Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 


ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

ВЭЖХ: проблема миграции пика одного из аналитов >>>

  Ответов в этой теме: 36
  Страница: 1 2 3 4
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: ВЭЖХ: проблема миграции пика одного из аналитов
Avet
Пользователь
Ранг: 1071

30.01.2017 // 11:04:18     
Редактировано 1 раз(а)

Уважаемые коллеги! Такая проблема: ВЭЖХ метод количественного определения двух аналитов в лекарственной форме. Время удерживания одного из аналитов стабильное, а второй, который был перед первым, движется и движется вправо, "перешагитвает" через второй аналит и уходит дальше вправо. Имеет место обычная ОФ ВЭЖХ. Кто знаком с проблемой, отзовитесь. Благодарю заранее.
ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
sirer
Пользователь
Ранг: 46


30.01.2017 // 15:40:23     
Редактировано 1 раз(а)

Вы бы поподробнее рассказали - что за вещества, что за система...
Как проявилось? Меняли ли что-то? С какой скоростью менялось время удерживания?
Без подробностей можно только гадать.

Теоретически такое может быть в случае сильно отличающихся веществ - например одно нейтральное, а второе имеет ионизирующиеся группы. Тогда смещение pH может вызвать изменение удерживания второго аналита, не затрагивая первого.
Timofey
Пользователь
Ранг: 10


30.01.2017 // 16:05:12     

Avet пишет:
Уважаемые коллеги! Такая проблема: ВЭЖХ метод количественного определения двух аналитов в лекарственной форме. Время удерживания одного из аналитов стабильное, а второй, который был перед первым, движется и движется вправо, "перешагитвает" через второй аналит и уходит дальше вправо. Имеет место обычная ОФ ВЭЖХ. Кто знаком с проблемой, отзовитесь. Благодарю заранее.
Была у меня подобная приколюха с цефепимом - решилось заменой колонки на другой тип. Но и бывало, что на заведомо рабочей колонке пики менялись местами - но тут уже был косяк оператора - состав фазы не выдержали и рН не довели
Avet
Пользователь
Ранг: 1071


30.01.2017 // 16:08:43     
Редактировано 1 раз(а)


sirer пишет:
Вы бы поподробнее рассказали - что за вещества, что за система...
Как проявилось? Меняли ли что-то? С какой скоростью менялось время удерживания?
Без подробностей можно только гадать.

Теоретически такое может быть в случае сильно отличающихся веществ - например одно нейтральное, а второе имеет ионизирующиеся группы. Тогда смещение pH может вызвать изменение удерживания второго аналита, не затрагивая первого.

Обычная рутинная работа, обычная колонка С18, ПФ: ацетонитрил с добавкой ТЭА, подкислено укс.к-той до рН 5,9. Метод известен довольно давно.
Вещества: сульфометоксазол и триметоприм. рН стабильно в течение работы и не меняется. Время удерживания триметоприма ползет от инжекции к инжекции по 2-3 минуты вперед. Ну вот вкратце.
SergeyK
Пользователь
Ранг: 2160


30.01.2017 // 16:20:39     
Редактировано 6 раз(а)


Avet пишет:
Вещества: сульфометоксазол и триметоприм. рН стабильно в течение работы и не меняется. Время удерживания триметоприма ползет от инжекции к инжекции по 2-3 минуты вперед. Ну вот вкратце.
Попробуйте увеличить количество ТЭА. Уменьшить объем ввода. Подольше колонку покондиционировать фазой. Колонка ведь не endcapped?
Буфер добавить попробуйте, уксусная не будет буферить при pH=5,9.
Avet
Пользователь
Ранг: 1071


31.01.2017 // 10:59:19     

SergeyK пишет:

Avet пишет:
Вещества: сульфометоксазол и триметоприм. рН стабильно в течение работы и не меняется. Время удерживания триметоприма ползет от инжекции к инжекции по 2-3 минуты вперед. Ну вот вкратце.

Попробуйте увеличить количество ТЭА. Уменьшить объем ввода. Подольше колонку покондиционировать фазой. Колонка ведь не endcapped?
Буфер добавить попробуйте, уксусная не будет буферить при pH=5,9.
Благодарю Вас за информацию и совет, но загвоздка вот в чем: это стандартная методика, известная уже "сто лет". Именно по этой методике анализируется качество ГЛМ Бисептол на одном из ведущих фармзаводов за рубежом.Естественно, валидированная-перевалидированная. Поэтому не думаю, что проблема в методике. Пока грешу на прибор, но что это может быть - даже идей нет.
Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
ГИЦ питьевой воды, ООО ГИЦ питьевой воды, ООО
ООО "ГИЦ питьевой воды" осуществляет контроль качества питьевых,бутылированных, природных и сточных вод. Лаборатория оснащена современными аналитическими приборами (атомно-абсорбционный спектрометр, система капиллярного электрофореза, газовая хроматография, флюориметры и спектрофотометры и др. оборудование)
Волгин
VIP Member
Ранг: 1316


31.01.2017 // 13:20:37     
А в чем Вы растворяете пробу и растворяете ли каждый раз новую навеску (или свежую растертую таблетку) перед вводом? Иными словами, проходит ли у Вас КАЖДЫЙ РАЗ одинаковое время между растворением образца и вводом его в хроматограф.
Avet
Пользователь
Ранг: 1071


31.01.2017 // 13:40:33     

Волгин пишет:
А в чем Вы растворяете пробу и растворяете ли каждый раз новую навеску (или свежую растертую таблетку) перед вводом? Иными словами, проходит ли у Вас КАЖДЫЙ РАЗ одинаковое время между растворением образца и вводом его в хроматограф.
Растворителем пробы является подвижная фаза. Методика пробоподготовки без "подводных камней": определенное число таблеток взвешивают и растирают, из порошка берется сразу несколько навесок, эквивалентных необходимой дозировке аналитов, переностяся в колбу, и далее - обычный путь. Т.е. время пробоподготовки и отрезки времени до ввода более-менее- одинаковое. Неиспользованный порошок потом выбрасывается.
virtu
VIP Member
Ранг: 2131


31.01.2017 // 14:37:35     
Редактировано 2 раз(а)

1. Попробуйте взять новый (другой) и/или свежий ТЭА.

2. Обратите внимание на миксер, если смешивание идёт на стороне высокого давления, то попробуйте увеличить объём миксера.
kvot
Пользователь
Ранг: 165


31.01.2017 // 20:03:27     

Avet пишет:
Благодарю Вас за информацию и совет, но загвоздка вот в чем: это стандартная методика, известная уже "сто лет". Именно по этой методике анализируется качество ГЛМ Бисептол на одном из ведущих фармзаводов за рубежом.Естественно, валидированная-перевалидированная. Поэтому не думаю, что проблема в методике. Пока грешу на прибор, но что это может быть - даже идей нет.

Не подскажите, режим элюирования градиентный или изократика? Если изократика, то как осуществляется смешивания компонентов (органической и водной фазы) насосом или оператором? Что за прибор: модель и производитель? Что за колонка: бренд и производитель? Хотелось бы более полное описание условий хроматографирования.
SergeyK
Пользователь
Ранг: 2160


01.02.2017 // 7:58:33     

Avet пишет:
Пока грешу на прибор, но что это может быть - даже идей нет.
Соберите поверочные данные. Ползет оно там или нет.

  Ответов в этой теме: 36
  Страница: 1 2 3 4
  «« назад || далее »»

Ответ на тему


ААС, ИСП-АЭС, ИСП-МС - прямые поставки в 2022 году

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]


ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2022
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты