| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Глюкурониды, метаболиты >>>
|
 |
|
virtu VIP Member Ранг: 2134 |
 05.07.2007 // 13:36:23
Редактировано 1 раз(а) Кошмар!!!У меня нервный тик начался после прочтения  1)Вы же собиратесь анализировать продукты Вашего синтеза 2)Начальные условия разделения можно применить те, которые Вы уже нашли для С18, далее "поиграете"(с условиями анализа конечно  ) и доведете до ума.3)Насчет детектирования: может строение Ваших соединений проще посмотреть и сделать соответствующие выводы, или в литературе найти "максимумы поглощения" в уф-области спектра?Это если у Вас есть стандарты нужных соединений,если нет тогда:начиная от получения спектрограмм(если стоит у Вас DAD или СФ с возможностью скана) и сравнения с литературными данными(если такие есть) до ЯМР,МС и т.д. 4)И учитывая определяемые концентрации(+состав элюента+матрицу), сделать соответсвующие выводы о адекватности/возможности использования спектрофотометричекого детектирования. |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
серегаа Пользователь Ранг: 29 |
05.07.2007 // 13:48:53
Редактировано 1 раз(а) Так это то все понятно...чем я собственно и занимаюсь....пытаюсь как раз таки и найти побольше информации...собственно для этого то я и обратился к участникам формуа..в надежде найти того, что мог бы частично этим заниматься...синтезы то я уже поставил вчера..вот как получу коекакой пробукт так и буду уже играться с ними.. А вот как с XAD? Я не очень то понял для чего это  и как его можно обойти
|
|||||
|
серегаа Пользователь Ранг: 29 |
05.07.2007 // 15:12:02
Ух, я так и знал,что здесь будут специалисты....Спасибо ВАм за ответ.... Согласен...слишком общный вопрос конечно же получился...но признаюсь это и в моем свете тоже всетаки выглядит больше также..Я сейчас попробую даже привести методику которую я хотел бы воспроизвести. передо мной стоит задача синтеза глюкуронида оланзапина....пока для того чтоб набить руку таким образом чтоб я этот свой опыт мог направить на глюкурониды других аналогиччных препаратов. Нашел несколько методик...и попробую привести их здесь или их ссылки для конкретики. Что касается техники, что у меня есть, так это Агилент 1100 с обычным детектором, есть возможность для снятия ЯМР.спектров и скорее всего будет возможность для МS... "...OLZ 10-N-glucuronide (10-N-glucuronide) was synthesized as follows. To a silylated amber vial, 100 mg (0.32 mmol) of OLZ and 4 ml of acetone were added, and the vial was vortexed until the OLZ dissolved completely. A solution of glucuronic acid (124 mg, 0.64 mmol) in 0.1 M phosphate buffer (pH 7.2) (4 ml) was added, and the mixture was stirred at room temperature for 3 days. Mixtures from several parallel reactions were combined, and the pH of the resulting mixture was adjusted to ;10 with 25% ammonium hydroxide solution. The solution was extracted with ethyl acetate (100 ml), and the organic layer that contained unreacted OLZ was discarded. The aqueous layer was lyophilized to dryness, and the residue dissolved in water. Aliquots (200 ml) of the aqueous fraction were separated on an analytical Inertsil C18 HPLC column. The initial mobile phase was 0.05 M ammonium acetate/acetonitrile (90:10), and a linear gradient of 2.5% acetonitrile/min was started 2 min after injection and continued for 20 min. Flow rate was maintained at 1.0 ml/min. The column effluent was collected at the retention volumes of two closely eluting peaks that corresponded to the two “isomers” of the 10-N-glucuronide. Isolated material was further purified by fractionation on the same HPLC system using isocratic elution (0.05 M ammonium acetate/acetonitrile, 77:23). Purified material was analyzed by proton NMR and electrospray MS. .....Metabolite Identification. HPLC. The HPLC system consisted of a Beckman model 126 pump, NEC PC8300 controller, Waters model 712 WISP autosampler, Applied Biosystem model 785A UV detector, and a Berthold model LB 507A radiodetector equipped with a 150-ml yttrium solid cell. For profiling plasma metabolites, samples were analyzed on an Inertsil C18 column (5 mm particle size, 0.46 3 25 cm) using a gradient of 0.05 M ammonium acetate and acetonitrile...." DISPOSITION AND BIOTRANSFORMATION OF THE ANTIPSYCHOTIC AGENT OLANZAPINE IN HUMANS (DRUG METABOLISM AND DISPOSITION Vol. 25, No. 1)... Вот здесь у меня как раз таки и возникают вопросы о возможности определения и разделения получаемых продуктов при обычном УФ на обычной силикагелевой колонке С18....Уверен, что колонку с привитыми цианогруппами в ближайшее время мы не приобретем...Честно говоря, я вообще предполагал, что я их смогу разделить на обычной стеклянной клонке набитой силикгелю Затем еще одна штука...Тут нашел методу, правда не с лоанзапином, а с котинином...в случае с ламотригином метода почти та же...