Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 



ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Электрофорез белков в полиакриламидном геле >>>

  Ответов в этой теме: 15
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: Электрофорез белков в полиакриламидном геле
lyovinakate
Пользователь
Ранг: 4

24.03.2016 // 17:01:38     
Добрый день! При проведении электрофореза белков в полиакриламидном геле появилась такая проблема - в центре геля ближе к концу дорожек после окрашивания Кумасси появляется размытое пятно, которое не отмывается, но это точно не проба. Есть предположения, что загрязнен один из реактивов, но вот какой - непонятно!!! Может быть кто нибудь сталкивался с такой проблемой, подскажите пожалуйста в чем причина.
ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
optima
Пользователь
Ранг: 317


24.03.2016 // 17:47:46     
Редактировано 3 раз(а)

Могли просто запачкать - грязные руки, перчатки. Первое, что приходит на ум. Особено если серебром красите. Но на Кумасси тоже такое возможно.
Если красите с нагревом - мог пригореть)) И такое было в практике.
lyovinakate
Пользователь
Ранг: 4


25.03.2016 // 11:04:59     

optima пишет:
Могли просто запачкать - грязные руки, перчатки. Первое, что приходит на ум. Особено если серебром красите. Но на Кумасси тоже такое возможно.
Если красите с нагревом - мог пригореть)) И такое было в практике.

Спасибо за помощь! Будем искать постепенно какой из реактивов загрязнен)
optima
Пользователь
Ранг: 317


25.03.2016 // 11:35:12     
Почему вы думаете, что это реактив? Вы сами готовите пластины или готовые используете?
Реактив скорее всего дал бы примесь по всей пластине.
Сбросьте фото, так будет понятнее.
Alex75
Пользователь
Ранг: 459


25.03.2016 // 12:16:07     
Какие пробы разделяете? Предъявите фореграммы, станет понятнее. Примесь все-так, скорее всего, из пробы.
lyovinakate
Пользователь
Ранг: 4


28.03.2016 // 11:57:38     
Редактировано 1 раз(а)

Делим очищенные белки после хроматографии. Гель заливаем сами. Прилагаю фото электрофореграммы для примера, при чем при разных пробах появляется это пятно внизу в центре и не отмывается!
s45.radikal.ru/i108/1603/0a/dd4ee69dc72f.jpg
Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Элементный анализатор Analytik Jena multi EA® 5000 Элементный анализатор Analytik Jena multi EA® 5000
multi EA® 5000 - мультиэлементный анализатор для проведения элементоорганического анализа (определение C, S, N, Cl) методом высокотемпературного разложения пробы с последующим измерением образующегося неорганического соединения (оксида, гидрида) физико-химическими методами.
[ Информация из каталога оборудования ANCHEM.RU ]
optima
Пользователь
Ранг: 317


28.03.2016 // 17:25:59     
У вас в пробе после хроматографии нету высокой концентрации солей, мочевины или орг. растворителей?
Garry
VIP Member
Ранг: 1076


28.03.2016 // 18:18:48     
Судя по приложенной электрофореграмме, проблемы с чистотой реактивов нет. Иначе бы проблема была бы не в виде пятна, а в виде несфокусированных полос белков, плохополимеризующегося геля, горизонтальной полосы через всю пластинку, а так локализация и внешний вид пятна наталкивает на мысль о методологии проведения окрашивания геля либо о качестве мытья стеклянных пластинок ЭФ камеры.
Alex75
Пользователь
Ранг: 459


28.03.2016 // 22:07:56     
Исходя из увиденного, соглашусь с Garry - либо на этапе окраски, либо что-то приходит со стенок камеры. Вряд ли что-либо приходит из буфера.
Alex75
Пользователь
Ранг: 459


28.03.2016 // 22:08:50     
Как красите фореграммы?
optima
Пользователь
Ранг: 317


29.03.2016 // 10:23:50     
У вас пятно все время одинаково выглядит на разных пластинках с разными пробами?
И это действительно не похоже на плохое качество реактивов, которые вы используете.

  Ответов в этой теме: 15
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

Ответ на тему



ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]

ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2009
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты