| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Поливинилпирролидон методом ВЭЖХ >>>
|
 |
| Автор | Тема: Поливинилпирролидон методом ВЭЖХ | ||
|
kov Пользователь Ранг: 17 |
 19.05.2009 // 13:04:55
Уважаемые специалисты по ВЭЖХ! Поясните, пожалуйста, назначение использования двух детекторов при анализе методом ВЭЖХ поливинилпирролидона, а именно определение 2-пирролидона, согласно методики ВР 2005. Т.е используется предколонка эндкепир. С18 и колонка С16NH2. УФ-детектор. Так вот, если я правильно понимаю перевод (???): детектор установлен между предколонкой и колонкой, а второй детектор установлен после колонки. Когда 2-пирролидон прошел через предколонку -1,2 мин, переключить поток от насоса к колонке. Зачем такие сложности? Извините, если я не понимаю возможно простых вещей, но как-то не приходилось сталкиваться с подобным. И если, все же такое хроматографирование оправдано, как практически его осуществить? Заранее всем спасибо, и не ругайте, если что, слишком 
|
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
DSP007 VIP Member Ранг: 2228 |
19.05.2009 // 15:27:51
Да гдеж вы такое зверство то нашли, на пирацетаме методика значительно проще Test solution Dissolve 50.0 mg of the substance to be examined in a mixture of 10 volumes of acetonitrile R and 90 volumes of water R and dilute to 100.0 ml with the same mixture of solvents. Reference solution (a) Dissolve 5 mg of the substance to be examined and 10 mg of 2-pyrrolidone R in a mixture of 10 volumes of acetonitrile R and 90 volumes of water R and dilute to 100.0 ml with the same mixture of solvents. Reference solution (b) Dilute 1.0 ml of the test solution to 100.0 ml with a mixture of 10 volumes of acetonitrile R and 90 volumes of water R. Dilute 5.0 ml to 50.0 ml with a mixture of 10 volumes of acetonitrile R and 90 volumes of water R. Column: —size: l = 0.25 m, Ø = 4.6 mm, —stationary phase: end-capped octadecylsilyl silica gel for chromatography R (5 µm). Mobile phase Mix 10 volumes of acetonitrile R and 90 volumes of a 1.0 g/l solution of dipotassium hydrogen phosphate R, adjust to pH 6.0 with dilute phosphoric acid R. Flow rate 1.0 ml/min. Detection Spectrophotometer at 205 nm. Injection 20 µl. Run time 8 times the retention time of piracetam. Retention time Piracetam = about 4 min. System suitability Reference solution (a): — resolution : minimum 3.0 between the peaks due to piracetam and impurity A. — symmetry factor : maximum 2.0 for the peak due to piracetam. Limits: —any impurity: not more than the area of the principal peak in the chromatogram obtained with reference solution (b) (0.1 per cent), —total: not more than 3 times the area of the principal peak in the chromatogram obtained with reference solution (b) (0.3 per cent), —disregard limit: half the area of the principal peak in the chromatogram obtained with reference solution (b) (0.05 per cent). |
||
|
Волгин VIP Member Ранг: 1326 |
19.05.2009 // 21:16:21
Если можно, поподробнее про колонку С16NH2. Никогда не встречал такого сорбента /такой колонки. |
||
|
kov Пользователь Ранг: 17 |
20.05.2009 // 7:12:49
Да гдеж вы такое зверство то нашли, на пирацетаме методика значительно проще Благодарю за методику!!! В крайнем случае воспользуюсь, но мне нужно именно согласно ВР2005 на повидон (ПВП), определение примеси В (т.е. 2-пирролидон). Reference solution Dissolve 100 mg of 2-pyrrolidone R in water R and dilute to 100 ml with the same solvent. Dilute 3.0 ml to 50.0 ml with wafer R. Precolumn: —size: 1= 0.025 m, 0= 4 mm, —stationary phase: end-capped octadecylsilyl silica gel for chromatography R (5µm ) Column: —size: 1= 0.25 m, 0= 4 mm, —stationary phase: spherical aminohexadecylsilyl silica gel for chromatography R (5 µm), —temperature: 30 °C. Mobile phase water R, adjusted to pH 2.4 with phosphoric acid R. Flow rate 1 ml/min. Detection Spectrophotometer at 205 nm. A detector is placed between the precolumn and the analytical column. A second detector is placed after the analytical column. Injection 10 ul. When impurity В has left the precolumn (after about 1.2 min) switch the flow directly from the pump to the analytical column. Before the next chromatogram is run, wash the precolumn by reversed flow. |