Постараюсь ВАм ее привести: "...N-(2,3,4-Tri-O-acetyl-6-methyl-~-~-glucopyranuronosy1)-( S)-(-)-contininium Bromide (4). A mixture of (S)- (-)-cotinhe (28) (0.176 g, 1.0 mmol) and 3 (2.38 g, 6 mmol) was heated at 60 "C under Nz for 3 days. The resulting melt was cooled to room temperature and the viscous mass partitioned between water (10 mL) and diethyl ether (5 X 20 mL). The ether extracts containing unreacted 3 and its degradation products were discarded, and the aqueous layer was eluted through an XAD-4 column (3 X 8 cm) followed by elution with 2 bed volumes of distilled water. Lyophilization of the combined aqueous eluate at high vacuum afforded 4 as an amorphous glass that was homogeneous by TLC (system a, R, 0.21) (430 mg, 75% yield): 'H-NMR (DMSO-d6) 6 9.45-9.32 (2 H, m, pyridinium H-2 and H-6), 8.84-8.80 (1 H, d, pyridinium H-4), 8.40-8.30 (1 H, t, pyridinium H-5), 6.40 (1 H, d, H-l"), 5.80-5.70 (2 H, m, H-2" and H-5'),5.58-5.48 (1 H, t, H-4"),4.83-4.95 (3 H, m, H-3", H-4', and H, m, H-3'a, H-3'b, and H-4'b), 2.12-2.20 (1 H, m, H-4'a), 1.8, 1.9,2.1 (9 H, 3 x s,3 X OCOCH,); FAB-MS (positive mode) m/z 493 (M - Br)+, 365 [M + H - Br - (3 X COCHd]', 317 (C1p,H1,0g)+, HI+, 127 (155 - CO)+, 115, 106, 98, and 93. (c)N -8-D-Glucopyranuronosyl-(5)-(-)-cotininiuImn ner Salt (5). Compound 4 (200 mg, 0.35 mmol) was dissolved in 1 M NaOH (1.0 mL), and the solution was left at ambient temperature for 16 h. Sample pH was adjusted to 7.0 with dilute aqueous acetic acid, and the mixture was applied to a column containing strong cation-exchange resin (Dowex 50X 1,50-100 mesh, 7 X 12 cm). The column was eluted with 4 bed volumes of distilled water, followed by 2 M aqueous ammonia solution. The first UV-absorbing basic fractions were collected and lyophilized under high vacuum to afford 5 as a light brown amorphow solid (98 mg, 80% yield), homogeneous by TLC (solvent system b, R, 0.38). The product was recrystallized from methanol/water to afford a white solid..."(Chem. Res. Toxicol. 1992,5, 280-285. Characterization of the Glucuronide Conjugate of Cotinlne: A Previously Unidentified Major Metabolite of Nicotine in Smokers’ Urine)... Здесь меня смущает прежде всего XAD.4 Никогда с таким не встречался если честно...насколько проверил, это некий нейтральный полимерный сорбент или еще чтото что используется при разделении или очистке от ароматики...В чем его необходимость в этой методе? И как бы мне его обойти учитывая, что его приобрести я тоже не смогу? В некоторых других методиках, где изучали аналогичные глюкурониды, также использовали ХАД.... Ну, думаю я тут намного конкретнее написал и надеюсь что это очень простая проблема передо мной стоит. Прошу заранее извинить меня если я изложил и выразил чтото неправильно, но буду рад Вашим замечаниям.....и пожеланиям... |
|||||
|
Islander VIP Member Ранг: 1065 |
06.07.2007 // 2:20:52
Вообще-то синтезом я не занимаюсь, а нужные мне аналитические стандарты покупаю или заказываю на стороне. Этот, кстати, можно купить, но он не дешев: Но если у Вас нет денег и полно времени, то остается синтезировать самому. В этом случае основная проблема - это выделение из реакционной смеси и очистка. Судя по прописи, работа требуется нешуточная. Естественно многие этапы можно модифицировать, смолу XAD можно заменить на что-то другое. Но отработка каждого этапа будет требовать времени, сил и средств. И Вам здесь никто не поможет, потому что пробовать надо. Что же касается анализа, то нет сомнения, что УФ детектор "увидит" глюкуронид в продуктах Вашего синтеза. Другой вопрос, как Вы убедитесь, что это именно он. Если у Вас нет масс-спектрометра, то придется делить препаративно и анализировать фракции на ЯМР. Думаю, теперь Вам ясно, почему у этого продукта такая цена. |
|||||
|
Jenja Пользователь Ранг: 181 |
06.07.2007 // 11:48:36
К сожалению, часто, даже четко следуя методикам, приведенным в статьях, очень непросто добиться желаемого результата. А уж если Вы заранее заменять что-то собираетесь... Если нет XAD, можете активированный уголь попробовать. |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
virtu VIP Member Ранг: 2134 |
06.07.2007 // 14:30:17
Редактировано 1 раз(а) А Вы синтез по какому пути ставили, а то, может ХАD Вам и не понадобиться.Я в одном месте хроматографический отдел организую,сегодня копался и наткнулся на XAD-2(и др.) вот,вспомнил про Вас, если Вы в Москве - можем пересечься я Вам дам баночку другую
|
|||||
|
серегаа Пользователь Ранг: 29 |
06.07.2007 // 17:30:27
Я поставил оба пути...в растворе и с расплаве...думаю в расплаве как раз таки мне он и понадобится...да и опыт других публикаций говорит, что в расплаве реакция идет лучше....думаю, может точно в качестве неполярного сорбента попробовать уголь...другого мне в голову не лезет из того что у меня есть по крайней мере... А вот насчет поделиться со мной...очень жаль что я не в МОскве...я был бы ВАм очень благодарен за ВАшу отзывчивость...Я ВАм и так премного благодарен, но, к сожалению, не имею возможности воспользоваться этим
|
|||||
|
virtu VIP Member Ранг: 2134 |
06.07.2007 // 20:04:42
Редактировано 1 раз(а) Раз такая ситуация, тогда пробуйте акт. уголь. |
|||||
|
михалыч Пользователь Ранг: 345 |
06.07.2007 // 21:07:25
Поскольку Вам придётся заняться очисткой продуктов синтеза, то может быть Вам поможет , как сделать- спрашивайте. |
| |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
