Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 



ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

HPLC-изменение времени удержания при добавлении элюента?! >>>

  Ответов в этой теме: 14
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: HPLC-изменение времени удержания при добавлении элюента?!
leshich
Пользователь
Ранг: 69

12.10.2007 // 13:56:30     
Уважаемые форумчане, помогите пожалуйста понять следующий феномен:
при добавлении в полупустую бутыль емкостью 1 л ещё 500 мл ацетонитрила изменяется время удерживания пика (хлорогеновая кислота) - пик элюируется раньше на 1-2 мин, то есть например выходил в 16 мин, начинает в 14,8 мин после дозаполнения.
Температура элюента такая-же, как и остатка в бутылке, пробовал закручиввать неплотно, чтобы не создавать разность давления - то же эффект. Тефлоновый фильтр на капилляре поменял - на феномен это не влияет. Добавлял ацетонитрил тоже из полупустой бутыли - эффект сохраняестся. Если просто вытащить капилляр на ссеридину бутылки - эффект не наблюдается. Эффект наблюдается на разных образцах и не зависит от природы образца.
Больше пока мыслей нет, может кто подскажет решение - буду благодарен.
Колонка С18 , Система - кислая вода: ацетонитрил, градиент 5-12 % ацетонитрила 10 мин, 12 % - до 15 мин, потом промывка ацетонитрилом до 85%. 25 градусов термостат. Объем пробы 50 мкл.
ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Kalambet
Пользователь
Ранг: 479


12.10.2007 // 14:52:39     
Гипотеза: эффект может зависеть от высоты уровня ацетонитрила (пережатый всасывающий капилляр или что-то в этом роде). Проверка может быть осуществлена подъемом бутылки с ацетонитрилом вместо доливания. Подъем капилляра не поможет.
leshich
Пользователь
Ранг: 69


12.10.2007 // 15:00:16     
Сейчас попробую проверить - поднять бутылку, - и доложу, но не очень понял, в чём принцип. капилляр проверил - абсолютно интактный, только если где-то внутри может пузырьком воздуха перекрыт частично, ну чисто теоретически. Но система прокачивается перед стартом каждый раз, так что воздуха быть не должно. Кстати, на соседнем приборе эффект не наблюдается, так что или прибор, или колонка глючат. Заменить колонку пока не представляется возможным, только на следующей неделе могу попробовать.
Kalambet
Пользователь
Ранг: 479


12.10.2007 // 15:09:13     
Если в капилляр попала какая-то механическая гадость или он пережался, может возникать, например, эффект типа кавитации при всасывании растворителя.
leshich
Пользователь
Ранг: 69


12.10.2007 // 15:57:03     
Похоже, Вы таки были правы - поднял бутылку где-то на пол-метра - в результате пик вышел почти на 9 мин раньше!
Караул!
И что теперь с этим делать, какие будут советы на этот счёт?
Styskin
Пользователь
Ранг: 228


12.10.2007 // 17:10:18     
Странная ситуация. Попробуйте опустить бутыль ниже головки насоса. Заборный фильтр должне быть на дне...
Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Лаборатория стереохимии сорбционных процессов (ЛССП) ИНЭОС РАН Лаборатория стереохимии сорбционных процессов (ЛССП) ИНЭОС РАН
Анализы различных классов соединений (органический синтез, биотехнология, загрязнения почвы, воды, анализ энантиомерного состава) методами ВЭЖХ и ГХ.
leshich
Пользователь
Ранг: 69


12.10.2007 // 17:22:04     
Похоже, всё проще - переставил ацетонитрил на другой канал - эффект исчез, так что похоже клапан на этом канале прохудился.
Спасибо всем откликнувшимся, если будут подробности - сообщу.
leshich
Пользователь
Ранг: 69


12.10.2007 // 17:23:09     

Styskin пишет:
Странная ситуация. Попробуйте опустить бутыль ниже головки насоса. Заборный фильтр должне быть на дне...
К сожалению, сегдня уже нет времени попробовать, так как хотел оставить в работу на выходные серию. Может в понедельник поиграюсь дальше.
Styskin
Пользователь
Ранг: 228


12.10.2007 // 21:27:51     

leshich пишет:
Похоже, всё проще - переставил ацетонитрил на другой канал - эффект исчез, так что похоже клапан на этом канале прохудился.
Спасибо всем откликнувшимся, если будут подробности - сообщу.


Насос градиентный? Какой фирмы и модели если не секрет
leshich
Пользователь
Ранг: 69


15.10.2007 // 11:15:26     
Конечно не секрет
Насос градиентный, 4-х канальный, фирмы Dionex - P680 HPLC Pump.
leshich
Пользователь
Ранг: 69


15.10.2007 // 14:35:42     
Поигрался я тут с утра - оказалось, всё не так просто. Изменение времени удерживания происходит вне зависимости от канала (я правда только на 2.- попробовал, но думаю, этого достаточно).
Ситуация такая - бутыль на месте - пик выходит на 15-й минуте, поднимаю на пол метра выше - пик выходит на 7-й минуте, поускаю ниже насоса на пол-метра - пик выходит на 25-й минуте.
Какие будут мыли по этому поводу? То есть в принципе, всё логично, чем выше - тем легче ацетонитрил закачтвается, тем раньше выходит ипк, это понятно, только вот что поломалось конкретно, у кого какие мысли?
Позвонил в службу тех.поддержки, они с таким не сталкивались, и пока мыслей никаких, но обещали посоветоваться с кем-то и заехать на днях.

  Ответов в этой теме: 14
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

Ответ на тему



ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]

ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2009
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты