Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 


ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Влияние подвижной фазы на срок службы колонки >>>

  Ответов в этой теме: 30
  Страница: 1 2 3
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: Влияние подвижной фазы на срок службы колонки
leshkin-yo
Пользователь
Ранг: 213

21.09.2012 // 14:43:17     
Добрый день. У меня возникла проблема. При проведении валидации резко снизилась эффективность колонки. Колонка новая YMC ODS M80 250*4.6; 4um. В качестве пф использую смесь 1%ТЭА рН 3,0 (довожу фосфорной кислотой) и МеОН соотношение 45 : 55. Поток 1 мл/мин, температура колонки 45. Время удерживания вещества не меняется, давление тоже, только тарелки упали. Сначала было около 13000 (в понедельник начал) сегодня 8000. Пробовал промывать водой с МеОН в разных соотношениях, после этого эффективность немного возрастала, а потом опять падала дальше. Может при таком соотношение ПФ в колонке оседает соль ТЭА? Хотелось бы узнать ваше мнение, спасибо.
ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
EvgeniyChup
Пользователь
Ранг: 41


21.09.2012 // 15:41:33     
Редактировано 2 раз(а)

А как рассчитывалось количество тарелок?
А хроматограмму привести можно? По идеи если время удерживания не изменилось, значит происходит размывание пиков. Плюс используются два полярных растворителя, попробуйте изменить соотношение спирт : раствор ТЭА.
Попробуйте вместо уксусной закислить раствор ТЭА фосфорной. Может в Вашем случае влияет диссоциация уксусной кислоты.
Похоже Вы делите органическое основание, попробуйте заменить метанол на ацетонитрил.
Novice
Пользователь
Ранг: 71


21.09.2012 // 16:04:30     

EvgeniyChup пишет:
А как рассчитывалось количество тарелок?
А хроматограмму привести можно? По идеи если время удерживания не изменилось, значит происходит размывание пиков. Плюс используются два полярных растворителя, попробуйте изменить соотношение спирт : раствор ТЭА.
Попробуйте вместо уксусной закислить раствор ТЭА фосфорной. Может в Вашем случае влияет диссоциация уксусной кислоты.
Похоже Вы делите органическое основание, попробуйте заменить метанол на ацетонитрил.

Та нет же, он ведь русским по белому пишет, что использует фосфорную кислоту. Женя!!! откуда ты взял уксусную???
EvgeniyChup
Пользователь
Ранг: 41


21.09.2012 // 16:33:15     
Редактировано 1 раз(а)

Сорри запарился. Я в это время статью читал, наверно и ошибся. Тогда как вариант менять метанол на ацетонитрил. Ну и конечно промыть систему. В начале водой, потом ацетоном, и уже затем элюентом.
El Comandante
Пользователь
Ранг: 88


21.09.2012 // 16:46:03     

leshkin-yo пишет:
Добрый день. У меня возникла проблема. При проведении валидации резко снизилась эффективность колонки. Колонка новая YMC ODS M80 250*4.6; 4um. В качестве пф использую смесь 1%ТЭА рН 3,0 (довожу фосфорной кислотой) и МеОН соотношение 45 : 55. Поток 1 мл/мин, температура колонки 45. Время удерживания вещества не меняется, давление тоже, только тарелки упали. Сначала было около 13000 (в понедельник начал) сегодня 8000. Пробовал промывать водой с МеОН в разных соотношениях, после этого эффективность немного возрастала, а потом опять падала дальше. Может при таком соотношение ПФ в колонке оседает соль ТЭА? Хотелось бы узнать ваше мнение, спасибо.
Не похоже, чтобы, при таком соотношении ПФ выпадала соль ТЭА. Вроде обыкновенная колонка, обыкновенная ПФ. А какой кстати, объект анализа? Может эта информация как то прольет свет.
Novice
Пользователь
Ранг: 71


21.09.2012 // 16:50:00     
Редактировано 1 раз(а)


EvgeniyChup пишет:
Сорри запарился. Я в это время статью читал, наверно и ошибся. Тогда как вариант менять метанол на ацетонитрил. Ну и конечно промыть систему. В начале водой, потом ацетоном, и уже затем элюентом.[/quote
Проблема с малым объемом ОЗУ? (Оперативная память)
Вспомнился анекдот: встречаются 2 хроматографиста, 1 жалуктся, что у него уменьшилось число ТТ в системе, второй говорит - возьми вместо уксуски фосфорную, проблема решиться. Через время встречаются, проблема не решена, и второй советует поменять орг. р-ль. Через время, дает еще один совет. Встречаются снова, первый говорит - все, хроматограф сдох. Второй - жаль, у меня было еще столько новых идей.
Кстати, ТЭА используется при разделении органических кислот, не оснований.
Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
АналитПро, ООО АналитПро, ООО
Комплексное оснащение химико-аналитических и испытательных лабораторий. Консалтинг, информационное и научно-техническое сопровождение поставок лабораторного и аналитического оборудования. Комплектация лабораторий, подбор методик и оборудования.
EvgeniyChup
Пользователь
Ранг: 41


21.09.2012 // 17:00:25     
Редактировано 1 раз(а)

Иногда RAM не срабатывает, надо DDR3 ставить.
ТЭА это самый распространенный модификатор при разделении на С18 силикагеле.
Еще одна причина может быть связана с тем как готовили раствор пробы. Если растворили в элюенте, то надо искать другую причину, а если растворяли в хлористом метилене или ДМФА?
Так что стоит попросить топикстартера подробно описать эксперимент. Что делит, в чем растворяет.
EvgeniyChup
Пользователь
Ранг: 41


21.09.2012 // 17:12:29     

leshkin-yo пишет:
Может при таком соотношение ПФ в колонке оседает соль ТЭА?.
А Вы перед уходом систему не промываете или перед началом работы?
leshkin-yo
Пользователь
Ранг: 213


21.09.2012 // 19:17:03     
Постараюсь ответить на все вопросы.
ТТ считает программа на хроматографе аджилент 1200. Вы правы происходит размывание т.к. увеличивается ширина пика.
Данный состав ПФ был подобран в процессе разработки МК, тогда все было нормально и эту методику я уже не смогу изменить (заменить метанол на ацетонитрил).
Объект анализа дезлоратадин без других веществ, растворитель ПФ.
Систему промываю метанолом с водой 1 раз в сутки т.к. хроматограф работает круглосуточно.
Подскажите, какие составы ПФ нежелательны В ОФ хроматографии.
Попробую поменять пред колонку может поможет.
EvgeniyChup
Пользователь
Ранг: 41


21.09.2012 // 19:36:36     
вот ссылка на неплохую книгу:
www.chemport.ru/forum/viewtopic.php?f=35&t=72038
при приготовлении ПФ для ОФ, следуют следующим принципам:
Основа - полярный растворитель
Добавка -растворитель менее полярный чем основа (подбирают в зависимости от элюирующей силы).
При приготовлении ПФ ее стоит дегазировать на водоструйнике.
пробу растворять желательно в среде подобной элюенту (идеально в самом элюенте). Если не удается то в начале в менее полярно фазе, а потом разбавлять более полярной с добавкой модификатора и конечно доводить до pH. Попробуйте найти автора методики, может подскажет, что может быть не так и на что стоит обратить внимание.
leshkin-yo
Пользователь
Ранг: 213


21.09.2012 // 20:39:47     

EvgeniyChup пишет:
вот ссылка на неплохую книгу:
www.chemport.ru/forum/viewtopic.php?f=35&t=72038
при приготовлении ПФ для ОФ, следуют следующим принципам:
Основа - полярный растворитель
Добавка -растворитель менее полярный чем основа (подбирают в зависимости от элюирующей силы).
При приготовлении ПФ ее стоит дегазировать на водоструйнике.
пробу растворять желательно в среде подобной элюенту (идеально в самом элюенте). Если не удается то в начале в менее полярно фазе, а потом разбавлять более полярной с добавкой модификатора и конечно доводить до pH. Попробуйте найти автора методики, может подскажет, что может быть не так и на что стоит обратить внимание.


Спасибо за ссылку, данная книга у меня есть, изучаю ее потихоньку. Автор методики я (первая методика которую я разработал, теперь валидирую ее). Когда разрабатывал МК, то руководствовался принципами, которые Вы написали, а состав фазы подобрал читая книгу Сычева, указанную выше. Сегодня получилось хорошо промыть колонку, начал анализ, пока эффективность восстановилась, посмотрим, что будет завтра.

  Ответов в этой теме: 30
  Страница: 1 2 3
  «« назад || далее »»

Ответ на тему


ААС, ИСП-АЭС, ИСП-МС - прямые поставки в 2022 году

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]


ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2022
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты