| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
валидация методики определения молекулярно-массового распределения ВЭЖХ >>>
|
 |
| Автор | Тема: валидация методики определения молекулярно-массового распределения ВЭЖХ | ||
|
verner45 Пользователь Ранг: 10 |
 31.05.2018 // 17:01:06
Уважаемые коллеги! Может, кто знает, надо ли подтверждать в валидации параметр "линейность" для методики (ВЭЖХ) определения молекулярно-массового распределения? И если надо, то какая тут может быть логика? Норма в НД - площадь основных пиков должна быть не менее 75% от суммы площадей всех пиков на хроматограмме. |
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
vmu Пользователь Ранг: 1394 |
31.05.2018 // 20:52:06
Редактировано 1 раз(а) То, что вы называете определением молекулярно-массового распределения (ММР), вероятно, по сути является определением родственных примесей. Что-то многих так и тянет называть определением ММР то, что является им лишь с большой натяжкой, например определяют агрегаты (димеры и т.д.) (а иногда и низкомолекулярные фрагменты за компанию) в белковом лек. средстве - пишут "определение ММР", хотя в первую очередь и по сути это - определение родственных примесей. Посмотрите в фармакопеях статьи, например, на декстраны и низкомолекулярные гепарины. Вот там определение ММР (точнее некоторых параметров ММР). Вашу норму можно переформулировать: "площадь НЕосновных пиков (т.е. примесей) должна быть НЕ БОЛЕЕ 25% от суммы площадей всех пиков на хроматограмме". Соответственно, ваша методика должна валидироваться так же, как методика определения примесей (пусть и с такой высокой нормой их содержания), включая проверку линейности (считаете-то методом внутренней нормализации; без линейности тут никуда) и установление нижней границы определяемых содержаний (LOQ; какой величины пики примесей подлежат разметке на хроматограмме и суммированию, а какие можно игнорировать? проверка чувствительности хром. системы перед испытанием прописана в методике?). |
||
|
Шушечка Пользователь Ранг: 518 |
01.06.2018 // 4:22:57
молекулярно-массового распределения это что за зверь???? |
||
|
SergeyK Пользователь Ранг: 2168 |
01.06.2018 // 7:53:39
гель-проникающая/эксклюзионная хроматография |
||
|
verner45 Пользователь Ранг: 10 |
01.06.2018 // 12:21:22
Этот параметр используется в НД для отечественных лексредств бактериального происхождения - вакцины, например. Для них он обязательный |
||
|
OldBrave VIP Member Ранг: 1375 |
02.06.2018 // 20:58:41
Редактировано 2 раз(а) Все требует пояснений, по крайней мере для меня. Какая связь MMP с "родственными примесями"? Гель-фильтрация позволяет в некоторой степени разделить в-ва по м.весу и причем тут "родство", в чем оно заключается? Далее, "величина пиков... суммирование". Не нужно путать мягкое с теплым. А детектор какой? "...проверка чувствительности хром. системы" на "примеси"? Понятие линейности ММР связано прежде всего с линейностью диапазона разделения по м.весу. Разделительная система (колонка) должна обеспечивать конкретный линейный диапазон разделения по массам. |
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
virtu VIP Member Ранг: 2136 |
03.06.2018 // 10:43:45
Надо, т.к. при "перегрузе" детектора по основным пикам вы получите бОльшую ошибку определения относительной площади этих пиков при нормализации. На такое достаточно легко попасть с детекторами с относительно маленьким линейным динамическим диапазоном (RID, MS = TOF, QqTOF и др.). |
||
|
vmu Пользователь Ранг: 1394 |
03.06.2018 // 12:13:45
Редактировано 2 раз(а) У топикстартера надо спрашивать, почему обсуждаемый показатель качества препарата должен называться "ММР" и какие-такие полимеры с широким распределением по массе содержатся в препарате. Из первого сообщения понятно, что определяют состав препарата с нормой содержания НЕнужных компонентов (читай: примесей) "не более 25%". Поясняющий пример я привел. Повторю. Есть препарат. Действующее вещество - белок с относительной молекулярной массой M. Этот белок может образовывать агрегаты с массами 2M (димеры), 3M (тримеры) и т.д. Эти агрегаты являются примесями (думаю, не нужно пояснять, почему "родственными"), ухудшающими качество препарата. Их содержание определяют методом эксклюзионной ВЭЖХ. Такие показатели качества препарата иногда называют "ММР", но суть и валидация методик на такие показатели такие же, как при определении любых примесей любыми вариантами ВЭЖХ (с разными механизмами разделения и разными детекторами). Здесь речь идет не о линейности связи логарифма молекулярной массы с временем удерживания. Она, кстати, необязательна. При определении ММР чаще всего зависимость lgM - tR описывают полиномом третьей степени. В статье EP на декстраны используют более сложную зависимость. При определении примесей эксклюзионной ВЭЖХ конкретная форма этой зависимости вообще не имеет непосредственного значения. Лишь бы разделение было приемлемым. Речь идет о линейности зависимости отклика детектора от содержания компонента в пробе. Для метода внутренней нормализации такая линейность обязательна. |
||
|
OldBrave VIP Member Ранг: 1375 |
03.06.2018 // 17:15:08
Редактировано 2 раз(а) Нужно осторожно использовать термин "агрегаты". |
||
|
Алексей (СамГУ) Пользователь Ранг: 367 |
04.06.2018 // 9:33:14
Здесь полезная презентация с одного из семинаров по фармацевтике https://yadi.sk/i/oZXU_MA43X3Wyg |
||
|
Алексей (СамГУ) Пользователь Ранг: 367 |
04.06.2018 // 9:33:14
Здесь полезная презентация с одного из семинаров по фармацевтике https://yadi.sk/i/oZXU_MA43X3Wyg |
| |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
