Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 


ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Твердофазная экстракция из плазмы >>>

  Ответов в этой теме: 32
  Страница: 1 2 3 4
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]


КонстантинС
VIP Member
Ранг: 2306


04.02.2005 // 12:57:16     

Andrew пишет:
Многие лекарства на 20 - 90% связываются с белками крови. Как они при ТФЭ извлекаются?

Да, я бы обязательно провел эксперименты с варьированием ионной силы образца и температуры для выяснения этого вопроса.
ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Islander
VIP Member
Ранг: 1065


04.02.2005 // 14:15:30     

РоманК пишет:
Если не нужно осаждать белки, то это даже еще лучше. Попробую. Может получится.
Если не секрет, что именно хотите определять?
Andrew
VIP Member
Ранг: 1358


05.02.2005 // 0:42:11     

Islander пишет:

РоманК пишет:
Если не нужно осаждать белки, то это даже еще лучше. Попробую. Может получится.
Если не секрет, что именно хотите определять?

Не секрет - производные фенотиазина.
Извини, Роман, что влезаю, но это может ускорить ответ специелиста
Islander
VIP Member
Ранг: 1065


05.02.2005 // 5:28:05     
Редактировано 1 раз(а)


Andrew пишет:
производные фенотиазина.
Этими заниматься не приходилось, но с близкими по структруре и полярности карбамазепином и его эпокси- метаболитом мы работали совсем недавно. Самое занятное, что использовали как раз полистирольный сорбент (тот самый, сверхсшитый), если не ошибаюсь, марки Cerex PNP (Hologent). Подщелачивали плазму 0.1 н NaOH, и вперед. Подробности не помню (не я делал, а мой сотрудник), надо досье на работе смотреть.
С экстракцией проблем быть никаких не должно, единственное, что может осложнить работу - склонность фенотиазиновых производных к окислению.
По производным фенотиазина есть также немного литературы:
www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?cmd=Retrieve&db=pubmed&dopt=Abstract&list_uids=15335058
www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?cmd=Retrieve&db=pubmed&dopt=Abstract&list_uids=11681520
Vob-la
Пользователь
Ранг: 21


07.02.2005 // 0:37:18     
Лекаственные препараты из сыворотки, в зависимости от их полярности лучше всего концентрировать и извлекать с помощь концентрирующих патронов патронов типа Диапак ("БиоХимМак"). Так называемая флеш хроматография, фишка заключается в правильном подборе систем элюентов для промывки патронов и последующем элюировании нужных компонентов. Это можно проконтролировать с помощью ТСХ. Жедаю удачи!
Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
ВЭЖХ/МС Thermo Fisher Scientific Exactive™ ВЭЖХ/МС Thermo Fisher Scientific Exactive™
Новый масс-спектрометр высокого разрешения, построенный на базе орбитальной ловушки Orbitrap™. Высокое разрешение, точное определение массы, быстрое сканирование делают этот прибор идеальным как для скрининга компонентов в сложных смесях, так и при исследованиях, требующих предельной точности анализа.
[ Информация из каталога оборудования ANCHEM.RU ]
КонстантинС
VIP Member
Ранг: 2306


07.02.2005 // 15:16:13     
Протестую!!! Это явная реклама.
РоманК
Пользователь
Ранг: 58


08.02.2005 // 9:10:45     
Попробовал. Разбавил плазму в два раза водой. Внес добавку. Прокачал через патрон. Промыл 10% этанолом. Смыл целевой компонент этанолом. Высушил в токе азота. Растворил в 0,2 мл и весь этот объем нанес на пластинку. Провел элюирование. Проявил. Визуально найденное количество в образце получилось меньше.
Попробую с щелочью.

Обязательно работать с плазмой или сыворотка тоже подойдет? А то ведь она у меня заканчивается.
РоманК
Пользователь
Ранг: 58


08.02.2005 // 9:14:59     
Вчера ответить не смог. Выскакивала какая-то ошибка.
КонстантинС
VIP Member
Ранг: 2306


08.02.2005 // 11:22:34     
Роман, в описании отсутствует важная деталь - на чем концентрировал, размер картриджа, скорость подачи, объем образца. Не на Элсисфере ли концентрировал-то?
Кстати, если речь пошла о полистироле - не пробовал прямо в образец добавить проц. пять спирта? Я может, добавил, а еще соли, и его погрел бы - то есть сделал все, чтобы уменьшить связывание с белками.
А лучше ТСХ ничего нет? Уж лучше в хроматограф кольнуть-то... а то все это очень расплывчато.. "визуально меньше"...
Islander
VIP Member
Ранг: 1065


08.02.2005 // 14:27:42     
Редактировано 1 раз(а)


РоманК пишет:
Попробовал. Разбавил плазму в два раза водой. Внес добавку. Прокачал через патрон. Промыл 10% этанолом. Смыл целевой компонент этанолом. Высушил в токе азота. Растворил в 0,2 мл и весь этот объем нанес на пластинку. Провел элюирование. Проявил. Визуально найденное количество в образце получилось меньше.
Попробую с щелочью.

На обращенке желательно придерживаться простого правила - для улучшения сорбции забуфиривать на 2 ед. pH в сторону нейтрального вещества отсчитывая от pK целевого продукта. Лучше всегда использовать ту же матрицу, в которой предполагается анализ. Первую промывку лучше выполнять водой (или с 5% органики для полистирола), вторую - подбирать состав с шагом в 5% органики. Желательно проверить второй объем элюирования тоже - вдруг хвостит. Ну и конечно, ТСХ как метод контроля хорошо подходит только для проверки проскока и первой промывки, с натяжкой для второй промывки и второго элюата. Основной элюат надо проверять, сравнивая с раствором теоретической концентрации на хроматографе, стазу получая и выход, и оценивая влияние мешающих примесей. Я обычно закалываю также и вторую промывку, и второй объем элюирования, а проскок и первую промывку оцениваю на том же хроматографе, пропуская через дополнительные патроны, чтобы не пачкать колонку.
После подбора этих основных элементов, если чистота недостаточна, можно приступить к фантазиям на тему дополнительных промывок.

  Ответов в этой теме: 32
  Страница: 1 2 3 4
  «« назад || далее »»

Ответ на тему


ААС, ИСП-АЭС, ИСП-МС - прямые поставки в 2022 году

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]


ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2022
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты