| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Забилась колонка Symmetry С18 >>>
|
 |
|
DSP007 VIP Member Ранг: 2228 |
 04.05.2007 // 14:36:40
Кликуха у автора топика говорящая... Зато насос зверский ! Можно попробовать раствор химотрипсина в фосфатном буфере с рН 7,6 , а еще лучше зверский элюэнт- раствор стирального порошка с биодобавками. Только надо учесть что все ферменты работают при температуре от 35 до 39 С, а выше -коагулируют и деактивируются. |
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
Волгин VIP Member Ранг: 1335 |
04.05.2007 // 14:37:29
Редактировано 3 раз(а) Грустно, что приходится цитировать самого себя. Но прошу - прочтите внимательно: "И напоследок, если ничего не поможет, зверский способ, описанный для ОФ колонок Vydac: помыть смесью 1ч. 0,1М HNO3 с 3-мя частями изопропанола, желательно при повышенной температуре и подольше. Не уверен правда, что Ваша колонка это выдержит, но если уже не будет другого выхода... Если все-таки решитесь - сообщите о результатах! " PS 4000 psi - 280 атм. Не так уж и много, хотя при таком давлении лучше уже не работать - колонка быстрее просядет. PPS Кстати, вот и ссылочку нашел: Правда, в ней не 3, а 4 объема изопропанола и применимо это к "polymeric-bonded columns", а "Symmetry" - непонятно какая (данных не нашел). Но почитайте раздел "Column cleaning and regeneration" |
||
|
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
04.05.2007 // 16:02:05
Юра! Лучше предложи свои услуги по перенабивке колонки. А вымыть скоагулированный белок если он попал в сорбент очень проблематично, особенно если он достаточно высокомолекулярный. Настолько же легко без механических усилий, только водой или растворами смыть со стекла засохшие, прошу прощения, сопли. Тут нечто похожее. |
||
|
Сергей Костиков VIP Member Ранг: 1811 |
04.05.2007 // 16:10:31
Можно заИке встрясть? Колонка здесь, может быть, и вовсе не при делах. Эфта дрянь скукожилась на фрите. Отсюда и предложение: разобрать, фрит поменять, промыть прямо и посмотреть! Малая, но есть вероятность помочь. В ПРОТИВНОМ случае - см. прайс-лист на колонки. |
||
|
Styskin Пользователь Ранг: 228 |
04.05.2007 // 17:08:19
Редактировано 1 раз(а) Можем заняться Вашей колонкой. anchem.ru/forum/read.asp?id=62 Если не получится восстановить на складе есть в наличии Waters 4.6х150 или 250 Symmetry C18, 5um. |
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
Волгин VIP Member Ранг: 1335 |
04.05.2007 // 17:13:31
Леня! Я отвечал на поставленный вопрос. Вопроса о набивке не стояло. На Вайдаке ведь не дилетанты работают, что-то можно отмыть, что-то - нет. |
||
|
123456789 Пользователь Ранг: 1 |
07.05.2007 // 7:59:25
Это афтар. В инструкции к колонке написано что белковую грязь можно удалить повторными инжекциями 200 мкл ДМСО. Что вы об этом думаете? |
||
|
бандеролог Пользователь Ранг: 4 |
07.05.2007 // 8:05:10
Редактировано 1 раз(а) |
||
|
Волгин VIP Member Ранг: 1335 |
07.05.2007 // 13:11:59
Если написано в инструкции, то по крайней мере не повредит. Хотя я бы сделал это, перевернув колонку и установив объемную подачу насоса 0,1 мл/мин, чтобы не гнать грязь по всей колонке. |
||
|
Яра Пользователь Ранг: 10 |
24.05.2007 // 14:43:53
У меня недавно подобная проблема была. Белок раскорячился где-то на входе, уже после входного фрита, из-за высокого содержания ацетонитрила в элюенте. Все методы реанимации, в т.ч. фирменные, потерпели фиаско. Собралась уже выбрасывать колонку, но наткнулась на следующее: промыть на низкой скорости насыщенным раствором гуанидина гидрохлорида в 70% уксусной кислоте, затем отмыть смесью ацетонитрил:вода в обычном градиентном режиме. Вообще, система ацетонитрил:вода имеет максимум элюирующей способности (для белков) при содержании растворителя около 40%. В таком режиме и мою, пока глухо. А фирмачи еще советуют промывать последовательно водой, 0.1% ТФУ, изопропанолом, ацетонитрилом, снова водой, подвижной фазой. Если, конечно, сорбент выдерживает водные системы. Мне не помогло. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 21
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
