Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 


ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Забилась колонка Symmetry С18 >>>

  Ответов в этой теме: 21
  Страница: 1 2 3
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: Забилась колонка Symmetry С18
бандеролог
Пользователь
Ранг: 4

04.05.2007 // 11:37:04     
Дико конечно звучит, но я на неё наносил 10% раствор белка в надежде определить остаточное содержание детергента. Элюцию проводил ацетонитрилом или метанолом. В результате при потоке метанола 1 мл/мин давление становится > 4000 PSI. Чем бы мне её поотмывать? или просто выкинуть. Спасибо
ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Леонид
VIP Member
Ранг: 5266


04.05.2007 // 12:11:14     
Что ж Вы так, белок на незащищенную ОФ колонку? Это прям мазохизм какой то.
Если нет колонки с дифильным сорбентом, уж хоть бы предколонку предусмотрели.
Быстрей всего от ацетонитрила или метанола белок скоагулировал и забил входной фильтр и/или межчастичное пространство сорбента на входе.
Можно попробовать перевернуть колонку и провети обратную промывку водой с ацетонитрилом. Если не поможет - неизбежна разборка и замена входного фильтра, а то и первых 3-5 мм слоя сорбента в колонке.
virtu
VIP Member
Ранг: 2133


04.05.2007 // 12:16:25     
Редактировано 1 раз(а)


бандеролог пишет:
Дико конечно звучит, но я на неё наносил 10% раствор белка в надежде определить остаточное содержание детергента. Элюцию проводил ацетонитрилом или метанолом. В результате при потоке метанола 1 мл/мин давление становится > 4000 PSI. Чем бы мне её поотмывать? или просто выкинуть. Спасибо
да бывает и по хлеще, я слышал, как один "хроматографист" в хотел зубной пасте что-то определить, взял развел зубную пасту элюентом,слегка так, и вколол
Теперь по делу:
1)если колонка сейчас у Вас под метанолом, тогда сделайте так:5 ГО 20% МеОН -вода, потом 7 ГО 5% МеОН - вода, посмотрите что с давлением, скорее всего улучшения не будет, переходите к пункту 2
2)Переверните колонку и не менее 15 ГО 5% МеОН - вода при небольшой скорости потока. Скорее всего "забит" входной фрит колонки. А Ваш белок в чем наиболее хорошо растворяется? Возможно, необходимо будет менять входной фрит.

ГО - геометрический объем (колонки)
Igor Sit
Пользователь
Ранг: 150


04.05.2007 // 12:48:24     

А Ваш белок в чем наиболее хорошо растворяется?
- в желудке...
Дым
Пользователь
Ранг: 383


04.05.2007 // 13:02:53     

Igor Sit пишет:

А Ваш белок в чем наиболее хорошо растворяется?
- в желудке...


Тадыть подвижную фазу из солянки с ферментами...Разбодяжить какой-нить "Мезим"))
А ежели серьезно-все правильно выше сказано. Аккуратно только...
Дым
Пользователь
Ранг: 383


04.05.2007 // 13:03:53     
ТОлько все эксперименты следует начинать на обратном потоке.
Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Деионизатор воды ДВ-1 Деионизатор воды ДВ-1
Предназначен для получения в лабораторных условиях особо чистой деионизированной воды, используемой для приготовления растворов, хроматографических проб, заправки генераторов водорода/кислорода и других целей.
[ Информация из каталога оборудования ANCHEM.RU ]
Волгин
VIP Member
Ранг: 1324


04.05.2007 // 13:08:40     
Редактировано 1 раз(а)

Я бы после этого (если предыдущие упражнения не дали результата) помыл бы еще в обратном направлении 0.1% трифторуксусной кислоты в 50%-ном ацетонитриле с минимальной скоростью в течение часа-двух.
И напоследок, если ничего не поможет, зверский способ, описанный для ОФ колонок Vydac: помыть смесью 1ч. 0,1М HNO3 с 3-мя частями изопропанола, желательно при повышенной температуре и подольше. Не уверен правда, что Ваша колонка это выдержит, но если уже не будет другого выхода... Если все-таки решитесь - сообщите о результатах!
Леонид
VIP Member
Ранг: 5266


04.05.2007 // 13:43:14     
Мда...
Добрый ты, Юра, аж сил нет... От чего другого отмыть, может и прокатит.
А белок от азотки по ксантопротеиновой реакции вообще зацементируется и перестанет растворяться хоть в чем-либо.
Вот тогда точно колонке п....ц придет. А эта маленькая северная лисичка шутить не любит...
Волгин
VIP Member
Ранг: 1324


04.05.2007 // 14:13:38     
Редактировано 1 раз(а)

За что купил - за то продаю. Сам в фирменных "Care and use" на 300-ангстремники С4 и С18 читал!
virtu
VIP Member
Ранг: 2133


04.05.2007 // 14:23:47     
Олимпиада для хроматографистов, отборочный тур:
Задачи:
1)предложите наиболее эффективный/дешевый и быстрый способ убить указанный выше сорбент
2)предложите варианты дальнейшего применения убитого Вами сорбента в аналитической практике

virtu
VIP Member
Ранг: 2133


04.05.2007 // 14:36:08     
А с ферментами интересная идея. С азоткой - это на конец надо оставить, чтобы наверняка,чтобы потом искать ответ на задание №2

to "бандеролог":
Да, и если решите реализовать какой-нибудь необычный способ,пожта напишите о результатах.

  Ответов в этой теме: 21
  Страница: 1 2 3
  «« назад || далее »»

Ответ на тему


ААС, ИСП-АЭС, ИСП-МС - прямые поставки в 2022 году

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]


ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2022
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты