| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
ВЭЖХ Попытка воспроизвести методику из Eu. Ph. >>>
|
 |
|
Farma Пользователь Ранг: 382 |
 02.04.2012 // 20:38:53
уменьшение скорости потока, конечно, увеличивает время выхода, но при этом и размывает пик. Я быть может не совсем правильно Вас понял: Вы написали, что основное вещество вылетает с мёртвым объёмом (то есть удерживания нет). Я очень сомневаюсь, что снижение расхода позволит его удержать в таком случае. Времена выхода пиков (в том числе и мертвака) вырастут, конечно, но коэффициенты ёмкости останутся приблизительно теми же. То есть задачу свою Вы не решите. |
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
4iter Пользователь Ранг: 89 |
03.04.2012 // 0:27:02
Редактировано 3 раз(а) На сколько понимаю в оригинале используется Chemcosorb 5-ODS-H, а она уж очень сильно будет отличаться от Zorbax по своим свойствам. Или колонку похожую искать по свойствам или оригинал. С относительными временами удерживания по примесям можно и промазать (для чего-то совпадет, а что-то может сильно отличаться). Раньше где-то встречал, что в фармакопейной методике относительные времена удерживания могут варьироваться в +-10% от искомого. И уважаемый Farma прав, так как уменьшение потока элюента не приведет к желаемому результату. И еще: ну не смотря на то, что Zorbax сильно отличается от оригинальной колонки, какие размеры у нее? В пользу оригинальной колонки: как-то раз необходимо было проанализировать по фарм статье одно вещество. Так как постоянно работали с Zorbax, то заказали именно Zorbax (аналог Waters). Месяц просто был потерян зря, так как ничего не получилось сделать. Еще месяц ушел на то, чтобы привезли колонку Waters и все заработало... |
||
|
nk_guapa Пользователь Ранг: 15 |
03.04.2012 // 13:27:07
Редактировано 2 раз(а) |
||
|
nk_guapa Пользователь Ранг: 15 |
03.04.2012 // 13:29:08
Редактировано 1 раз(а) Да, вы правы, изменение потока не сможет "задержать" вещество на колонке, поэтому остается менять состав подвижной фазы либо заменить колонку. |
||
|
nk_guapa Пользователь Ранг: 15 |
03.04.2012 // 13:44:46
150*4,6, 5 мкм - как прописано в фармстатье Оригинальную колонку пока не удалось найти, сейчас пробуем на другой - Inertsil 250*4.6. С ней получше, но тоже не все гладко. В фармстатье есть хроматограмма стандартного раствора. Ее нужно использовать для идентификации примесей. В методе А (примеси до основного пика) все хорошо с относительными временами удерживания. А в методе В (примеси после) профиль "нашего" стандарта практически полностью совпадает с приведенным в фармстатье, однако относительные времена - нет, причем более, чем на 10%. |
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
4iter Пользователь Ранг: 89 |
04.04.2012 // 9:31:56
Редактировано 2 раз(а) Оно и должно быть лучше, так как у Вас колонка на 100 мм длиннее и соответственно происходит лучшее разделение за счет увеличения удерживания на этих 100 мм, но как Вы правильно заметили, все равно не все гладко. |
||
|
4iter Пользователь Ранг: 89 |
04.04.2012 // 9:44:07
посмотрел сейчас статью в USP там используется L1 сорбент, по сути под него подходят Zorbax Stable Bond, Extend, Rx, ODS, Eclipse. Но там тоже в оригинале используют колонку Chemosorb производства Dychrom. Вот тебе и налоги... |
||
|
valerra Пользователь Ранг: 141 |
03.05.2012 // 14:18:14
Анализируем флударабина фосфат. То, что появляются примеси - это "хорошо", поскольку при анализе на колонке Inertsil ODS-3 250 мм они есть. Примеси и до, и после основного пика. О! Флюдарабин! На зорбаксе не получится. Там два набора примесей и ФСО для их идентификации. Раннеэлюирущиеся примеси хорошо получаются на колонке Symetry C18. Позднеэлюирующиеся примеси... тоже получаются, но на этой колонке в ФСО отдалилось еще несколько примесей и пришлось поломать голову - какая где. Европа флударабин анализирует на какой то японской экзотике, что найти ее не удалось. Отмечу, что оригинальный препарат - таблетки Флюдара примеси меряет в точности по фармакопее ES. |
||
|
nk_guapa Пользователь Ранг: 15 |
14.05.2012 // 14:41:25
Редактировано 1 раз(а) А как вы определяли, где какая примесь в методе Б? У вас были стандарты примесей? Для примесей до основного пика относительные времена удерживания совпали с указанными в Фармакопее? А с оценкой пригодности системы проблем не было? |
||
|
MeOH Пользователь Ранг: 487 |
18.05.2012 // 20:28:45
при нарушении относительных времен выхода при сохранении типа хроматографического разделения и порядка выхода веществ эту методику примет любой адекватный эксперт. так что не заморачивайтесь... подберите условия. если что, EDQM к этой методике рекомендует 0.15 m, diam. = 4.6 mm, 5 µm, Chemcosorb 5-ODS-H, 5 не критическая разница ИМХО |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 21
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
). Изменение скорости потока вероятнее всего ничего не даст ... 