Применение метода ВЭЖХ для исследования фармакокинетики при бактерицидной терапии туберкулеза легких

Тезисы VII конференции "Аналитика Сибири и Дальнего Востока - 2004" »
Устные доклады » Секция 5. Анализ биологических, медицинских и фармацевтических объектов » ...

Применение метода ВЭЖХ для исследования фармакокинетики при бактерицидной терапии туберкулеза легких

Кожанова Л.А., Н.С., Еремеева Л.И., Харламова Ю.М. ,Петренко Т.И., Кизилова

ЗАО “ЭкоНова“, ул. Николаева, 8, kozhanovaeconova.nsk.su,
Новосибирский научно-исследовательский институт туберкулеза, ул. Охотская, 81А.

Туберкулез – одна из основных болезней в развивающихся странах, приводящая к смерти более 3 миллионов людей в год. Из-за большого риска токсических эффектов, а также множественной лекарственной устойчивости микобактерий туберкулеза необходимо строго контролировать уровень лекарств в крови пациента. ВЭЖХ – наилучший способ решения подобных задач. Данное исследование посвящено разработке метода количественного определения изониазида (INH), рифампицина (RIF), пиразинамида (PZA), протионамида (PNA) в сыворотке крови человека с помощью ВЭЖХ и применению этого метода для исследования фармакокинетики при бактерицидной терапии туберкулеза легких в обычной лечебной практике.

Использовали микроколоночный жидкостный хроматограф “Милихром А-02“ (ЭкоНова, Новосибирск, Россия). Разделение проводили на колонке с обращенной фазой (ProntoSIL 120-5-C18 AQ) 2x75 мм в градиентном режиме. Для повышения надежности идентификации хроматографических пиков применяли многоволновую UV детекцию. INH, PZA, PNA определяли одновременно из одной порции сыворотки (осаждение белков 10% трихлоруксусной кислотой), RIF отдельно из другой порции (осаждение белков ацетонитрилом). Градуировочные кривые линейны в широком диапазоне концентраций (0,5 – 45 мкг/мл), воспроизводимость (СКО) и правильность, оцененные для различных концентрационных уровней, находятся в интервале 1,5 – 4,5%. Пределы обнаружения в сыворотке крови составляют 0,2 – 0,5 мкг/мл.

Разработанный метод применяли для изучения фармакокинетических параметров у больных с впервые выявленным деструктивным туберкулёзом лёгких. Показано, что концентрации INH и RIF в крови в первые 2-3 часа после их внутривенного введения значительно превышают их бактериостатическую и бактерицидную активность. Определен период полувыведения этих препаратов. Приём PZA за 2 часа до начала внутривенной химиотерапии приводит к созданию его пиковой концентрации в крови в тот же временной промежуток, когда отмечается и максимальное количество INH и RIF.