| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Микотоксины, анализ на ВЭЖХ >>>
|
 |
| Автор | Тема: Микотоксины, анализ на ВЭЖХ | |||||
|
NadyaK Пользователь Ранг: 8 |
 27.05.2010 // 9:18:51
Господа! Помогите, пожалуйста! Занимаюсь анализом пищ.продуктов на определение микотоксинов: зеараленон, ДОН, Т-2, В1 на жидкостном хроматографе SHIMADZU по БСТ МВИ-02-01 и пробоподготовку делаю по МУК 4.1.787-99.Так вот-решала задачу-ответ неверный (мало, концентрацию давали больше)-где теряются микотоксины???И еще-при создании градуировочной стандарты выходят очень красиво, а вот пробы-выходит иногда "забор" пиков и попробуй разбери что там что! Помогите, кто занимается или может есть контакты каких грамотных людей, которые способны помочь.Может условия анализа не верно ставлю...ну длины волн вроде как в МВИ. |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
MeOH Пользователь Ранг: 487 |
27.05.2010 // 10:11:46
Редактировано 1 раз(а) Пользователь удалил свое сообщение |
|||||
|
Garry VIP Member Ранг: 1076 |
27.05.2010 // 11:23:53
Уважаемая Надя! Ну во-первых, первый принцип в работе аналитика - доверяй, но проверяй. К сожалению многие МВИ и тому подобное разрабатываются, так сказать, на кончике пера , а не "руцями". Да и процент определения надо "подрисовать" что бы внушительно было. Так вот, к чему я веду, рикавери или определяемость в результате выполнения всех "пассов руками" по МВИ для себя нужно устанавливать лично и не доверять цифирям из МВИ. - Они притянуты за уши !!!!! Реальный рикавери для микотоксинов не более 65-75 % от внесенного по принципу внесено-получено. Реальную методику для определения микотоксинов методом ВЭЖХ я разрабатывал для своей дочери (у нее были те же проблемы) максимально минимизировав количество проводимых операций (иногда совершенно не нужных) и без "лапездронов" (А.Арканов). Реально Зеараленон, Афлатоксин В1, ДОН, Охратоксин А анализировать ВЭЖХ в градиенте ацетонитрила и с УФ детекцией. Флюорометрия как вариант для В1 и М1, но.... как мы выяснили чувствительности УФ при 360 нм вполне достаточно для детектирования 0,5 ПДК. Итак, для ВЭЖХ микотоксинов с УФ детекцией: 1. Афлатоксин В1 - 358-360 нм. 2. Зеараленон - 274 нм. 3. ДОН -210 нм. Т2 ВЭЖХ не анализируют. Для него предпочтительнее ГЖХ или проще ТСХ с мицеллярными растворами в качестве ПФ и проявлением 20% серной кислотой в этаноле. Чтобы не было особого "забора " пиков необходимо правильно проводить очистку экстрактов, базируясь на свойствах микотоксинов. Лучший вариант - это афинные колонки, НО..... за неимением их мы чистим базируясь на силикагельных картриджах собственного изготовления "в домашних условиях"  . Но здесь важен принцип "правильной" элюции и стандартизации активности используемого силикагеля. Количество сорбента для картриджей (в их качестве выступают 10 мл одноразовые пластиковые шприцы. Дешево и сурово!). Есть, правда, факт соэлюирования с зеараленоном из проб нерафинированного растительного масла какого-то стерина, который нарушает специфичность метода, НО.... это решаемо дополнительным фракционированием на силикагеле, но в качестве элюента выступает 0,001 М NaOH. Зеараленон смывается, а стерин остается на силикагеле. Есть отличный тест на предмет подтверждения наличия зераленона, правда выполняется он ТСХ. Зеараленон с диазотированным бензидином образует устойчивую окраску красно-кирпичного цвета. Если в пробе есть зеараленон, то на ТСХ после обработки появится красное пятно. Стерин не образует окрашенного соединения с реагентом. У нас были непонятки с госстандартом по поводу этого самого зеараленона. Они браковали практически все растительное масло заказчикам, указывая, что зеараленона у них в масле до фига. Но!!!! Такое утверждение не корректно. Во-первых Зеараленон - микотоксин, который производится одним и тем же патогенным грибком, который производит одномоментно и ДОН. Причем соотношение ДОН к зеараленону примерно 4:1. Т.е. если в пробе присутствует ДОН, значит ищи зеараленон, если же ДОН отсутствует, то зереаленон - не зеараленон вовсе. Это раз. Во-вторых зеараленон происходит от Zea (кукуруза). Т.е предпочитаемым объектом размножения этого гриба является кукуруза, а не подсолнечник (не тот субстрат). Поэтому очень странно утверждение о наличии зеараленона в подсолнечном масле. Да к тому же при облучении ТСХ УФ365 нм этот стерин, совпадающий с зеараленоном светится очень ярко, и цвет у его пятна "афлатоксиновый" - фиолетовый. Зеараленон при 365 нм не светится, а только при 254 нм слабенько голубым цветом.
