| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Капиллярная ВЭЖХ >>>
|
 |
|
Islander VIP Member Ранг: 1065 |
 27.11.2009 // 14:15:40
Не стоило бы так категорично высказываться. Во многих случаях матричный эффект в ВЭЖХ-МС убирается именно подбором правильных условий хроматографического разделения. |
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
27.11.2009 // 23:51:24
Но не заменой же диаметра колонки 
|
||
|
mig Пользователь Ранг: 68 |
29.11.2009 // 13:06:31
Уважаемый Drone, как ни странно, но в этот раз форумчане, почти единодушны. Давайте рассмотрим схему прибора и Ваши попытки увеличить чувствительность, через уменьшение диаметра колонки, и как следствие, переходу даже не к микроколоночной хроматографии а к капиллярной. Ваше оборудование с лёгкость можно приспособить к микроколонке 150х2мм. Это потребует уменьшения потока, даже объём пробы можно оставить прежним. А при переходе к капиллярной, не смотря на оптимизм Агилентовцев, придётся полностью переоборудовать прибор. При тех же насосах Вам потребуется: докупить делитель потока, ячейку детектора, автосамплер, саму колонку, заменить все капилляры и масс-спектрометр, Ваш, как указывалось ранее, не выдержит низкой скорости подачи элюата. При всём этом, без оптимизации пробоподготовки соотношение интенсивности пика анализируемого соединения к матрице останется прежним. А возможно наоборот, ухудшится. Моё субъективное мнение подсказывает, что дешевле купить новый LCMS, но соответствующий. Резюме: если Ваш боевой оптимизм не угас, попробуйте для начала сменить аналитическую колонку на микро это и дешевле и в некоторых воросах по оборудованию и чувствительности Вы самостоятельно убедитесь. |
||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
29.11.2009 // 18:16:54
Она уже микро, т.е. 150х2, вопрос только что за адсорбент там.. а уже если автор фанат он-лайн очистки, то можно попробовать микрокртриджи с RAM адсорбентами (всего лишь как вариант).. есть быстрая MEPS твердофазная экстракция в он-лайн варианте, только жаль сейчас они не выпускаются с RAM адсорбентами.. но что бы ни использовалось - все равно внутренний стандарт нужен, естественно.. Кстати, если работать всегда тяжело, т.е. если проблема коэлюирование контаминантов и аналитов посит постоянный характер, то, может, изменить вообще режим хроматографирования? Например, если у Вас обращенка, то попытаться сделать все на аминофазе или силикагеле в гидрофильном режиме.. а для очистки и правда применять МЕPS.. у Вас вещества насколько полярные? |
||
|
mig Пользователь Ранг: 68 |
29.11.2009 // 18:29:59
|
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
Islander VIP Member Ранг: 1065 |
29.11.2009 // 21:12:16
Хотя я сам подобного опыта не имею, приходилось неоднократно слышать и читать, что nano-ESI не только позволяет значительно увеличить концентрационную чувствительность, но и сильно уменьшить зависимость эффективности ионизации от посторонних компонентов матрицы, то есть, избежать подавления сигнала. Загвоздка, я так понимаю, за малым - нужен специальный источник (nano-ESI) и соответстующий HPLC прибор, способный проводить разделения при скоростях потока в несколько микролитров в минуту на колонках 50 мкм диаметром. В протеомике это уже давно норма, но в наших делах пока не прижилось - дуракоупорность подобных систем низкая, получить хорошее электрораспыление непросто, количественная воспроизводимость результатов хуже, чем у традиционных систем. А сам масс-спектрометр подойдет, его менять не надо... |
||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
29.11.2009 // 22:27:16
Ну, а зачем специальный прибор? делитель потока (после стандартного инжектор) и колонку.. вон, у меня даже все есть (подарили как-то), только колонка 150х0.15.. .. а эффект матрицы меньше - из-за того что просто мешьше вещества попадает? |
||
|
Islander VIP Member Ранг: 1065 |
29.11.2009 // 23:19:22
Редактировано 1 раз(а) Если уж делитель потока, то и после колонки тоже (и в первую очередь). Надо сказать, прецизионные делители потока для требуемых соотношений довольно дороги. А уж без специального nano-ESI источника в этом случае точно никак. А почему матричный эффект меньше, я в эту теорию серьезно не лез, поэтому объяснить на пальцах не смогу. Рекомендую поискать, используя ключевые слова nano-ESI, Taylor-cone, charge competition, matrix effect. Лично мне все равно почему, главное, многие отмечали это на практике. |
||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
04.12.2009 // 3:32:44
Интересно, а у капилярных колонок как раз на выходе длинющий капилляр оставлен.. наверное, предполагается, что так ее в МС и надо засовывать.. а зачем делитель после колонки? |
||
|
Drone Пользователь Ранг: 124 |
04.12.2009 // 7:52:22
Установка колонки прямо в небулайзер? А все капиллярные колонки так устроены? |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 30
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
