Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 


Новый высокопроизводительный ВЭЖХ-МС/МС с тройным квадруполем с низкой себестоимостью анализа

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Пенициллины Дериватизация >>>

  Ответов в этой теме: 4

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: Пенициллины Дериватизация
Никита
Пользователь
Ранг: 59

13.02.2004 // 5:27:40     
Редактировано 1 раз(а)

Здраствуйте! Уважаемые химики, помогите с пожалуйста с эктракцией (из сывротки крови, ликвора, мочи и т.п.) антибиотиков группы пенициллинов, цефалоспоринов, аминогликозидов, а также с их дериватизацией (лучше СООН групп, аминогруппы есть не всех антибиотиков) и ВЭЖХ-анализом,УФ-детекция, на С18. Анализируя схемы лечения наших больничных стационаров столкнулись с мягко говоря неадекватной терапией (особенно это касается детей с менингитами). Часто дети погибают от "подделки" дорогих антибиотиков или недостаточной концентрации их в крови, ликворе. К тому же пенициллины и цефалоспорины довольно полярные соединени и выводятся из организма через почки, а при тяжелых инфекциях почечная функция нарушена и эти антибиотики накапливаются в крови, ликворе в токсических концентрациях, что вызывает судороги. Пенициллины и цефалоспорины - прямые ГАМК-антагонисты - судорожные яды при токсических концентрациях. Вот зачем нам нужно поддерживать постоянную терапевтическую концентрацию их в биожидкостях. Дело в том, что мы занимаемся мониторингом лек.препаратов в биожидкостях (антиконвульсанты, b-адреноблокаторы, ксантины, непрямые антикоагулянты и пр.) - лечение под контролем терапевтической концентрации лек. препарата в сыворотке крови и т.п. В наших исследованиях - мониторинг антибиотиков пока "белое пятно", а практической медицине контроль терапии антибиотиками ох как бы пригодился, а главное это нужно нашим пациентам!
Нужно: 1)группа пенициллинов - устойчивы в кислой среде, но в щелочной разрушаются. Нужна дериватизация в слабокислой или нейтральной среде.(ампициллин, бензилпенициллина Na и К соли, бициллин и т.п.) в основе их 6 - аминопенициллановая кислота. Грубо предел обнаружения нужен 0.02 - 20 мкг/мл.
2)группа цефалоспоринов - 4 поколения антибиотиков (цефазолин, цефуроксим, цефтазидим, цефметазол и т.п.) - в основе их 7-аминоцефалоспориновая кислота. Грубо предел обнаружения нужен 0.5 - 20 мкг/мл сыворотки крови. Нужна экстракция и дериватизация по СООН группе с УФ детекцией, ВЭЖХ.
3) Группа аминогликозидов - 3 поколения: канамицин, гентамицин, амикацин и т.п. Основной структурный элемент - 2-дезокси-Д-стрептамин - аминосахариды, соединенные гликозидной связью.
Нужна экстракция и дериватизация.
Хотелось бы так же спросить есть ли в России хорошие монографии по реакциям дериватизации. А кто-нибудь из Вас уважаемые читал монографию Lunn et. all "Derivatization in HPLC" - это кажется на amazon.com Стоит ли нам заказать эту монографию или нет. Если у кого-нибудь есть эта книга опишите пожалуйста какой там уровень, на какие соединения даны реакции, как представлен материал монографии.
С уважением, Никита.
Реклама на ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Размещение рекламы
Artem
Пользователь
Ранг: 193