|
|||||
|
Волгин VIP Member Ранг: 1335 |
27.05.2010 // 13:53:19
Редактировано 1 раз(а) А связывались ли Вы с Георгием Георгиевичем Васияровым в "БиоХимМаке СТ"? Он автор и МУК и БСТ МВИ. Раньше у них даже было обучение работе по этим методикам. (499) 135-88-14. Правда он не всегда берет трубку 
|
|||||
|
Osokin Пользователь Ранг: 54 |
28.05.2010 // 16:15:47
Нормально разрабатывалась эта МВИ! Несколько лет плотной работы. С апробацией в разных организациях с разной квалификацией персонала. Обучение несколько лет проводилось перед тем как аттестовывались эти методики. Т.е. авторы непосредственно работали с исполнителями разной подготовки в лабораториях разной оснащенности. И извлечение (рикавери), например, по В1 доходило до 85%. Главное, следовать тому, что там написано. Ну и Васиярову позвонить, если есть вопросы. Волгин уже написал телефон. Но это не отменяет мысль, что нужно себя проверять. Вопрос только в каком месте делать стандартную добавку? |
|||||
|
Garry VIP Member Ранг: 1076 |
28.05.2010 // 19:50:44
Редактировано 1 раз(а) Добросовестных авторов я обидеть не хотел, извините! Просто этот факт "притягивания за уши" хороших показателей извлечения для методик по пестицидам озвучил наш аудитор по ИСО17025, ну и мы реально столкнулись с этим не один раз. С микотоксинами в данной МВИ все повязано с продукцией Биохиммака, которая у нас на Украине весьма сомнительная (скорее всего подделка-компиляция) и на ней метод не выполняется. Больше мороки, чем результата. А добавку нужно делать на этапе исходной пробы, поскольку при этом велико влияние разного рода неопределенностей. Иначе не интересно! |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
NadyaK Пользователь Ранг: 8 |
03.06.2010 // 4:38:52
Редактировано 1 раз(а) Огромное ВСЕМ спасибо! Васиярову сегодня же позвоню!Но у меня проблемы возникают постоянно! Например-я сделала две пробы на ДОН в параллелях.Во-первых, они получаются цветные, и чем "цветнее" (вообще они желтые, так вот чем желтее) проба, тем выше результат.Причем результаты превышают все ПДК в очень много раз.Также результаты параллельных определений отличаются более чем на 50%. Подскажите, пожалуйста, как делать добавку в исходную пробу??? |
|||||
|
NadyaK Пользователь Ранг: 8 |
03.06.2010 // 5:25:00
Стыдно признаться, но у меня нет никакой информации по микотоксинам.Просто я занимаюсь данным анализом меньше года и у нас в лаборатории нет никакой литературы по этой теме.Подскажите, пожалуйста, где можно почитать хотя бы общую информацию о ДОНе, зеараленоне, афлатоксине В1, микотоксине М1, Т-2. |
|||||
|
Garry VIP Member Ранг: 1076 |
03.06.2010 // 9:29:52
Нпишите мне на мыло я пришлю. igor_pin{coбaчkа}mail.ru |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 8 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
