и теперь море макулатуры разной издается. Читайте в тырнете все можной найти. И не надо было эту некротему поднимать. Постите новый тред, с учетом замечаний. |
|||||
|
valerra Пользователь Ранг: 141 |
11.05.2013 // 9:45:05
Когда попал на фармпроизводство, хозяина которого убедили в том, что хроматографическая колонка не живет больше года, даже если просто лежит без работы  то я, конечно оттянулся по полной программе - и по фазам прошелся и по зерну, и геометрическим размерам. И общее впечатление сложилось так, что чем меньше диаметр колонки, тем почему-то хуже воспроизводимость. Т.е. если из диаметра 4,6 по десяти закроем пробы удавалось выжать относительное стандартное отклонение площади пика порятка 0,01%, то из 2,0 RSD ниже 0,3% не получалось. Если у препарата допуск по количественному +/- 5%, то это уже немного критично. Поэтому оставил только один диаметр - 4,6 мм, даже для зерна 1,8, а от остальных размеров отказался.
|
|||||
|
vmu Пользователь Ранг: 1235 |
11.05.2013 // 20:21:14
А объём пробы для колонок обоих размеров был одинаковым? А площади пиков сильно различались? Чем меньше объём вводимой пробы и площадь пика, тем выше RSD. |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
+Xenofil Пользователь Ранг: 1433 |
12.05.2013 // 11:40:09
Вот! Мне сразу захотелось уточнить под какую конфигурацию (4,6 или микро…) был рассчитан объем имеющегося в системе детектора. Ставить микроколонку, обеспечивающую разделение малого объема пробы, без соответствующего ей по объему детектора, видимо, некорректно. Когда аналит расползается по здоровой кювете детектора, то обеспечить метрологические характеристики всегда легче с большим объемом пробы. Так можно обосновать и применение еще более широких колонок. Чем то мне это напоминает классику жанра – измерение температуры насекомых во времена отсутствия температурных микродатчиков. Типа – взять стакан жучков (муравьев) и сунуть туда обыкновенный ртутный термометр. Другой вопрос, что при этом надо еще будет учитывать особенности теплообмена со средой отдельного насекомого, в отличие от неизбежно более высокой «насыпной» температуры. |
|||||
|
Serga Пользователь Ранг: 1806 |
16.05.2013 // 6:29:59
А тут есть, о чем рассуждать? Он там "резвился", а вам делать нефиг, как его результаты разъяснять?
|
|||||
|
valerra Пользователь Ранг: 141 |
28.05.2013 // 22:29:21
Да я и словов то таких не знаю. Мне надо дать продажный и беспроблемный товар. А в случае Минска объем пробы упирается в то, что контролирующая организация имеет только один прибор с автосамплером. На остальных стоят петли ручного ввода с минимальным объемом в 2 микролитра. От этого и пляшу А объем ячейки детектора - так про такое вообще никто не слышал. Что привезут - на том и работа идет. А на том, что возят - диаметр 4,6 оказался оптимальным. |
|||||
|
FeroxDS Пользователь Ранг: 15 |
19.06.2013 // 21:24:47
Доброго времени суток колеги. Хотел бы получить помощи от вас. Сначала предыстория. Я сам молекулярный биолог, и основной моей работой является анализ продуктов на содержание ГМО. Не так давно у нас сократился штат и меня отправили в лабораторию химического анализа осваивать ВЭЖХ. Сейчас основной задачей является определение водорастворимых витаминов В1, В2, В3, В5, В6 и фолиевой кислоты. Прочитав множества разных методик остановился на одной из них, вроде результаты получаю, но они какие-то не однозначные. Иногда результаты совпадают с заявленными в анализируемых продуктах, иногда вообще зашкаливают за все разумные пределы. Очень хотел бы получить от вас помощи или совета. Ниже постараюсь описать методику, по которой я работаю. ВЭЖХ agilent 1200 с VWD и FLD детекторами, Колонка Zorbax SB-C18 4,6х150мм 3,5мкм Подвижная фаза А –ACN Пподвижная фаза В – Н2О Рh 3,0 доведенная H2SO4(по методике 2,0, но я побоялся испортить колонку поэтому ставлю 3,0) Стандартные растворы витаминов готовлю из расчета 50мг на 50мл. Так чтобы концентрация была 1мг на 1 мл. Для каждого витамина отдельно Рабочий стандартный раствор: 20мкл Стандартного раствора (каждого из шести витаминов) + 880мкл HCl 0,1М. Таким образом стандарт для прокола содержит по 20мкг каждого из витаминов. Характеристики вкола: Вкол 20мкл; поток 1,5 мл; градиент 0-3мин 2%А + 98%В, 3,5-10мин 20%А + 80%В (градиент подбирал эмпирически); длина волны VWD - 262нм (для витамина В6 300нм). Делаю в среднем 5 проколов стандарта для насыщения колонки и пока выходящие пики не станут стабильными, после чего запускаю образцы для исследования. Вот тут и начинаются проблемы, методы для извлечения витаминов для разных групп продуктов разные (молочные, премиксы, бады и т.д.). Пытался делать и по Скурихину и по ГОСТам и по другим методикам и всегда результаты разные. Остановился на одной методике: 1г продукта + 10мл HCl 0,1М, все это гомогенизирую, растворяю (по мере возможности), помещаю в пробирку с прикручивающийся крышкой, и ставлю при 65С на твердотельный термостат 10мин. Затем на УЗ Баню 15 мин, после чего фильтрую, ц-фугирую при 8тыс обор/10мин., отбираю 200мкл фильтрата и довожу до 1мл 0,1М HCl . Собственно, это и вкалываю. При получении результатов с ВЭЖХ количество некоторых витаминов может на порядок быть больше чем заявлено в ТУ. Чувствую, что где-то допускаю ошибку, но не могу понять где. Подскажите! Заранее благодарю! С уважением. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 39
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