13.02.2004 // 14:03:49     
Возможно, сначала Вам необходимо использовать ТФЭ для выделения интересующих компонентов, а потом можно проводить ВЭЖХ-определение. Для пенициллинов, цефалоспоринов - дериватизация не нужна: они хорошо поглащают в УФ-свете и их можно опрделять прямо ВЭЖХ.
Аминогликозиды, в частности гентамицин, после ТФЭ необходимо перевести в производные для лучшего определения. Для этого подходят любые реагенты для дериватизации аминосоединений - фталевый альдегид-меркаптоуксусная кислота, динтирофторбензол, бензоилхлорид, фенилизоцианат и другие. После получения соответствующего производного возможно использование ВЭЖХ, но для каждого реагента - своя система.
Я занимаюсь анализом фармпрепаратов и лекарственных суюстанций, и дянные методики у нас широко распространены.
Никита
Пользователь
Ранг: 59


13.02.2004 // 16:30:49     
Спасибо Артем!
Вы предлагаете твердофазную экстр., для пенициллинов и цефалоспоринов. Но какие условия SPE этих препаратов. Как выделить полярное вещество из сыворотки на картридже С18 и при этом не элюировать вместе с ампицилином кучу мешающих полярных соединений, которых полно в сыворотке крови. От липидов можно избавиться путем отмывки гексаном к примеру, а как дальше. Каким пользоваться осадителем белка в сыворотке - органическим (спирты) или неорганическим (кислоты, щелочи), какая рН должна быть при загрузке образца в картридж для ТФЭ, чем элюировать? Пробовали элюировать чистым метанолом, но экстракция низкая,. Затем попробовли кислым метанолом - экстракция 100%.
Но вместе с ампицилином смываются и др. мешающие соединения.
Можно ли использовать LLE для ампицилина? В одной забугорной работе описана LLE ампицилина из подкисленной сыворотки смесью хлороформ:пентанол (3:1), с последующей реэкстракцией в 100 мкл воды рН 7.0. Но технология не воспроизводится. Кто-нибудь может объяснить каким путем идти?
С уважением Никита.
Artem
Пользователь
Ранг: 193


13.02.2004 // 18:00:46     

Никита пишет:
Спасибо Артем!
Вы предлагаете твердофазную экстр., для пенициллинов и цефалоспоринов. Но какие условия SPE этих препаратов. Как выделить полярное вещество из сыворотки на картридже С18 и при этом не элюировать вместе с ампицилином кучу мешающих полярных соединений, которых полно в сыворотке крови. От липидов можно избавиться путем отмывки гексаном к примеру, а как дальше. Каким пользоваться осадителем белка в сыворотке - органическим (спирты) или неорганическим (кислоты, щелочи), какая рН должна быть при загрузке образца в картридж для ТФЭ, чем элюировать? Пробовали элюировать чистым метанолом, но экстракция низкая,. Затем попробовли кислым метанолом - экстракция 100%.
Но вместе с ампицилином смываются и др. мешающие соединения.
Можно ли использовать LLE для ампицилина? В одной забугорной работе описана LLE ампицилина из подкисленной сыворотки смесью хлороформ:пентанол (3:1), с последующей реэкстракцией в 100 мкл воды рН 7.0. Но технология не воспроизводится. Кто-нибудь может объяснить каким путем идти?
С уважением Никита.

Для анализа биологических образцов можно использовать мицеллярную хроматографию (могу прислать обзор по данному вопросу). Биологическая матрица очень легко солюбилизируется в мицеллярной среде и можно затем легко определять интересуемый компонент даже прямым вводом пробы.
Что же касается ТФЭ, то тут нужно поднимать литературу - мы с биологическими матрицами не работали, так что ничего посоветовать не могу. Посмотрите в интернете - на многих сайтах фирм, которые проихводят хроматографическое оборудование, есть базы данных, в том числе и с использованием ТФЭ.
Artem
Пользователь
Ранг: 193


13.02.2004 // 18:03:28     
J.Chromatography 1990, 531, 79-99
Application of micellar mobile phases for the assay of drugs in biological fluids

  Ответов в этой теме: 4

Ответ на тему


Новый высокопроизводительный ВЭЖХ-МС/МС с тройным квадруполем с низкой себестоимостью анализа

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]

ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2009
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты