Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 



ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Дигидрокверцитин >>>

  Ответов в этой теме: 14
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: Дигидрокверцитин
Evgenya
Пользователь
Ранг: 12

11.09.2006 // 11:22:44     
Уважаемые коллеги,как себя ведет дигидрокверцитин (биофлавоноид) в обращеннофазной колонке?
Дело в том, что несколько раз проба успешно элюировалась,пики регистрировались, потом заглохло и прекратилось это дело.Могло ли быть засорение этого вещества колонкой? Хотя концентрация 1 мг/мл. Промывали изопропанолом с гексаном, бесполезно.Не подскажете в чем дело?
Использовали колонку Whatman Partisil 5 ODS-3.
Это означает С8 или С18?.ODS-Это октадодецил силан?
ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Vasya
Пользователь
Ранг: 128


11.09.2006 // 11:42:40     
Дигидрокверцетин ведет себя на обращенофазной колонке (С18) послушно, если в качестве элюента использовать подкисленные водные растворы метанола или ацетонитрила.
А что, позвольте узнать, заглохло? Кстати, вряд ли вещество могло засориться колонкой. И уж если Вы хотели смыть с колонки ДГК, то уж совсем зря гексаном - не растворяется.
Короче (избитое для форума предложение), изложите подробно и внятно свои действия и последствия их.
Леонид
VIP Member
Ранг: 5266


11.09.2006 // 11:45:11     

Evgenya пишет:
Уважаемые коллеги,как себя ведет дигидрокверцитин (биофлавоноид) в обращеннофазной колонке?
Дело в том, что несколько раз проба успешно элюировалась,пики регистрировались, потом заглохло и прекратилось это дело.Могло ли быть засорение этого вещества колонкой? Хотя концентрация 1 мг/мл. Промывали изопропанолом с гексаном, бесполезно.Не подскажете в чем дело?
Использовали колонку Whatman Partisil 5 ODS-3.
Это означает С8 или С18?.ODS-Это октадодецил силан?

Вообще то это не самая сложная задача для ВЭЖХ.
Но маловато информации для того, чтобы посоветовать что-то конкретное.
На каком элюенте работаете? По каким признакам (спектр, спектральные отношения и т.д.) Вы определили, что несколько первых вколов из колонки выходило именно Ваше целевое соединение, а не мылась какая то грязь? С какими образцами (в смысле - стандарты или природные объекты) работаете, на каких длинах волн?
Далее, что касается Ваших вопросов.
Указанная Вами колонка - 5-микронный октадецилсиликагель (не "октадодецил"), то есть С18, причем с повышенной плотностью прививки. Вполне приличный сорбент.
С8 обычно на колонке так и указывают или гораздо реже - OS (октилсиликагель).
virtu
VIP Member
Ранг: 2130


12.09.2006 // 0:22:51     

Evgenya пишет:
Уважаемые коллеги,как себя ведет дигидрокверцитин (биофлавоноид) в обращеннофазной колонке?
Дело в том, что несколько раз проба успешно элюировалась,пики регистрировались, потом заглохло и прекратилось это дело.Могло ли быть засорение этого вещества колонкой? Хотя концентрация 1 мг/мл. Промывали изопропанолом с гексаном, бесполезно.Не подскажете в чем дело?
Использовали колонку Whatman Partisil 5 ODS-3.
Это означает С8 или С18?.ODS-Это октадодецил силан?
[/quote
Здравствуйте! Издеваться над "сердцем"(в смысле колонкой) не надо Дигидрокверцетин не устойчив к окислению(например кислород воздуха), не зря относится к антиоксидантам(инактивация активных форм кислорода(синглетное состояние),активных свободных радикалов и др.) Относится к флавонолам, которые обладаю нестойким дигидро-гамма-пирановым кольцом, короче достаточно лабильны (особенно в присутствии кислот и щелочей), кольцо "раскрывается" и образуются халконы(у которых и хроматографические характиристике другие, и максимумы поглощения в уф-области спектра тоже). Вот варианты(конечно же не абсолютные ). Дальше выводите сами. А что дигидрокверцетин, решил отдохнуть у Вас в колонке и попить там гексанчика, рассказывая всем, как он соскучился по L-аскорбиновой кислоте, это вряд ли . Удачи!
С уважением,
Алексей
Evgenya
Пользователь
Ранг: 12


12.09.2006 // 12:15:46     

Vasya пишет:
Дигидрокверцетин ведет себя на обращенофазной колонке (С18) послушно, если в качестве элюента использовать подкисленные водные растворы метанола или ацетонитрила.
А что, позвольте узнать, заглохло? Кстати, вряд ли вещество могло засориться колонкой. И уж если Вы хотели смыть с колонки ДГК, то уж совсем зря гексаном - не растворяется.
Короче (избитое для форума предложение), изложите подробно и внятно свои действия и последствия их.

Использовали элюент ацетонитрил+вода+укс.кислота.
Согласно S-критерию обращ.фазы изопропанол гексан обладают большей элюирующей силой.Чем тогда промывать колонку? Могло ли быть засорение колонки этим веществом, перегрузка? Потому что при длине волны 290 нм пики выходили при 4-х вколах пробы, затем все прекратилось. С самописцем все в норме.
Evgenya
Пользователь
Ранг: 12


12.09.2006 // 12:16:44     

Vasya пишет:
Дигидрокверцетин ведет себя на обращенофазной колонке (С18) послушно, если в качестве элюента использовать подкисленные водные растворы метанола или ацетонитрила.
А что, позвольте узнать, заглохло? Кстати, вряд ли вещество могло засориться колонкой. И уж если Вы хотели смыть с колонки ДГК, то уж совсем зря гексаном - не растворяется.
Короче (избитое для форума предложение), изложите подробно и внятно свои действия и последствия их.

Использовали элюент ацетонитрил+вода+укс.кислота.
Согласно S-критерию обращ.фазы изопропанол гексан обладают большей элюирующей силой.Чем тогда промывать колонку? Могло ли быть засорение колонки этим веществом, перегрузка? Потому что при длине волны 290 нм пики выходили при 4-х вколах пробы, затем все прекратилось. С самописцем все в норме.
Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Реометр TA Instruments AR-G2 Реометр TA Instruments AR-G2
Реометр AR-G2 представляет собой первый в мире коммерчески доступный ротационный реометр построенный с использованием уникального магнитного подшипника. В мире пока нет другого реометра способного на контроль и измерение таких низких крутящих моментов как в режиме с контролируемой нагрузкой, так и в режиме с контролируемой деформацией
[ Информация из каталога оборудования ANCHEM.RU ]
Evgenya
Пользователь
Ранг: 12


12.09.2006 // 13:27:22     

virtu пишет:

Evgenya пишет:
Уважаемые коллеги,как себя ведет дигидрокверцитин (биофлавоноид) в обращеннофазной колонке?
Дело в том, что несколько раз проба успешно элюировалась,пики регистрировались, потом заглохло и прекратилось это дело.Могло ли быть засорение этого вещества колонкой? Хотя концентрация 1 мг/мл. Промывали изопропанолом с гексаном, бесполезно.Не подскажете в чем дело?
Использовали колонку Whatman Partisil 5 ODS-3.
Это означает С8 или С18?.ODS-Это октадодецил силан?
[/quote
Здравствуйте! Издеваться над "сердцем"(в смысле колонкой) не надо Дигидрокверцетин не устойчив к окислению(например кислород воздуха), не зря относится к антиоксидантам(инактивация активных форм кислорода(синглетное состояние),активных свободных радикалов и др.) Относится к флавонолам, которые обладаю нестойким дигидро-гамма-пирановым кольцом, короче достаточно лабильны (особенно в присутствии кислот и щелочей), кольцо "раскрывается" и образуются халконы(у которых и хроматографические характиристике другие, и максимумы поглощения в уф-области спектра тоже). Вот варианты(конечно же не абсолютные ). Дальше выводите сами. А что дигидрокверцетин, решил отдохнуть у Вас в колонке и попить там гексанчика, рассказывая всем, как он соскучился по L-аскорбиновой кислоте, это вряд ли . Удачи!
С уважением,
Алексей

причем тут аскорбиновая кислота?это шутка?
Леонид
VIP Member
Ранг: 5266


12.09.2006 // 13:41:06     
Ну не совсем и шутка. Аскорбиновая кислота - сильный восстановитель и в некоторой степени может защищать Ваш аналит от окисления.
Обычно, когда сорбат склонен садиться в колонке, все было бы наоборот. Первые вколы ничего не выходит, а потом, когда сорбент насытится, вещество начинает выходить.
У вас же, как я понял, все с точностью до наоборот.
Может что с дозатором и вещество просто не попадает в колонку. Или у Вас такая среда, что аналит уже давно окислился и осмолился?
Опишите подробно свои действия. Что за объект, что за прибор и каков алгоритм пробоподготовки и анализа.
Farma
Пользователь
Ранг: 382


12.09.2006 // 15:16:48     

Evgenya пишет:
Уважаемые коллеги,как себя ведет дигидрокверцитин (биофлавоноид) в обращеннофазной колонке?
Дело в том, что несколько раз проба успешно элюировалась,пики регистрировались, потом заглохло и прекратилось это дело.Могло ли быть засорение этого вещества колонкой? Хотя концентрация 1 мг/мл. Промывали изопропанолом с гексаном, бесполезно.Не подскажете в чем дело?
Использовали колонку Whatman Partisil 5 ODS-3.
Это означает С8 или С18?.ODS-Это октадодецил силан?


Evgenya, а какой перерыв был между вколами? Если несколько суток, то теоретически ваш флавоноид мог и распасться. И Вы уверены, что те пики, которые выходили, действительно принадлежат целевому веществу? Может, оно и не сходило вовсе?
Vasya
Пользователь
Ранг: 128


12.09.2006 // 16:25:13     

Evgenya пишет:
Использовали элюент ацетонитрил+вода+укс.кислота.
Градиент ацетонитрила или изократика? Сколько укс. к-ты? Вы уверены, что пик соответствовал ДГК?

Evgenya пишет:
Согласно S-критерию обращ.фазы изопропанол гексан обладают большей элюирующей силой.

А что такое S-критерий? Хотя... если сорбат (ДГК) не растворяется в элюенте (гексане), то зачем тогда нужен этот S-критерий? Колонку лучше мыть метанолом (5-10% воды) и колоночку подогреть до 40град. Можно и этиловым спиртом, а изопрпанолом, может, и лучше будет, но тут надо быть очень осторожным - основная проблема в вязкости.

Evgenya пишет:
Могло ли быть засорение колонки этим веществом, перегрузка?
Вещество могло конечно выпасть в осадок на входном фрите и зависит это от многих факторов. А чем Вы вводите в-во? В чем оно растворено?
О перегрузке же можете сказать Вы сами - по количеству введенного Вами же стандарта и по форме пика. И как оно было? Менял ли пик форму от ввода к вводу, площадь?
olmail
Пользователь
Ранг: 111


12.09.2006 // 17:49:06     
С дигидрокверцетином проблем быть не должно, у нас он легко смывается с колонки Atlantis С18 4.6*250 mm 5mkm с 20% (0 минут) до 40% (15 минут) ацетонитрила за 9,2 минуты (скорость потока 0,9 мл/мин). второй компонент - вода с трифторуксусной кислотой до рН=3,0. Стандарт в растворе устойчив (по крайней мере при температуре 4-8С). Так что ищите проблему в системе. Приготовьте новый стандарт (концентрация в 1 мг/мл более, чем достаточная, хватит и 0,1). Попробуйте другие вещества (лучше которые раньше делали), например, кофеин, все в порядке ли с ним.

  Ответов в этой теме: 14
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

Ответ на тему



ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]

ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2009
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты