Российский химико-аналитический портал | химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
|
ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
Начали двоиться пики на аминоксилоты >>>
|
Фаина Пользователь Ранг: 12 |
24.07.2020 // 11:24:11
Да именно, после первого внесения и прогона колонки открутили, сорбент немного просел, совсем чуть чуть, выглядела как небольшая трещинка, добавили еще. Попробуем еще посмотреть. Мне тут подсказали забивать колонку под небольшим вакуумом, не уверена в правильности, но в любом случае создать отрицательное давление сейчас пока нечем. Вот я и подумала, можно ли на УЗ бане подержать колонку, что бы сорбент подсел? |
|||||
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
Фаина Пользователь Ранг: 12 |
24.07.2020 // 11:25:40
У нас есть парочка обычных С18, но я никогда на них не делала АМК анализ, могу попробовать, но я боюсь что могу испортить их фосфатным буфером. |
|||||
Фаина Пользователь Ранг: 12 |
24.07.2020 // 11:28:53
Что значит рисуйте дальше? Я где то говорила, что мы рисуем протоколы? |
|||||
абр Пользователь Ранг: 910 |
24.07.2020 // 15:32:29
Небольшой вакуум вам ничего не даст. В УЗ баню лично я бы сунул колонку только перед выбрасыванием, как последний шанс. Попробуйте долго на маленькой скорости помыть колонку чистым обезгаженным ацетонитрилом (после отмывки от солей, естественно) |
|||||
Волгин VIP Member Ранг: 1326 |
26.07.2020 // 15:18:58
Ни в коем случае! Убъете сорбент необратимо. |
|||||
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
AA_Alex Пользователь Ранг: 372 |
26.07.2020 // 18:07:15
Здесь методика на Zorbax Eclips C18 https:// Собственно, ваша Eclips AAA колонка тоже, если не ошибаюсь, С18. На С18 вполне можно работать с фосфатным буфером, тем более он у вас всего 10 мМ. Так что попробуйте. Какие у вас есть С18 колонки? Если я правильно понял у вас OPA дериватизированные АК? Если беспокоитесь по поводу буфера, сделайте после градиента (он у вас до 60% орг фазы?) промывку 50:50 водой/орг фазой из 3-го канала, чтобы вымыть буфер, а потом промывку колонки до 100% орг фазой. Хотя для 10 мМ буфера это, скорее всего, излишняя предосторожность. У вас орг фаза 45/45/10 ACN/MeOH/H2O? Возьмите для проверки ваш буфер и смешай те в пробирке 10 к 90 с орг фазой. Скорее всего ничего никуда не выпадет. У вас же есть в вашей методике в программе градиента отмывка 100% орг фазой? |
|||||
Фаина Пользователь Ранг: 12 |
27.07.2020 // 12:24:04
Добрый день. Во первых хочу поблагодарить за помощь и советы. Новую колонку заказали, должны в среду доставить. Поэтому думаю наверное уже не актуально. Хотя лично для себя хочу все таки попробовать в свободное время реанимировать колонку. Если есть еще идеи, что я могу попробовать с ней сделать, может промыть еще чем нибудь или что нибудь другое, я с благодарностью приму ваши советы. Отвечая на вопросы, С18 колонки именно Zorbax Eclips C18, 1 рабочая две прозапас. Фосфатный буфер мы используем 40 мМ. Анализ проводим согласно инструкции вот этой https:// Да, промывка в методике предусмотрена. Плюс после анализов дополнительно колонка ставиться на промывку. Ещё один вопрос, так как мы очень ограничены в метаноле, можно ли для органической фазы заменить его этанолом в том же количестве? Ещё раз большое спасибо всем, кто откликнулся. |
|||||
vmu Пользователь Ранг: 1308 |
27.07.2020 // 13:40:58
А где гистидин? Сдается мне, что там что-то напутано с идентификацией пиков. То, что на хроматограмме обозначено как Gly - Thr - Arg - Ala - Tyr - Cys, больше похоже на His - Gly - Thr - Arg - Ala - Tyr соответственно, а Met - на Val+Met. Нет, нельзя. Вам бы почитать книжек по основам ВЭЖХ. |
|||||
Волгин VIP Member Ранг: 1326 |
27.07.2020 // 13:47:19
Редактировано 1 раз(а) Ответ на этот вопрос примерно такой: "Туалетной бумаги нет, могу предложить наждачную." Если серьезно, может быть и можно, но нужно подбирать условия, варьируя концентрацию этанола, солей, рН и, возможно, меняя сами соли. При этом - без гарантии. |
|||||
Шушечка Пользователь Ранг: 518 |
29.07.2020 // 9:58:29
Вы поймите одно, что реанимация колонки это просто танцы с бубнами... Вам коллеги на форуме уже подсказали что можно использовать другую колонку и даже фазы указали. Если есть свободное время, то лучше не реанимируйте колонку, а попробуйте на другой колонке разогнать аминокислоты. Пусть будут две методы, на всякий случай.. отвалидируйте и все... а убить С18 фосфатным буфером это конечно надо постараться))) Правильное использование колонки, а главное промывка и консервация- залог долгой службы колонки. Почему мог просесть сорбент в колонке? проанализируйте ситуацию... может неправильная эксплуатация? Я понимаю не отмытая колонка, не консервированная, но сорбент когда проседает- над этим стоит задуматься. |
|
||
Ответов в этой теме: 30
|
|
ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
Размещение рекламы / Контакты |