Форумы ANCHEM.RU: ВЭЖХ: проблема миграции пика одного из аналитов

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

ВЭЖХ: проблема миграции пика одного из аналитов >>>

  Ответов в этой теме: 36
  Страница: 1 2 3 4
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]

Avet
Пользователь
Ранг: 1086

01.02.2017 // 13:12:46

kvot пишет:

Avet пишет:
Благодарю Вас за информацию и совет, но загвоздка вот в чем: это стандартная методика, известная уже "сто лет". Именно по этой методике анализируется качество ГЛМ Бисептол на одном из ведущих фармзаводов за рубежом.Естественно, валидированная-перевалидированная. Поэтому не думаю, что проблема в методике. Пока грешу на прибор, но что это может быть - даже идей нет.
Не подскажите, режим элюирования градиентный или изократика? Если изократика, то как осуществляется смешивания компонентов (органической и водной фазы) насосом или оператором? Что за прибор: модель и производитель? Что за колонка: бренд и производитель? Хотелось бы более полное описание условий хроматографирования.

Изократика, компоненты смешиваются оператором в одной емкости, колонка x-Bridge 250x4.6, 5мкм, прибор Waters e2695.

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

лот
Пользователь
Ранг: 1172

01.02.2017 // 14:01:52

Редактировано 1 раз(а)

Avet пишет:
Время удерживания одного из аналитов стабильное, а второй, который был перед первым, движется и движется вправо, "перешагитвает" через второй аналит и уходит дальше вправо.

"Перешагивает" или "перешагнул". Извините, может я что-то не понял. Т.е. "перешагнул" и дальше отрыв увеличивается. Или с какого то момента он снова встаёт на место и снова начинает "перешагивать"? Или он давно уже перешагнул (перешагивать перестал) и продолжает удаляться.

Avet
Пользователь
Ранг: 1086

01.02.2017 // 14:08:06

SergeyK пишет:

Avet пишет:
Пока грешу на прибор, но что это может быть - даже идей нет.
Соберите поверочные данные. Ползет оно там или нет.

С поверкой все в порядке, время удерживания не ползет

Avet
Пользователь
Ранг: 1086

01.02.2017 // 14:14:40

лот пишет:

Avet пишет:
Время удерживания одного из аналитов стабильное, а второй, который был перед первым, движется и движется вправо, "перешагитвает" через второй аналит и уходит дальше вправо.
"Перешагивает" или "перешагнул". Извините, может я что-то не понял. Т.е. "перешагнул" и дальше отрыв увеличивается. Или с какого то момента он снова встаёт на место и снова начинает "перешагивать"? Или он давно уже перешагнул (перешагивать перестал) и продолжает удаляться.

Время его удерживания ползет стабильно, достигает второго пика, перешагивает и ползет дальше. На место не возвращается и не дрейфует туда-обратно.

Волгин
VIP Member
Ранг: 1335

01.02.2017 // 16:00:33

Тогда еще вопросы. Вы писали, что от вкола к вколу сдвиг времени удерживания 2-3 минуты. При этом обратного дрейфа нет. Сколько суток продолжается этот процесс? Не работала ли колонка до этого в (другом) режиме ион-парной хроматографии? Отмываете ли Вы колонку на ночь и если да, то чем? Правильно ли я понимаю, что ТЭА - это триэтиламин?

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Испытательный центр ФГУ «Балтийская дирекция по техническому обеспечению надзора на море»
Федеральное государственное учреждение «Балтийская дирекция по техническому обеспечению надзора на море» создано в соответствии с распоряжением Правительства Российской Федерации и осуществляет свою деятельность на территории Российской Федерации, во внутренних морских водах, территориальном море, в исключительной экономической зоне и на континентальном шельфе Российской Федерации.

Avet
Пользователь
Ранг: 1086

02.02.2017 // 11:59:29

Волгин пишет:
Тогда еще вопросы. Вы писали, что от вкола к вколу сдвиг времени удерживания 2-3 минуты. При этом обратного дрейфа нет. Сколько суток продолжается этот процесс? Не работала ли колонка до этого в (другом) режиме ион-парной хроматографии? Отмываете ли Вы колонку на ночь и если да, то чем? Правильно ли я понимаю, что ТЭА - это триэтиламин?

Благодарю за вопросы. Процесс сутками не измеряли, а наблюдали эту нехорошую динамику в процессе ряда хроматограмм до их окончания. Пик стабильно мигрировал почти до конца хроматограммы, при этом, естественно, расширяясь. А вот идея недостаточной отмывки, если был ион-парный процесс, это отлично. Нужно будет выяснить. ТЭА - триэтиламин. Спасибо за идею.

Avet
Пользователь
Ранг: 1086

03.02.2017 // 11:18:08

Avet пишет:

Волгин пишет:
Тогда еще вопросы. Вы писали, что от вкола к вколу сдвиг времени удерживания 2-3 минуты. При этом обратного дрейфа нет. Сколько суток продолжается этот процесс? Не работала ли колонка до этого в (другом) режиме ион-парной хроматографии? Отмываете ли Вы колонку на ночь и если да, то чем? Правильно ли я понимаю, что ТЭА - это триэтиламин?
Благодарю за вопросы. Процесс сутками не измеряли, а наблюдали эту нехорошую динамику в процессе ряда хроматограмм до их окончания. Пик стабильно мигрировал почти до конца хроматограммы, при этом, естественно, расширяясь. А вот идея недостаточной отмывки, если был ион-парный процесс, это отлично. Нужно будет выяснить. ТЭА - триэтиламин. Спасибо за идею.

Проверили вопрос истории колонки. Ничего ион-парного не было. А кроме того, так себя ведет и новая колонка. Также проверили ту же работу на нескольких ВЭЖХ приборах. Результаты те же, т.е. на прибор грешить не стоит.

SergeyK
Пользователь
Ранг: 2168

03.02.2017 // 13:08:30

Редактировано 4 раз(а)

Avet пишет:

Avet пишет:

Волгин пишет:
Тогда еще вопросы. Вы писали, что от вкола к вколу сдвиг времени удерживания 2-3 минуты. При этом обратного дрейфа нет. Сколько суток продолжается этот процесс? Не работала ли колонка до этого в (другом) режиме ион-парной хроматографии? Отмываете ли Вы колонку на ночь и если да, то чем? Правильно ли я понимаю, что ТЭА - это триэтиламин?
Благодарю за вопросы. Процесс сутками не измеряли, а наблюдали эту нехорошую динамику в процессе ряда хроматограмм до их окончания. Пик стабильно мигрировал почти до конца хроматограммы, при этом, естественно, расширяясь. А вот идея недостаточной отмывки, если был ион-парный процесс, это отлично. Нужно будет выяснить. ТЭА - триэтиламин. Спасибо за идею.
Проверили вопрос истории колонки. Ничего ион-парного не было. А кроме того, так себя ведет и новая колонка. Также проверили ту же работу на нескольких ВЭЖХ приборах. Результаты те же, т.е. на прибор грешить не стоит.

Прибор и колонку, получается, вы исключили, теперь проверяйте реактивы. Состав подвижной фазы какой? А то по вашему описанию, у вас там один чистый ацетонитрил с ускусной кислотой и ТЭА. И тогда измерить pH в этом вы не имеете никакого права. Добавьте 2-5% воды и откондиционируйте колонку, долго, часов 6.

лот
Пользователь
Ранг: 1172

03.02.2017 // 13:17:06

Редактировано 1 раз(а)

Avet пишет:
Также проверили ту же работу на нескольких ВЭЖХ приборах. Результаты те же, т.е. на прибор грешить не стоит.

Никогда больше этого не делайте - можете запороть колонки на всех хроматографах и испортить все колонки. У нас такой печальный опыт был.
Согласен с SergeiК. Проверьте, может как раз перед этим кончилась партия одного из компонент элюента или вообще просто вскрыли очередную, новую бутылку.

Avet
Пользователь
Ранг: 1086

03.02.2017 // 15:10:50

Уважаемые SergeyK и ЛОТ! Отвечаю на оба Ваши поста. Проверку на нескольких приборах проводили, чтобы исключить проблемы с самим ВЭЖХ прибором. Поэтому что здесь такого опасного? И круг сузился: проблема все-же в колонке: около сотни инжекций - все в порядке, а потом пик первого аналита начинает двигаться и двигаться вправо. Что-то начинает происходить с удерживанием именно этого вещества. Второе стабильно на месте. Но так быть не должно. Обнаружили еще один "мелкий" криминал: применялся просроченный триэтиламин. Может и это повлияло. А вот по поводу доведения рН: если в методике сказано: доводим рН, то что же делать - доводим, конечно.


Ответов в этой теме: 36 Страница: 1 2 3 4 «« назад \|\| далее »»	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты