Форумы ANCHEM.RU: ВЭЖХ Попытка воспроизвести методику из Eu. Ph.

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

ВЭЖХ Попытка воспроизвести методику из Eu. Ph. >>>

  Ответов в этой теме: 21
  Страница: 1 2 3
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]

Автор

Тема: ВЭЖХ Попытка воспроизвести методику из Eu. Ph.

nk_guapa
Пользователь
Ранг: 15

30.03.2012 // 14:57:01

Редактировано 1 раз(а)

Возникла такая проблема. Необходимо провести анализ субстанции согласно методики из европейской фармакопеи. Указана колонка: 4,6х150, 5 мкм, С18 эндкеп. На Zorbax Eclipse XDB-C18 в указанных в методике условиях (подв.фаза - орг.р-ль:буфер, поток) вещество выходит в мертвом объеме, никаких примесей не видно. При уменьшении доли орг. р-ля в элюенте время удерживания основного пика возрастает, и появляются примеси. Но дело в том, что в статье указаны относительные времена удерживания примесей, по которым проводится их идентификация. А при изменении состава подвижной фазы изменяются и относительные времена удерживания, т.е. нельзя будет идентифицировать примеси по относительным временам удерживания. Остается только изменять поток? Или колонка не подходит?

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Serga
Пользователь
Ранг: 1806

30.03.2012 // 15:59:02

nk_guapa пишет:
При уменьшении доли орг. р-ля в элюенте время удерживания основного пика возрастает, и появляются примеси.

Интересно- ДО или ПОСЛЕ основного вещества появляются эти примеси? И что за вещество- это секрет?

абр
Пользователь
Ранг: 904

30.03.2012 // 16:59:23

nk_guapa пишет: ... в статье указаны относительные времена удерживания примесей....

по отношению к чему?

leshkin-yo
Пользователь
Ранг: 213

30.03.2012 // 22:44:24

абр пишет:

nk_guapa пишет: ... в статье указаны относительные времена удерживания примесей....
по отношению к чему?

Время выхода пика АФС принемается за 1. Нарпимер время выхода основного вещества 7,5мин, относительное время выхода примеси около 0,45. 7,5*0,45=3,375.

leshkin-yo
Пользователь
Ранг: 213

30.03.2012 // 22:49:04

nk_guapa пишет:
Возникла такая проблема. Необходимо провести анализ субстанции согласно методики из европейской фармакопеи. Указана колонка: 4,6х150, 5 мкм, С18 эндкеп. На Zorbax Eclipse XDB-C18 в указанных в методике условиях (подв.фаза - орг.р-ль:буфер, поток) вещество выходит в мертвом объеме, никаких примесей не видно. При уменьшении доли орг. р-ля в элюенте время удерживания основного пика возрастает, и появляются примеси. Но дело в том, что в статье указаны относительные времена удерживания примесей, по которым проводится их идентификация. А при изменении состава подвижной фазы изменяются и относительные времена удерживания, т.е. нельзя будет идентифицировать примеси по относительным временам удерживания. Остается только изменять поток? Или колонка не подходит?

посмотрите монографию Ph. Eur. 2.2.46

Там расписаны допустимые изменения для каждого вида хроматографии.

А примеси можно проколоть по отдельности и идентифицировать.

4iter
Пользователь
Ранг: 89

02.04.2012 // 0:35:34

Колонка колонке рознь. Как минимум необходимо знать какое вещество анализируете, чтобы узнать на какой колонке делалось по ЕР, а там уже искать аналог.

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Лаборатория аналитического контроля ЗАО "РРЭЦ"
Проведение количественного химического анализа проб грунтового воздуха с территории распространения техногенных газогенерирующих грунтов газохроматографическим способом

nk_guapa
Пользователь
Ранг: 15

02.04.2012 // 10:39:38

Редактировано 3 раз(а)

Serga пишет:

Интересно- ДО или ПОСЛЕ основного вещества появляются эти примеси? И что за вещество- это секрет?

Анализируем флударабина фосфат. То, что появляются примеси - это "хорошо", поскольку при анализе на колонке Inertsil ODS-3 250 мм они есть. Примеси и до, и после основного пика.

nk_guapa
Пользователь
Ранг: 15

02.04.2012 // 10:48:20

Редактировано 2 раз(а)

leshkin-yo пишет:

посмотрите монографию Ph. Eur. 2.2.46

Там расписаны допустимые изменения для каждого вида хроматографии.

А примеси можно проколоть по отдельности и идентифицировать.
Насчет допустимых изменений известно. А вот с примесями сложно - нет их, в чем и проблема... Остается при идентификации примесей ориентироваться на их относительные времена удерживания.

nk_guapa
Пользователь
Ранг: 15

02.04.2012 // 12:04:32

Редактировано 1 раз(а)

При разработке методики в частной фармакопейной статье европейской фармакопеи использовалась колонка с массовой долей углерода 20%, а у Zorbax - 10%. Может быть, в этом причина?

Farma
Пользователь
Ранг: 382

02.04.2012 // 14:22:57

Редактировано 2 раз(а)

nk_guapa пишет:
При разработке методики в частной фармакопейной статье европейской фармакопеи использовалась колонка с массовой долей углерода 20%, а у Zorbax - 10%. Может быть, в этом причина?

Вполне может быть. А может быть и по ряду других причин-параметров Вашей колонки. Я бы посоветовал либо найти прописанную колонку, либо поиграться с элюентом (что не есть гут с регуляторной точки зрения

). Изменение скорости потока вероятнее всего ничего не даст - мёртвый объём он и в Африке мёртвый, нужно удержать основное вещество. А вообще ситуация довольно стандартная.

nk_guapa
Пользователь
Ранг: 15

02.04.2012 // 15:45:53

Редактировано 2 раз(а)

Farma пишет:
... Я бы посоветовал либо найти прописанную колонку, либо поиграться с элюентом (что не есть гут с регуляторной точки зрения ). Изменение скорости потока вероятнее всего ничего не даст ...

уменьшение скорости потока, конечно, увеличивает время выхода, но при этом и размывает пик. остается варьировать состав элюента, но здесь надо остаться в пределах допустимых фармакопеей границ.


Ответов в этой теме: 21 Страница: 1 2 3 «« назад \|\| далее »»	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты