Форумы ANCHEM.RU: Гель проникающая хроматография

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Гель проникающая хроматография >>>

  Ответов в этой теме: 40
  Страница: 1 2 3 4
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]

Автор

Тема: Гель проникающая хроматография

olyamalblwka
Пользователь
Ранг: 41

28.03.2017 // 16:19:47

Подскажите, знатоки гель -проникающей хроматографии, кто сталкивался с проблемой смещения времен удерживания? Есть ли какие-то особенности ухода за гель-колонкой? В паспорте на колонку только указаны максимально-допустимый расход , pH, возможные элюенты .

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

SergeyK
Пользователь
Ранг: 2168

28.03.2017 // 18:39:52

olyamalblwka пишет:
Есть ли какие-то особенности ухода за гель-колонкой?

Какие-то есть.
Каталожный номер колонки может быть назовете?

olyamalblwka
Пользователь
Ранг: 41

28.03.2017 // 20:29:39

Колонка Ultrahydrogel 250, фирмы Waters

SergeyK
Пользователь
Ранг: 2168

28.03.2017 // 21:32:22

olyamalblwka пишет:
Колонка Ultrahydrogel 250, фирмы Waters

Тут нет того, что нужно?
https://www.waters.com/webassets/cms/support/docs/wat011556.pdf

olyamalblwka
Пользователь
Ранг: 41

29.03.2017 // 6:20:27

Такое руководство есть, соблюдаем условия , которые там указаны. Однако про смещение времен удерживания там нет информации (((

SergeyK
Пользователь
Ранг: 2168

29.03.2017 // 8:05:40

Редактировано 2 раз(а)

olyamalblwka пишет:
Такое руководство есть, соблюдаем условия , которые там указаны. Однако про смещение времен удерживания там нет информации (((

Тогда вам придется подробнее рассказать о своей проблеме, с хроматограммами. Лучше так: https://www.opennet.ru/docs/RUS/smart_question/

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Аврора-ИТ, ЗАО
Компания Аврора-ИТ специализируется на внедрении информационных технологий класса LIMS (Лабораторных Информационных Систем) на предприятиях различных отраслей промышленности. Компания осуществляет полный комплекс услуг по внедрению ПО, включая сопровождение и техническую поддержку. Компания предлагает средство для автоматизации ВЛК согласно требованиям ГОСТ Р ИСО 5725 – программу «Lab5725X».

Garry
VIP Member
Ранг: 1076

29.03.2017 // 8:53:17

olyamalblwka пишет:
Подскажите, знатоки гель -проникающей хроматографии, кто сталкивался с проблемой смещения времен удерживания? Есть ли какие-то особенности ухода за гель-колонкой? В паспорте на колонку только указаны максимально-допустимый расход , pH, возможные элюенты .

Оля, если Вы хорошо представляете, какой принцип заложен в основу ГПХ, то должны искать причины, которые приводят к нарушению механизма ГПХ. Во-первых, в состав водных элюентов для ГПХ, если они к тому же не содержат ацетонитрила и метанола обычно добавляют в обязательном порядке консерванты типа азида натрия (0,01 %) или хлорэтанола во избежание контаминации колонок всевозможными микроорганизмами, особенно при использовании фосфатных буферов. Во-вторых, на процесс постоянства времен удерживания влияет термостатирование колонок и нормальная стабильная работа насосных систем. Так что проверьте постоянство поддержания температуры в термостате колонок и, соответственно постоянство заданного расхода элюента.
В-третьих, если есть проблемы с точностью определения молекулярных масс, то обычно используют в качестве параметров калибровки так называемые относительные времена удерживания. Для этого в анализируемые растворы добавляют потоковые маркеры. Что это значит ? Например, Вы определяете молекулярную массу декстранов или ГЭКов. Для повышения точности к раствору образца и стандартных растворов, предназначенных для калибровки системы добавляют раствор глюкозы или этиленгликоля. В результате хроматографирования, Вы получите пик стандарта или пик анализируемого полимера и дополнительно пик потокового маркера. При построении калибровки заносят не времена удерживания в максимуме пика, а величину соотношения Tmax/Tpm (время удерживания в максимуме пика/времени удерживания потокового маркера). Соответственно для расчета молекулярных масс исследуемых образцов оперируют такими же отношениями времен удерживания фракций (секций) пика полимера к времени удерживания потокового маркера. Использование потокового маркера полностью компенсирует все проблемы со стабильностью потоков и температур в хроматографической системе.
В-четвертых, в системах для ГПХ никогда не применяйте расходы элюента более 1 мл/мин! Большие расходы приведут к проседанию геля в колонках, увеличению мертвого объема, размыванию пиков (потеря эффективности), могут привести к образованию так называемых войдов (трещин и пустот), что непременно скажется на процессе ГПХ.
В-пятых, к смещению времен удерживания может приводить процесс нарушения механизма ГПХ за счет появления адсорбционных проявлений, которые могут быть генерированы накопившимися примесями из образцов, особенно, полный состав которых Вам не ведом. В этом случае необходимо применять защитную предколонку в обязательном порядке.... Ну и периодически подвергать колонку специальной промывке например, растворами ДМСО (зависит от типа предполагаемых загрязнителей)

SergeyK
Пользователь
Ранг: 2168

29.03.2017 // 9:41:27

В-шестых, всегда меняйте колонку на малом потоке насоса, и так, чтобы воздух не попадал в колонку.

olyamalblwka
Пользователь
Ранг: 41

29.03.2017 // 10:38:17

Спасибо, Garry,за ваш очень информативный комментарий 😊 давайте по Вашим пунктам: мы используем раствор 0,1 М NaNO3. По поводу консервантов не слышала раньше. И в инструкции на колонку этого нет((( обязательно попробуем
2) расход проверяли,. Термостат также работает в норме. 3) по поводу маркеров - попробуем подобрать.4) расход 0.8 используем, 5) предколонка имеется, промывку водой делаем, т.К анализируем водные растворы, 6) не совсем понятна процедура замены колонки при расходе. Поясните, пожалуйста

SergeyK
Пользователь
Ранг: 2168

29.03.2017 // 11:11:35

SergeyK пишет:
В-шестых, всегда меняйте колонку на малом потоке насоса, и так, чтобы воздух не попадал в колонку.

Примерно вот так: www.pss-polymer.com/fileadmin/custom_documents/TT_HowtoInstallGPCcolumns_022014.pdf

olyamalblwka
Пользователь
Ранг: 41

29.03.2017 // 12:22:12

SergeyK, спасибо. Правильно ли я поняла из данного документа, что если воздух в колонке, то надо обратным ходом промывать при маленьком расходе?


Ответов в этой теме: 40 Страница: 1 2 3 4 «« назад \|\| далее »»	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты