Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 


ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Нужна помощь при определении стеринов с дигитонином >>>

  Ответов в этой теме: 17
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]


Дмитрий (anchem.ru)
Администратор
Модератор форума
Ранг: 4388


14.10.2012 // 13:08:57     
Коллеги,
позволю себе напомнить значимую часть изначального вопроса, оставшуюся пока без ответа.


Действующий ГОСТ имеет ряд либо "промахов" либо неточности перевода. Не понятно какой раствор КОН (какой концентрации надо добавлять), нет ясности раствор дигитонина с какой концентрацией водно-спиртового раствора надо готовить, нет ясности со смесью формамида и диметилформамида.....Для чего их вводим в анализ и можно ли без них обойтись?
ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
kot
Пользователь
Ранг: 1852


14.10.2012 // 19:24:29     

kump пишет:
....Извините за многословность......
Не извиняю , я надеялся у вас есть подход отличный от уже обсуждаемых. Ссылки Д.А. привел. Если появится что-то новое - пишите.
Yari
Пользователь
Ранг: 29


14.10.2012 // 21:46:28     
Здравствуйте, я извиняюсь. если немного не в тему, но разве обязательно проявлять стерины с дигитонином? Мы для себя стерины (по крайней мере, 3-гидрокси-5-ен-производные) хорошо проявляем на ТСХ опрыскиванием 40% серной кислотой с последующим прогреванием в токе горячего воздуха (феном) примерно 80-100С. Холестерин (основной животный) и ситостерин (основной растительный) хорошо делились в системе бензол-ацетон 4-1 (последний много выше). Стандарты можно купить по сигме. Если у вас есть возможность (прибор, высотемпературные капиллярные колонки - около 300С), можно пробовать ставить серьезный ГЖХ метод, а если масс-детектор прилагется, то и стандартов не надо (имеется ввиду система газовый хроматограф-масс спектрометр). Конечно, возможны проблемы с "официализацией" таких результатов, но для себя вы точно б знать
Е2
Пользователь
Ранг: 36


15.10.2012 // 10:40:30     
Здравствуйте! Если не секретная информация не поделитесь подробной методой на ТСХ.(collembola1(сабака)yandex.ru)

Заранее благодарю!
kot
Пользователь
Ранг: 1852


15.10.2012 // 10:56:48     

Yari пишет:
Мы для себя стерины .....
Присоединяюсь, будьте любезны, поделитесь методикой
kot19672005{coбaчkа}yandex.ru
Можно и здесь выложить, думается там текста не много
Заранее спасибо.
Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Термостат электрический суховоздушный АТ-2 Термостат электрический суховоздушный АТ-2
Предназначен для поддержания в рабочем объёме заданной температуры в диапазоне от + 20,0°С до + 50,0°С с отклонением не более ± 0,5°С. Оснащен программируемым таймером для задания времени проведения анализа и звуковой и визуальной индикацией окончания времени проведения анализа.
[ Информация из каталога оборудования ANCHEM.RU ]
Yari
Пользователь
Ранг: 29


15.10.2012 // 16:08:42     

Еподелитесь подробной методой на ТСХ...
ОК, хотя вроде я все уже расказал. Используем фирменные пластинки с закрепленным силикагелем (у нас старые Silufol, но годятся любые), вырезаем размером как нужно (мы чаше всего 5х10см). В качестве подвижной фазы - смесь бензол-ацетон (мы пользуем 4-1 по объему, так как нам нужно видеть полярные продукты окисления стеролов, а если нужны только стеролы, ацетона можно взять меньше для оптимального Rf). После разделения смеси стероидов, пластинку высушивают, а затем опрыскивают из пульверизатора смесью серная кислота-вода 40-60 (у нас стекляный пульверизатор Кроп СССР-вских времен, но подойдет любой; чем мельче капли - тем лучше). 5-10 "пшиков" и несете пластинку, держась аккуратно руками или пинцетом за края, сушить под струей горячего (80-100) воздуха (можно попробовать над плиткой, но не на плитке). Если не проявились, опрыскивание и сушку можно повторить. стерины проявляются в виде темно-кирпичных пятен, слегка флуоресцир в УФ при 365 нм, а эргостерин (стерин грибов и дрожжей) - серое пятно, флуор светло-салатовым. У вас, как я понял из сообщений в теме, при использовании этой методики проблемы могут быть 1) с пробоподготовкой и 2) с пределом обнаружения. По 1) советую ваш сыр или тп "омылить" раствором а (примерно 25г KOH, 35мл H2O, EtOH до 100мл) (примерно 4мл на 1г продукта), затем проэкстрагировать стеролы гексаном, экстракт упарить, перерастворить и потом анализировать (такая пробоподготовка позволяет освободиться от всех омыляемых липидов). Насчет 2) (чувствительности) - чес говоря, не задавался вопросом, но если наносить по 10-20мкл - то 0,05мМ концентрации точно отределите. Успехов. Метода простая. Если есть стандарты стеролов, хотя бы холестерин и ситостерин, вы можете легко ее освоить и модифицировать под себя.
lyo89
Пользователь
Ранг: 136


09.11.2015 // 12:56:56     

Yari пишет:
Здравствуйте, я извиняюсь. если немного не в тему, но разве обязательно проявлять стерины с дигитонином? Мы для себя стерины (по крайней мере, 3-гидрокси-5-ен-производные) хорошо проявляем на ТСХ опрыскиванием 40% серной кислотой с последующим прогреванием в токе горячего воздуха (феном) примерно 80-100С. Холестерин (основной животный) и ситостерин (основной растительный) хорошо делились в системе бензол-ацетон 4-1 (последний много выше). Стандарты можно купить по сигме. Если у вас есть возможность (прибор, высотемпературные капиллярные колонки - около 300С), можно пробовать ставить серьезный ГЖХ метод, а если масс-детектор прилагется, то и стандартов не надо (имеется ввиду система газовый хроматограф-масс спектрометр). Конечно, возможны проблемы с "официализацией" таких результатов, но для себя вы точно б знать
Дигитонин не для проявления, а для осаждения. Насчет стандартов ненадо - количественно посчитать будет трабл. Расчетным методом отклик - та еще тхня

  Ответов в этой теме: 17
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

Ответ на тему


ААС, ИСП-АЭС, ИСП-МС - прямые поставки в 2022 году

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]


ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2022
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты