| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Помогите разобраться с концентрацией внутреннего стандарта при определении холата натрия методом ГХ >>>
|
 |
| Автор | Тема: Помогите разобраться с концентрацией внутреннего стандарта при определении холата натрия методом ГХ |
|
Sirius Пользователь Ранг: 4 |
 20.02.2020 // 11:33:44
Добрый день, форумчане. Работаю на Shimadzu GS 2010 Plus, на Пиде. Определяю Холат натрия. Анализирую с использованием внутреннего стандарта - стеариновой к-ты. В пробоподготовке сомневаюсь в правильности расчета концентрации вн ст. Привожу данные приготовления для одной калибровочной точки и для собственно анализируемого препарата: [15.0] мкг/мл (одна из калибровочных точек) Р-р Na Холата [300]мкг/мл : 50 мкл Вода: 910 мкл HCl (конц): 40 мкл Этилацетат: 1000 мкл Вн стандарт, стеар к-та [2,5]мкг/мл: 20 мкл Центрифугируем, Верхний слой 0.5 мл отобрать в виалу Экстракт упариваем досуха Хлороформ: 50 мкл Пентафторпропанол: 20 мкл Пентафторпропаноловый ангидрид: 60 мкл Греть в термостате 1 час Экстракт упариваем досуха Восстанавливаем сухой остаток в этилацетате: 1 мл [Концентрация вн стандарта]????? И подготовка пробы: Х , мкг/мл (испытуемый препарат) Препарат: 2 мл Этилацетат : 2 мл Вн стандарт, стеар к-та [2,5]мкг/мл: 40 мкл Центрифугируем, Верхний слой 0.5 мл отобрать в виалу Экстракт упариваем досуха Хлороформ: 50 мкл Пентафторпропанол: 20 мкл Пентафторпропаноловый ангидрид: 60 мкл Греть в термостате 1 час Экстракт упариваем досуха Восстанавливаем сухой остаток в этилацетате: 1 мл [Концентрация вн стандарта]????? Уважаемые, если кто можете, подскажите, пожалуйста. По моим подсчетам вн ст 50 мкг/мл. и в калибр точке и в анализируемом препарате. Но я сомневаюсь. |
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|
vmu Пользователь Ранг: 1237 |
20.02.2020 // 22:12:12
Редактировано 1 раз(а) Стандартный раствор Холат натрия: Взято: 300 мкг/мл × 0.050 мл = 15 мкг. На водную фазу: 15 мкг / (0.050 + 0.910 + 0.040) мл = 15 мкг/мл. На этилацетат-экстрагент: 15 мкг / 1 мл = 15 мкг/мл. На конечную пробу (номинально): (15 мкг / 1 мл) × (0.5 мл / 1 мл) = 7.5 мкг/мл. Внутренний стандарт: Взято: 2.5 мкг/мл × 0.020 мл = 0.05 мкг. На водную фазу: 0.05 мкг / (0.050 + 0.910 + 0.040) мл = 0.05 мкг/мл. На этилацетат-экстрагент: 0.05 мкг / 1 мл = 0.05 мкг/мл. На конечную пробу (номинально): (0.05 мкг / 1 мл) × (0.5 мл / 1 мл) = 0.025 мкг/мл. Анализируемый раствор Внутренний стандарт: Взято: 2.5 мкг/мл × 0.040 мл = 0.10 мкг. На пробу препарата: 0.10 мкг / 2 мл = 0.05 мкг/мл. На этилацетат-экстрагент: 0.10 мкг / 2 мл = 0.05 мкг/мл. На конечную пробу (номинально): (0.10 мкг / 2 мл) × (0.5 мл / 1 мл) = 0.025 мкг/мл. Вообще здесь значение концентрации внутреннего стандарта для получения результата анализа знать не требуется, поскольку в стандартные растворы и в пробы вводят одинаковое количество внутреннего стандарта (0.05 мкг на 1 мл водной фазы) и проводят (почти) одинаковую экстракцию и идентичную дериватизацию. То, что в случае раствора сравнения на 1.00 мл экстрагента приходится 1.00 мл водной фазы, а в случае анализируемого образца на 1.00 мл экстрагента имеем 1.00 мл препарата + 0.02 мл растворителя внутреннего стандарта должно компенсироваться самим применением метода внутреннего стандарта. Странновато только то, что в случае стандартных растворов водную фазу существенно подкисляют, а в случае образцов - нет. Да маловата получается концентрация внутреннего стандарта по сравнению с определяемым веществом. Нет ли в первом сообщении опечаток в размерностях концентраций? Тут нет разницы, будете ли вы использовать калибровочную зависимость вида S/Sвн.ст. = k1 × C/Cвн.ст. или завистимость вида S/Sвн.ст. = k2 × C, поскольку Cвн.ст. одинакова для проб и для растворов сравнения. |
|
Sirius Пользователь Ранг: 4 |
21.02.2020 // 15:16:08
Редактировано 1 раз(а) Большое спасибо вам за помощь. Конечно, была опечатка в концентрации вн ст не мкг/мл, а мг/мл!!!! Т. Е 2.5мг/мл. Пробу не подкисляют, считая её уже таковой. Т. Е правильно, 50 мкг/мл вн ст.? Я эту цифру в программу должна внести, солюшен. Для построения калибровки. |
|
vmu Пользователь Ранг: 1237 |
21.02.2020 // 18:56:16
Да, относительно исходных водных растворов будет 50 мкг/мл. Можете его ввести в программу. А можете ввести любое другое число. Поскольку оно одинаково для всех ваших растворов, оно повлияет только на численное значение наклона калибровки, но не повлияет на результат анализа. Можете в этом сами убедиться, вводя разные значения концентрации внутреннего стандарта (главное - одинаковые для всех стандартных и испытуемых растворов). |
|
Sirius Пользователь Ранг: 4 |
26.02.2020 // 14:47:50
Спасибо за ответ. Я поняла про то что вы говорили. Главное чтобы и в образце и в пробе одинаковое число было. 😀 |
|
vmu Пользователь Ранг: 1237 |
26.02.2020 // 20:16:05
Да, если внутреннего стандарта кладут строго одинаковое количество во все растворы сравнения и анализируемые растворы, то знать это количество нет необходимости для расчетов. Если же кладут разные количества в разные растворы (такое в принципе может быть), тогда нужно точно знать, сколько куда положили, и использовать в расчетах точные количества внутреннего стандарта. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 5 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
