| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Анализ жирных кислот >>>
|
 |
| Автор | Тема: Анализ жирных кислот | |||||
|
Сергей Ф. Пользователь Ранг: 5 |
 03.12.2004 // 13:46:55
Уважаемые коллеги! Нет ли среди Вас кого-либо, кто занимался анализом жирных кислот методом ВЭЖХ? Интересует подготовка образца: экстракция липидов,гидролиз, метилирование. Матрица: плазма крови. Заранее благодарен. |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
Islander VIP Member Ранг: 1065 |
03.12.2004 // 14:31:33
Как я уже писал в теме "ВЭЖХ", я занимался анализом вальпроевой кислоты в плазме. Осаждение белков, дериватизация нитрофенацилбромидом. Метилирование для ВЭЖХ не выход - поглощение в УФ не поднимет, это для ГЖХ. Лучше фенацильные производные, которые, в свою очередь, легче получать в присутствии крауна и бикарбоната натрия или калия. Хотя есть и другие варианты. По свободным жирным кислотам методом ВЭЖХ в плазме есть литература: Хотя возможно, что при определении общего содержания жирных кислот чувствительности может хватить и без дериватизации. Экстракция - гексаном, гидролиз щелочной. В последней ссылке газовая хроматография, но экстракция, гидролиз и даже дериватизация подойдут и для ВЭЖХ. |
|||||
|
Сергей Ф. Пользователь Ранг: 5 |
06.12.2004 // 12:03:43
Спасибо большое. С литературой внимательнейшим образом ознакомлюсь. Меня ещё интересует вот какой вопрос: в большинстве ссылок описывается либо метанолиз, либо другой тип дериватизации. На установленной у меня системе мне удобней иметь дело с немодифицированными кислотами. Это возможно? Или же без получения эфиров не обойтись? |
|||||
|
Islander VIP Member Ранг: 1065 |
06.12.2004 // 14:14:17
Если Вы используете УФ детектор, то дериватизация реагентом с хромофором значительно поднимет чувствительность (метилирование не даст никакого эффекта). Так что все зависит от требуемой чувствительности. |
|||||
|
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
06.12.2004 // 14:18:48
При наличии хорошей колонки и достаточно большого содержания ЖК (или их эфиров) в плазме можно определить их и напрямую в обращеннофазном режиме. Но эфиры то все равно гидролизовать придется. Да и не все жирные кислоты можно увидеть в УФ. Честно говоря, я охотней бы применил для этих целей ГХ в виде метиловых или каких других эфиров. Это и дешевле, и по чувствительности получше будет, да и матрица значительно упрощается, так как сами собой отметаются малолетучие липофильные соединения. Но, как говорится, хозяин - барин... |
|||||
|
Сергей Ф. Пользователь Ранг: 5 |
06.12.2004 // 15:26:15
Спасибо за информацию. А не знает ли кто-нибудь простого и надёжного способа перевести жирные кислоты в свой естественный вид после гидролиза липидов? Иначе градуироваться придётся тоже по эфирам жирных кислот, а ой, как не хочется... |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
06.12.2004 // 16:04:28
Самое простое - после гидролиза со щелочью или аммиаком (аммонолиза) подкислить раствор до рН 2-3 и проэкстрагировать ЖК хлороформом или гексаном, а затем перерастворить (после отгонки первого растворителя на роторе) в элюенте или чистом ацетонитриле. Можно применить для выделения свободных ЖК и твердофазную экстракцию. Если нужны и достаточно короткоцепочные кислоты, то при анализе используйте систему ацетонитрил-кислый фосфатный буфер-триэтиламин. Длинные кислоты и так хвостатить не будут, поскольку достаточно липофильны. |
|||||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
06.12.2004 // 18:57:42
Эта тема обсуждалось много раз. Надо попросить модератора достать их из архива (а написано в них было много) |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 7 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
