| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Электрофорез белков в полиакриламидном геле >>>
|
 |
| Автор | Тема: Электрофорез белков в полиакриламидном геле | |||||
|
lyovinakate Пользователь Ранг: 4 |
 24.03.2016 // 17:01:38
Добрый день! При проведении электрофореза белков в полиакриламидном геле появилась такая проблема - в центре геля ближе к концу дорожек после окрашивания Кумасси появляется размытое пятно, которое не отмывается, но это точно не проба. Есть предположения, что загрязнен один из реактивов, но вот какой - непонятно!!! Может быть кто нибудь сталкивался с такой проблемой, подскажите пожалуйста в чем причина. |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
optima Пользователь Ранг: 322 |
24.03.2016 // 17:47:46
Редактировано 3 раз(а) Могли просто запачкать - грязные руки, перчатки. Первое, что приходит на ум. Особено если серебром красите. Но на Кумасси тоже такое возможно. Если красите с нагревом - мог пригореть)) И такое было в практике. |
|||||
|
lyovinakate Пользователь Ранг: 4 |
25.03.2016 // 11:04:59
Спасибо за помощь! Будем искать постепенно какой из реактивов загрязнен) |
|||||
|
optima Пользователь Ранг: 322 |
25.03.2016 // 11:35:12
Почему вы думаете, что это реактив? Вы сами готовите пластины или готовые используете? Реактив скорее всего дал бы примесь по всей пластине. Сбросьте фото, так будет понятнее. |
|||||
|
Alex75 Пользователь Ранг: 459 |
25.03.2016 // 12:16:07
Какие пробы разделяете? Предъявите фореграммы, станет понятнее. Примесь все-так, скорее всего, из пробы. |
|||||
|
lyovinakate Пользователь Ранг: 4 |
28.03.2016 // 11:57:38
Редактировано 1 раз(а) Делим очищенные белки после хроматографии. Гель заливаем сами. Прилагаю фото электрофореграммы для примера, при чем при разных пробах появляется это пятно внизу в центре и не отмывается! |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
optima Пользователь Ранг: 322 |
28.03.2016 // 17:25:59
У вас в пробе после хроматографии нету высокой концентрации солей, мочевины или орг. растворителей? |
|||||
|
Garry VIP Member Ранг: 1076 |
28.03.2016 // 18:18:48
Судя по приложенной электрофореграмме, проблемы с чистотой реактивов нет. Иначе бы проблема была бы не в виде пятна, а в виде несфокусированных полос белков, плохополимеризующегося геля, горизонтальной полосы через всю пластинку, а так локализация и внешний вид пятна наталкивает на мысль о методологии проведения окрашивания геля либо о качестве мытья стеклянных пластинок ЭФ камеры. |
|||||
|
Alex75 Пользователь Ранг: 459 |
28.03.2016 // 22:07:56
Исходя из увиденного, соглашусь с Garry - либо на этапе окраски, либо что-то приходит со стенок камеры. Вряд ли что-либо приходит из буфера. |
|||||
|
Alex75 Пользователь Ранг: 459 |
28.03.2016 // 22:08:50
Как красите фореграммы? |
|||||
|
optima Пользователь Ранг: 322 |
29.03.2016 // 10:23:50
У вас пятно все время одинаково выглядит на разных пластинках с разными пробами? И это действительно не похоже на плохое качество реактивов, которые вы используете. |
| |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
