| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Нет воспроизводимости (аминокислоты, ВЭЖХ, Luna C-18) >>>
|
 |
| Автор | Тема: Нет воспроизводимости (аминокислоты, ВЭЖХ, Luna C-18) | ||
|
lenna_22 Пользователь Ранг: 8 |
 08.10.2010 // 14:57:19
Здравствуйте! У меня такая проблема: не могу добится воспроизводимости результатов для одной и той же пробы, вроде хроматограммы похожи, а площади и высоты пиков не совпадают. Я анализирую аминокислоты с пом. ВЭЖХ. Колонка Luna C-18, элюент: градиент ацетонитрил-(дигидрофосфат калия+ацетат аммония). |
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
DSP007 VIP Member Ранг: 2228 |
08.10.2010 // 15:03:32
Чем колите? Если вручную- то наиболее типичная ошибка- неполное заполнение петли инжектора типа Rheodine. Шприц должен быть по объему раз в десять больше объема петли ( к примеру петля 20 мкл, значит шприц д/б минимум 200 мкл, лучше 1 мл) , а его игла- плотно входить в уплотнитель инжектора. |
||
|
lenna_22 Пользователь Ранг: 8 |
08.10.2010 // 15:04:08
Есть предположение, что это связано с детектором. У меня: Uvicord SD, длина волны 436, лампа тип 1 |
||
|
lenna_22 Пользователь Ранг: 8 |
08.10.2010 // 15:05:35
петля V=20мкл , шприц - 1 мл |
||
|
DSP007 VIP Member Ранг: 2228 |
08.10.2010 // 15:21:03
Так у вас что- не ВЭЖХ , а аминокислотный анализатор с дериватизацией нингидрином? Тогда задача несколько усложняется, кроме обычного утекания пробы может быть еще нестабильность подачи и смешения дериватизирующего агента и слишком высокая скорость прокачки через зону нагрева . Ну и полный писец, если вы дериватизируете их заранее , тут количество факторов неограничено. В общем подробную метоику в студию. |
||
|
DSP007 VIP Member Ранг: 2228 |
08.10.2010 // 15:24:22
Кстати , название увикорд никому ничего не говорит, равно как и лампа тип один. У вас должна стоять включенной лампа видимого света , проверка - вентиляционные щели детектора обычно при этом светяться желтым . Для дейтереиевой УФ лампы излучение в видимой области спектра слишком слабо. |
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
MeOH Пользователь Ранг: 487 |
08.10.2010 // 15:33:59
Диагностируем по симптомам:1. Пробуем выяснить-системна ли воспроизводимость, наблюдается ли какая-либо зависимость? Провести анализ данных. 2. Контролируем давление %колебаний-очень важно, вдруг смеситель? делаем чистую хроматограмму(если возможно) по методу без закола, если можно-смотрим если пошли левые пики или еще какая дрянь вопросы к смесителю и колонке в первую очередь 3. Пробуем с другим шприцем, и как уже указал DSP тщательно контролируем ввод пробы 4. Пробуем с другой петлей. 5. К лампе и ячейке вопросы в посл очередь |
||
|
lenna_22 Пользователь Ранг: 8 |
11.10.2010 // 12:24:03
Пробы анализирую с помощью ВЭЖХ. Провожу предколоночную дериватизацию с помощью DABS-Cl. Вентиляционная щель детектора светится фиолетовым. |
||
|
DSP007 VIP Member Ранг: 2228 |
11.10.2010 // 12:52:52
У вас включена дейтериевая лампа. У нее свыше 400 нм излучение очень слабое , наверно 0,5% от полной мощности излучения . В итоге разница между световым и темновым током очень низка и ошибка собственно детектора повышается. Это одна ошибка, сможете ли вы устранить ее технически- вопрос более интересный. Вторая ошибка- при модификации таким способом очень трудно добиться хорошей сходимости в принципе. Сама реакция зависит от многих факторов, в том числе и от временного (продукт потихоньку сыпется под влиянием света и кислорода) |
||
|
MeOH Пользователь Ранг: 487 |
11.10.2010 // 13:04:33
во втором случае по идее должна быть зависимость |
||
|
lenna_22 Пользователь Ранг: 8 |
11.10.2010 // 13:18:56
Спасибо, большое. Сейчас проанализирую, есть ли зависимость. |
| |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