||
|
Garry VIP Member Ранг: 1076 |
20.05.2009 // 10:12:43
Редактировано 1 раз(а) Да уж .... британцы что-то переборщили с таким простым анализом. Почти как "тут читать, а тут не читать, - тут рыбу заворачивали" .Поскольку повидон - это достаточно гетерогенная и полидисперсная смесь фракций полимера, то чтобы отделить мономеры с 2-пирролидоном от остальной братии, которая на "хитрой" колонке может выходить целым "стадом" их просто сливают через короткую предколонку отделив очень полярные низкомолекулярные примеси. С пирацетамом все понятно - массы и свойства близки, чего не скажешь про ПВП и 2-пирролидон. Обычно для анализа на 2-пирролидон прибегают к газовой хроматографии или же к эксклюзионке. Я бы модифицировал пробоподготовку. Через С18 картридж для ТФЭ пропустил бы раствор ПВП отделив фракции с 2-пирролидоном, а затем на этой "хитрой " аминооктадецильной колонке анализировал бы содержимое элюата на предмет количества 2-пирролидона, чтобы не корячиться с такой методологией. |
||
|
kov Пользователь Ранг: 17 |
20.05.2009 // 11:16:59
Благодарю Вас, Garry! Как всегда, точно и по делу! Т.е. Вы считаете, одной ВЭЖХ не справиться? "Хитрая" колонка - аминогексадецильный сорбент. Можно по-подробнее про ТФЭ, вряд ли я смогу осуществить, за неимением подходящих средст. Возможен вариант по-проще? |
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
Garry VIP Member Ранг: 1076 |
20.05.2009 // 14:22:06
Коллега, ничего заоблачного я не предложил. Просто британцы предполагают, что присоединив два детектора и отловив на выходе из предколонки искомый объект можно отправить его (2-пирролидон) на анализ, а сам полимер (или малу кучу полимерчиков) вытолкнуть обратной промывкой из предколонки обратно, пока он не сильно "увяз" в сорбенте предколонки. Просто такая методология сродни некоему "шаманству" и в реальных условиях прыгать с бубном возле ВЭЖХ, занимаясь переключением потоков нереально. Можно, конечно снабдить хроматограф неким контроллером, который бы переключал клапан по заданной программе, но в обычных, не эксклюзивных (стандартных для той же ВР) ВЭЖХ системах такого не предусмотрено. Я Вам предлагаю стадию отделения 2-пирролидона от полимера осуществить на стадии пробоподготовки. Т.е. формулирую алгоритм : 1. Приготовить раствор субстанции согласно ВР. 2. Подготовить БиохимМаковский картридж для твердофазной экстракции с Диасорб С18 или С16, промыв его согласно инструкции к нему. 3. Набрать раствор субстанции в шприц и продавить этот объем раствора через этот картридж, собрав элюат. 4. Элюат подвергнуть обычному ВЭЖХ анализу с одним детектором и аминогексадецильной колонкой, определив количество 2-пирролидона. 5. Для точности результата с раствором стандарта можно поступить также пропустив его через картридж. Могут быть, конечно вариации в процессе приготовления раствора субстанции. Например, навеску ПВП растворить в 2 мл подкисленной воды. Эти 2 мл количественно внести в картридж и вымыть 2-пирролидон 5 мл воды, затем элюат довести до объема, требуемого ВР для ВЭЖХ анализа подвижной фазой. Объем, которым нужно вымыть 2-пирролидон обычно определяют на модельном эксперименте. Т.е в картридж вносят заведомо 2-пирролидон и отбирая 1 мл порции элюата определяют методом ВЭЖХ момент выхода всего 2-пирролидона, анализируя каждую порцию. Затем эти обьемы транслируют на анализ субстанции ПВП. |
||
|
kov Пользователь Ранг: 17 |
21.05.2009 // 4:46:48
Огромнейшее спасибо, уважаемый Garry!!!! Все понятно, обязательно попробую, как приобрету картридж. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 7 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
