| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Разделение каротиноидов методом ТСХ >>>
|
 |
| Автор | Тема: Разделение каротиноидов методом ТСХ | ||
|
Soroka Пользователь Ранг: 5 |
 16.02.2005 // 22:55:09
Прошу совета в подборе системы растворителей для ТСХ при разгонке смеси каротиноидов. Необходимо разделить бета, альфа-каротин, ликопин, зеаксантин, астаксантин. Может кто сталкивался? |
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
Soroka Пользователь Ранг: 5 |
24.02.2005 // 19:45:59
Премного уважаемые Химики! прошу совета для биолога -- не могу подобрать систему ТСХ для разделения смеси каротиноидов. Система гексан/хлороформ (2/1) разделяет лишь бета-каротин, ликопин и еще что-то неопределенное, а астаксантин и, вероятно зеаксантин остаются на старте. При добавлении в систему метанола (разные концентрации, начиная от 50/25/1) астаксантин начинает двигаться, но каротин, ликопин и еще что-то идет с фронтом. Помогите! Может советом (предположением). У меня уже пластинки заканчиваются. |
||
|
Дима Пользователь Ранг: 192 |
25.02.2005 // 1:22:27
А статьи какие-нибудь читать пробовали? Что люди советуют по ТСХ каратиноидов в вашем конкретном случае? |
||
|
Сергей Костиков VIP Member Ранг: 1811 |
25.02.2005 // 3:19:06
Редактировано 1 раз(а) user wiped their message |
||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
25.02.2005 // 10:56:31
Пластинки заканчиваются - это плохо (и тема отдельная). Я бы посоветовал в качестве чтива книгу "Тонкослойная хроматография", где-то в форуме встречал на нее ссылку... А с практической точки зрения можно предложить ряд трюков. Действительно, эти каротиноиды слишком различаются по полярности. Самый простой способ - это просто сначала на гексане определить каротин, потом поставить пластинку в гексан-хлорофор и определить еще что-то, с метанолом - еще что-то, и с каплей воды - все остальное. То есть не стараться получить одной хроматограммы. Лучше - вообще провести 2 отдельных разделения в двух системах. Тогда можно, насколько понимаю, детектировать их по желто-красной окраске не опасаясь помех от фронта (лампа на 360 нм по поглощению, или, по-моему, можно даже по флуоресценции). Если нужно нечто красивое, то сделайте двумерную хроматограмму. По одной стороне гексан с каплей хлороформа. По другой - хлороформ с метанолом. Вот только каротин действительно будет на одной из линий фронта. Это плохо, и с этим сложно что-то сделать. Несколько предположений. Первое - вы не пробовали аналита как-то проявлять? Я в этих делах ничего не смыслю, но на кратные связи есть стандартный вроде способ - обработка хлором, потом п,п"-диаминодифенилом (как он по-русски называется?) с муравьиной кислотой. Образуются такие сильно флоресцирующие белым светом комплксы. И еще. Можно как растворитель попробовать какие-нибудь эфиры. |
||
|
Сергей Костиков VIP Member Ранг: 1811 |
25.02.2005 // 11:03:22
Попробуйте различной элюирущей силы растворители, можно с поворотом на 90+90 град., окончание - обработайте парами иода в закрытой камере. Они проявятся, факт. Можно, обойдясь без УФ, детектировать по Rf и даже приблизительную конц.посчитать,обведя пятна тонким карандашом.Сам,правда,не пробовал,виноват. Но если пластины заканчиваются... |
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
25.02.2005 // 15:11:05
А ведь и правда - они и с йодом хорошие комплексы должны образовывать. Правда, в способе с диаминодифенилом (да как хоть он называется? с ума уже схожу  ) они под лампой должны полыхать огнем. Ведь этим методом прекрасно видно мг 5 патулина. А у Вас концентрации, видимо, значительно выше. Тут уже и фон от фронта, наверное, не помеха. Если это так, то я бы смело ставил двумерную хроматограмму.
|
||
|
Сергей Костиков VIP Member Ранг: 1811 |
25.02.2005 // 16:11:59
Константин, эта "хрень" так и называется - 4,4`диаминодифениламин (чаще в виде соли). Но,ей-богу,проще проявить ТСХ-грамму в парах иода. Очень наглядно. К тому же фронт тоже можно отогнать спокойно,тем более, что тут можно играть со взаимодействиями "твердо-жидко" без опасения запороть дорогую колонку. |
||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
25.02.2005 // 16:24:50
А отогнать фронт как? После хлороформ-метанол дать постоять в гексане? Да, тогда вполне даже... |
||
|
Сергей Костиков VIP Member Ранг: 1811 |
25.02.2005 // 16:29:01
Главное, чтобы равновесие ж-газ (т.е.,закрытая камера).Отстоится, поднимется,испарится - куда оно денется. Кстати, Константин, жду подтверждения на сегодня! |
||
|
Garry VIP Member Ранг: 1076 |
01.03.2005 // 13:15:44
Уважаемый, если нет альтернативы ТСХ, то предлагаю альтернативу методологии ТСХ. Для этого пластинки нужны с обращенкой, ну на худой конец 5 % раствор диметилдихлорсилана в толуоле. Пластинку окунаете и высушиваете. А затем водный раствор ацетонитрила 95 % в качестве подвижной фазы или ацетонитрил:диоксан:вода (60:30:10). В зависимости от класса пластинок возможно прийдется чуток составом поиграться, так Сорбфил значительно отличается от того же Силуфола, поэтому ПФ отьюстировать для Ваших пластинок прийдется. А что касаемо проявления, то все каратиноиды замечательно сами окрашены в гамму желто-красного цвета, например ликопин - красный, зеаксантин лимонно-желтый, бета-каротин - красно-оранжевый. |
| |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
