Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 


ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Изолирование фенотиазинов из плазмы крови >>>

  Ответов в этой теме: 15
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: Изолирование фенотиазинов из плазмы крови
Slawa
Пользователь
Ранг: 323

09.03.2006 // 16:45:08     
Здравствуйте.
Существует следующая проблема: необходимо изолировать производные фенотиазинов (органические основания с pK(BH+)=6-9) из плазмы крови и идентифицировать их методом ТСХ.
Содержание веществ в плазме 1 мкг/мл.
Чувствительность определения методом тсх 0,5-1 мкг в пятне.
Доступные методы изолирования: жидкость-жидкостная экстракция и твёрдофазная экстракция на немодифицированном силикагеле (ну нет у меня другого сорбента).
Вопросы:
Решаема ли эта задача в принципе?
В каком направлении двигаться?
Что-бы почитать по этой теме (ссылки)?
ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Slawa
Пользователь
Ранг: 323


09.03.2006 // 16:47:52     


ps Белки попробовал осаждать трихлоруксусной (ТХУ) кислотой (2 мл плазмы). Экстрагировал в 5 мл хлористым метиленом при pH 9-10 (аммиак). Хлористый метилен выпарил в токе воздуха, и количественно перенёс сухой остаток на пластинку.
Столкнулся со следующими проблемами:
1. Возможны потери из-за связывания с белками;
2. После выпаривания органики остаётся много грязи (вероятно липиды и жирные кислоты), которые мешают определению (перегружают пластинку и сильно фонят).
3. Естественно проблемы с количественным переносом веществ из экстракта на пластинку.
КонстантинС
VIP Member
Ранг: 2306


09.03.2006 // 17:09:15     

Есть и другие сорбенты... было много топиков по этим темам.. попробуйте поиск, ключевое слово - ТФЭ..
Slawa
Пользователь
Ранг: 323


09.03.2006 // 17:24:15     
Редактировано 1 раз(а)

Понятно, что сорбенты есть, и ссогласно литературным данным для веществ подобного типа наиболее часто используют модифицированные силикагели с-16, с-18. Но жидкость-жидкостная экстракция предпочтительней, потому-что пока в моей конторе раскошелятся на сорбенты пройдёт 3-4 месяца. Приходится работать с тем, что есть.

Вопрос в другом:
Возможно ли вообще решить подобную задачу, учитывая низкие концентрции веществ и невысокую чувствительность методики (плазмы то на анализ можно взять от силы 5-10 мл)?

Занимался ли кто-либо чем-то подобным, может ли он дать какие-то методические рекомендации.
Slawa
Пользователь
Ранг: 323


09.03.2006 // 17:24:20     
Редактировано 1 раз(а)

user wiped their message
Korvet
Пользователь
Ранг: 1114


09.03.2006 // 17:51:46     
Ну проводя аналогию с др. лек. средствами в биообъектах надо бы гидролиз наверное сначала, типа кислотный.
Ну чтобы от жиров избавиться попробуйте гексаном экстрагировать подкисленный образец. Нормально-фазовая ТФЭ наверное не подойдёт, надо бы либо катионообменную, либо С18, либо смешанный вариант.
И ещё: при гидролизе сами фенотиазины могут распадаться. Если есть возможность сделайте модельный опыт с чисыми веществами. чтобы определить рф продуктов из гидролиза. ПОд руками пока нету рельной методики для анализа. всё описанное плод моей фантазии.
Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
КОРТЭК, ООО КОРТЭК, ООО
Фирма ООО «КОРТЭК» разрабатывает, серийно производит и сопровождает в эксплуатации атомно-абсорбционные спектрометры КВАНТ.
Леонид
VIP Member
Ранг: 5266


10.03.2006 // 9:48:00     
Если есть силикагель - уже не так и мало.
Поставьте несколько экспериментов на ТСХ и выберите элюент средней полярности (бутилацетат, этилацетат или их смеси с кетонами или спиртами) на котором бы целевые вещества сидели бы на старте, а липиды и другая неполярщина уверенно ползли бы с растворителем по пластине.
Если элюент будет содержать не очень много полярного растворителя, можно надеяться, что целевые вещества будут удерживаться на силикагеле за счет силанольных групп по тому же ионообменному механизму.
Потом эту систему можно смело переносить на ТФЭ.
Смывать с ТФЭ патрона можно ацетонитрилом и/или метанолом с водой.
Короче - есть варианты, и их не мало.
А вообще то патроны для ТФЭ стоят образно говоря копейки. И может не стоит делать проблему с их приобретением? Уж несколько сотен деревянных у Вашей конторы наверняка найдется.
Andrew
VIP Member
Ранг: 1370


10.03.2006 // 12:19:02     
Посмотрите ветку:
www.anchem.ru/forum/read.asp?id=889&recordnum=10 Там фигурируют буржуйские ссылки от Островитянина.
Гидролиз не в коем случае. Фенотиазины валятся от неосторожного взгляда. Оптимальная экстракция при рН 11-13 диэтиловым эфиром. По фенотиазинам докторская диссертация (фарм. науки) Саломатина. Из последних работ - кандидатская Клищенко Р. (РоманК на форуме). Поищите авторефераты в библиотеках. Или библиографический поиск по фамилии автора. Штук пять-десять статей и докладов у него было.
Чем проявляете? Мне лично нравится 10% хлорное железо или концентрированная серная в этаноле (1:9), только без нагревания, чтобы меньше ложноположительных результатов получить.
Andrew
VIP Member
Ранг: 1370


10.03.2006 // 12:22:47     
Нашел автореферат.
ЖАХ, 2003 № 7, с. 722
Изв. вузов. Северокавказский регион. 2005 № 3 с. 215
ЖАХ, 2006 № 1, с. 6.
Korvet
Пользователь
Ранг: 1114


10.03.2006 // 18:24:18     
Ну и что Andrew, что они разваливаются, вот продукты распада и искать, как например бензодиазепины.
Andrew
VIP Member
Ранг: 1370


12.03.2006 // 20:01:31     
Редактировано 1 раз(а)


Korvet пишет:
Ну и что Andrew, что они разваливаются, вот продукты распада и искать, как например бензодиазепины.
Продукты распада дают только групповое обнаружение. Задача, давно решенная. Думаю, что автора интересует более точная идентификация, иначе брали бы не кровь, а мочу. Хлопот гораздо меньше.

  Ответов в этой теме: 15
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

Ответ на тему


ААС, ИСП-АЭС, ИСП-МС - прямые поставки в 2022 году

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]


ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2022
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты