Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 



ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Электрофорез белков в полиакриламидном геле >>>

  Ответов в этой теме: 15
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]


lyovinakate
Пользователь
Ранг: 4


29.03.2016 // 14:10:15     
Сначала фиксируем в фиксирующем растворе(40% метанола,
10% уксусной кислоты), затем ополаскиваем гель дистиллированной водой, наливаем в ванну с гелем раствор красителя (27 % этанола,
10 % уксусной кислоты, 0,1 % Кумасси бриллиантового синего, 0,5 % сульфата меди СuSO4), помещают на качалку на минут 40-60. Ну а затем отмываем отмывкой (20 % метанола, 10 % уксусной кислоты) и дистиллированной водой.
ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
optima
Пользователь
Ранг: 317


29.03.2016 // 16:10:38     
Метанол-этанол-метанол? может тут проблема? Попробуйте все на изопропиловом спирте. Отлично красит.
Garry
VIP Member
Ранг: 1076


29.03.2016 // 19:25:51     

lyovinakate пишет:
Сначала фиксируем в фиксирующем растворе(40% метанола,
10% уксусной кислоты), затем ополаскиваем гель дистиллированной водой, наливаем в ванну с гелем раствор красителя (27 % этанола,
10 % уксусной кислоты, 0,1 % Кумасси бриллиантового синего, 0,5 % сульфата меди СuSO4), помещают на качалку на минут 40-60. Ну а затем отмываем отмывкой (20 % метанола, 10 % уксусной кислоты) и дистиллированной водой.


А зачем такие "ТАКИЕ ТАНЦЫ С БУБНОМ" ? Используйте обычный проявитель без предварительной фиксации. Для приготовления одного литра проявителя необходимо 100 мл 60% ТХУ (трихлоруксусной кислоты), 60 мл ледяной уксусной кислоты,168 мл (изопропанола, или этанола 96 % ,или ацетона) , 0,2 г Кумасси R-250, или G-250 и до метки водой. Раствор можно использовать многократно (до выпадения хлопьев). В кювету для проявления наливаете подогретый до (50-60 С) проявитель, в него помещаете пластинку и на качалку минут на 60. Только смотрите, чтобы пластинка была погружена полностью и не всплывала "пузом". Далее проявитель сливаете, ополаскиваете дист.водой на той же качалке до просветления геля. Можете в качестве промывочного раствора применять и Вашу промывку, только метанол заменить на тот же изо-пропанол.... а можно и просто в растворе уксусной..... а можно и без нее... только отмывка получится несколько дольше.
optima
Пользователь
Ранг: 317


29.03.2016 // 21:41:26     
Редактировано 3 раз(а)

40% метанола многовато как-то. Пластинка сильно в размерах уменьшается после такой фиксации?
Для изопропанола рецепт такой: 10 % изопропанола, 10% ледяной уксусной, остальное вода. В этой смеси 0,1-0,2% Кумасси. Сразу в этом растворе и фиксируете и красите. Минут 10-15 в горячем растворе, но не кипятить. Под вытяжкой!
Затем в горячей воде отмываете.

Но все-таки - если у вас пятно одинаковое на всех форезах независимо от пробы - проблема может быть в электродах и камере.
Если пятно мигрирует и меняется - либо проблемы с окраской, либо в пробах мочевина, соли, твин, растворители и т.д.
toxic1978
Пользователь
Ранг: 220


25.04.2016 // 10:43:20     
смените стекла, проверьте целостность гребенок, катоды и аноды.

  Ответов в этой теме: 15
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

Ответ на тему



ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]

ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2009
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты