| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Колонка после недельного простоя - что с ней происходит? >>>
|
 |
| Автор | Тема: Колонка после недельного простоя - что с ней происходит? | ||
|
ukvukv Пользователь Ранг: 134 |
 12.09.2019 // 22:40:04
Редактировано 1 раз(а) Всем доброго! В течение недели накапливаю пробы и затем разом делаю и пробоподготовку и заколы в ВЭЖХа. Т.е. насос, детектор, термостат системы находятся в режиме ожидания. Первыми в последовательности идут холостая проба и контрольная. Так вот: контрольная проба, с известным веществом и с заданной концентрацией этого же вещества, полноценным пиком выходит только после третьего закола. В первом заколе вообще пусто, во втором появляется какой-то горбатый пик и только с третьего закола появляется полноценный пик и подтверждается расчётная концентрация. Последняя проба в последовательности это ACN и градиент заканчивается 100% ACN, т.е. колонка перед отключением системы на неделю заполняется ACN. А вопрос собственно в названии темы: Колонка после недельного простоя - что с ней происходит? или вечное "Чтоделать?". |
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
OldBrave VIP Member Ранг: 1314 |
12.09.2019 // 23:33:16
Редактировано 1 раз(а) Не совсем понятно. что подразумевается под "режимом ожидания"? У меня в термостате могут находиться 1-2 колонки (если позволяют условия текущего анализа), остальные сняты и хранятся в коробках. Это нормально для градиентного элюирования 1-2 прогона градиента перед серией анализов для выхода на рабочий режим. Иногда, для повышения чувствительности делаю даже 3 прогона. Это обусловлено тем, что за время хранения микропримеси глубоко проникают в поры сорбента. При первом прогоне повышается давление в колонке и даже "несжимаемые" сорбенты сжимаются, выбрасывая из пор микропримеси, которые элюируются к концу цикла. Повторный прогон градиента имеет те же последствия, поскольку так же сопровождается изменением давления системе. На 3-м прогоне эффект "вымывания" уже незаметен. Совет, хранить колонки лучше в начальном "градиенте". |
||
|
Andrew VIP Member Ранг: 1370 |
17.09.2019 // 14:16:19
Редактировано 1 раз(а) Уточните, в течение какого времени Вы уравновешиваете колонку с подвижной фазой начального состава перед первым вводом? |
||
|
Andrew VIP Member Ранг: 1370 |
17.09.2019 // 14:18:29
Редактировано 1 раз(а) Даже если это 5% АСN в фосфатном буфере с рН 6,5? 
|
||
|
valerra Пользователь Ранг: 141 |
17.09.2019 // 15:22:06
Так иногда случается, что в ВЭЖХ анализе необходимо насытить колонку аналитом. Если контрольная проба после насыщения даёт правильные результаты для нескольких концентраций, то я бы просто прописал процедуру насыщения колонки перед проведением анализа и больше не задумывался над этим вопросом. |
||
|
Avet Пользователь Ранг: 1071 |
17.09.2019 // 15:32:10
Редактировано 1 раз(а)
|
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
OldBrave VIP Member Ранг: 1314 |
17.09.2019 // 19:51:59
Редактировано 2 раз(а) Намекаете, что зарастет флорой и фауной или солями? Даже 5-10% ACN вполне достаточно для соблюдения стерильности. Что касается фосфатного буфера, они бывают разной ионной силы. Не умеете герметично упаковать колонку или закладываете ее на вечное хранение, или есть сомнения, - флаг в руки!, - предварительно отмывайте от солей... Иногда и сам так делаю. |
||
|
Avet Пользователь Ранг: 1071 |
18.09.2019 // 8:47:03
А валидация методики проводилась? Все эти "приколы" должны найти отражение в валидационных материалах |
||
|
Шушечка Пользователь Ранг: 516 |
19.09.2019 // 6:01:26
Я так понимаю, что колонка вообще с хроматографа не снимается? И она стоит не законсервирована.... нуууу не знаю))) все таки надо бережно относиться к аппаратуре и расходникам. |
||
|
voodensky Пользователь Ранг: 526 |
19.09.2019 // 9:40:46
Стоит еще уточнить, что за колонка. Может это С18 с привитыми полярными или гидрофильными группами. А методика с ион-парным реагентом или триэтиламином. |
||
|
ukvukv Пользователь Ранг: 134 |
20.09.2019 // 16:11:33
Редактировано 4 раз(а) 1.Режим ожидания "stand by" - на оборудовании на кнопках вкл/выкл горят, по моему, жёлтые огоньки. В ChemStation достаточно нажать кнопку "on" и насос, термостат и детектор (UV лампа) включаются и выходят на рабочий режим. 2. У меня тоже в термостате установлены две разные колонки, по мере необходимости. в зависимости от анализа, переключаю потоки подвижных фаз. Остальные колонки заполнены 100% ACN, закупорены и также хранятся в своих коробочках. 3. Заметил ещё один момент. Если прогонять холостую пробу (100%ACN), даже 3-х кратный повтор, не выводит колонку на рабочий режим, т.е. колонке необходим именно определяемый аналит и именно его 3-х кратный прогон. Кстати, об этом кто-то выше написал, что идёт насыщение колонки определяемым аналитом, что для меня стало открытием. 4. Колонки храню согласно прилагаемой инструкции, и обычно это 100% ACN. А фосфатный буфер и муравьиная кислота очень хорошие вкусняшки для наших меньших братьев. Хотя не буду утверждать, что как Вы предполагаете 5-10% ACN достаточно для того чтобы ни кокки, ни палочки, ни грибы не завелись. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 69
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
