| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
методики орпеделения лекарств методом ВЭЖХ?? >>>
|
 |
|
Islander VIP Member Ранг: 1065 |
 03.02.2007 // 17:40:18
Не знаю, как в России, но в Канаде и Штатах цены крысиных плазмы и сыворотки будут заметно больше, чем цены тех же объемов продуктов из человечьей донорской крови. Мы наши методики отрабатываем на донорских продуктах. Образцы для подобных анализов отбираются из вены, для этого существуют специальные вакуумированные пробирки с иглой, содержащие необходимый антикоагулянт (гепарин, ЭДТА) Объем их - от двух до десяти мл. Можно, конечно, и обычным шприцом. В фармакокинетических исследованиях кровь у добровольцев отбирают иногда каждые 10-15 минут (сразу после приема лекарства, если вещество быстро всасывается, потом интервалы растягиваются). От этого еще никто не умирал. На общий объем крови, отобранный за определенный промежуток времени, существуют строгие нормы. Полагаю, в России тоже. Если белки коагулируют во время ТФЭ - считай, образец потерян. Патрон забъется намертво. Поэтому промывают сперва водным раствором с низким содеожанием органики (до 5%), смывая некоагулировавшие белки. Другое дело, сорбент выбирается так, чтобы с ним целевое вещество связывалось сильнее, чем с белками. В большинстве случаев, это возможно, хотя есть и исключения. Витамин Д, например, от белка оторвать - большая проблема. Но со фторхинолонами проблем не будет, проверено. А проверяется это очень просто - измеряется степень извлечения путем добавления известного количества лекарства в плазму (сыворотку) до и после экстракции. В предложеном мной варианте для ципрофлоксацина и гатифлоксацина степень извлечения была не хуже 80% (точные величины не помню). Осаждение белков ТФУ, метанолом или ацетонитрилом обычно дает очень высокие степени извлечения (но есть и здесь исключения, на вскидку не помню), но приводит к разбавлению пробы (что требует более высокой чувствительности), и полученный образец гораздо грязнее. А чтобы скомпенсировать необратимые потери, градуировочные образцы тоже готовят в той же матрице (плазме, сыворотке, моче) того же биологического вида (обычно используют смесь от нескольких доноров). Готовят также проверочные образцы с известной концентрацией (3-5 уровней), которые случайным образом распределяют среди клинических. Весьма желательно использование внутреннего стандарта сходной химической природы, чтобы скомпенсировать все различия от патрона к патрону и от образца к образцу. Впрочем, это азы ремесла, и все присутствующие их хорошо знают. |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
Korvet Пользователь Ранг: 1114 |
03.02.2007 // 20:28:05
Так просто, ради интереса, вдруг когда пригодиться... что-то я не понял, определяемые вещества связываюстя с белками в ходе метаболизма, или просто можно добавить определяемое вещество в кровь и моделировать связывание с белком?... |
|||||
|
Islander VIP Member Ранг: 1065 |
03.02.2007 // 21:10:35
Речь идет не о химических реакциях связывания, а об образовании водродных связей и прочих аддуктов с белками. Для этого достаточно полчаса потрясти плазму с добавкой раствора (обычно 1% по объему) анализируемого вещества на шейкере. С кровью обычно не работают, она - объект неудобный. Клинические образцы крови немедленно перерабатывают в плазму или сыворотку и замораживают. Исключение - вещества, связывающиеся с эритроцитами. Есть и такие. |
|||||
|
Islander VIP Member Ранг: 1065 |
03.02.2007 // 21:23:05
Да, к вопросу об азах. Нашел, наконец, что-то на русском по требованиям, предъявляемым к подобного рода исследованиям: Об аналитических методиках там только по абзацу. Странно, что до нормативных документов с требованиями к аналитическим методикам, применяемым в таких исследованиях, переводчики-законодатели еще не добрались... |
|||||
|
Korvet Пользователь Ранг: 1114 |
04.02.2007 // 7:39:22
Спасибо, теперь ясно |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
04.02.2007 // 13:37:28
Впрочем, это азы ремесла, и все присутствующие их хорошо знают 
|
|||||
|
Serga Пользователь Ранг: 1806 |
05.02.2007 // 14:24:38
 Да так же все, так же. Как и во времена, которые ты еще (может) помнишь. |
|||||
|
Serga Пользователь Ранг: 1806 |
05.02.2007 // 14:27:00
А у нас как получится. Можно и побездельничать иногда. Одни делают вид, что платят, а другие- что работают.
|
| |
||
|
Ответов в этой теме: 25
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
