Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 


ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Причины фронтальной асимметрии пиков ВЭЖХ >>>

  Ответов в этой теме: 5

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: Причины фронтальной асимметрии пиков ВЭЖХ
Partos
Пользователь
Ранг: 52

28.03.2023 // 9:26:30     
Редактировано 3 раз(а)

Добрый день!

Есть вопрос по поводу причин появления фронтальной асимметрии и их возможного устранения.
Колонка Waters Symmetry® C18 5μm 250 x 4.6mm 5μm, не новая, пользуюсь периодически на протяжении полутора лет, сделано примерно 90 серий ЛС (порядка 1000 вколов). При анализе последних 2-3 серий ЛС начала появляться фронтальная асимметрия всех пиков независимо от концентрации веществ. Почитал интернеты, практически везде к основной причине отнесена перегрузка колонки анализируемыми веществами, больше ничего полезного не нашел. В моем случае это исключено, методикой пользуюсь давно, никаких изменений не вносил, может незначительно различаться pH фазы в пределах 3,5+-0,1. Промываю по долгу, никаких фантомных пиков нет, консервирую ацетонитрил/вода 80/20.
Пока не критично, но уже заметно (коэф. асимметрии 0,85-0,86, по НД допускается не менее 0,8), хочу по возможности сразу разобраться с проблемой, не доводить до последнего.

На скриншоте два фрагмента хроматограмм с разницей примерно в 500 вколов, около года эксплуатации колонки (там смесь СО для идентификации, площади могут быть разные).
https://cloud.mail.ru/public/3eX2/pKhAeRFeD

Что думаете? Износ колонки? Если нужно что-то уточнить, пишите.
Спасибо!
ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
OldBrave
VIP Member
Ранг: 1316


28.03.2023 // 16:01:40     

Partos пишет:
...Что думаете? Износ колонки?
Нет, это не износ колонки. Это следствие изменения состава элюента, - увеличьте содержание ACN в элюенте.
Partos
Пользователь
Ранг: 52


28.03.2023 // 16:59:12     
Редактировано 2 раз(а)


OldBrave пишет:

Partos пишет:
...Что думаете? Износ колонки?
Нет, это не износ колонки. Это следствие изменения состава элюента, - увеличьте содержание ACN в элюенте.

Попробую..

Состав элюента:
Подвижная фаза А: Буферный раствор (натрия гексансульфонат 1,882 г/л, уксусная к-та до pH 3,5+-0,1) / ацетонитрил /метанол
900 / 94 / 6
Подвижная фаза Б: ацетонитрил (градиент от 0% до 22% + градиент по скорости потока от 1,0 мл/мин до 2,0 мл/мин)

Что могло измениться в составе пока не ясно, подумаю. Спасибо!
vmu
Пользователь
Ранг: 1264


28.03.2023 // 19:53:58     
Если ничего не меняли (прибор, капилляры в приборе...), то похоже, что колонка начала умирать. Давление по сравнению с новьём сильно выросло? Потестируйте ее в простых условиях (типа изократика процентов 50-70 ацетонитрила в воде, тест-раствор - типа раствора 10-100 ppm толуола в ПФ, 210 или 260 нм), посмотрите на асимметрию и тарелки. Можно попробовать помыть колонку (для начала хотя бы до 100 % ацетонитрила).
Волгин
VIP Member
Ранг: 1326


28.03.2023 // 20:31:40     
Сорбент в колонке просел. Вскройте и домажьте тем же сорбентом из умершей колонки. Если такого нет, любым эндкепированным С8. Именно С8, чтобы добавленный сорбент не внес своих искажений в хроматограмму.
Сделайте это, даже если внешне вскрытая колонка будет выглядеть прилично: такая картинка проявляется при проседании сорбента уже на 0,1-0,2 мм. Можете заодно промыть в ультразвуке или заменить входной фильтр - хуже не будет.
Partos
Пользователь
Ранг: 52


31.03.2023 // 9:44:50     
Редактировано 2 раз(а)


Волгин пишет:
Сорбент в колонке просел.

vmu пишет:
Давление по сравнению с новьём сильно выросло?
Немного отвлекся от темы...

По давлению сложно сделать вывод. Поднял "архивы", в начале использования колонки давление на протяжении анализа было примерно 9,5-20 МПа (min-max), через некоторое время возросло до 11,5-24 МПа и на этом уровне держится до сих пор уже полтора года. По эффективности никаких изменений не замечал, проблема появилась только сейчас. Кстати, начал вспоминать, колонка изначально могла быть и не новая, передали из другой лаборатории, реальный пробег сложно оценить.

Попробую промыть чистым ацетонитрилом. Но вообще условия эксплуатации достаточно жесткие, вполне сорбент мог просесть, видимо да, причина в этом. Режим такой: до 24 МПа при 50 градусах и потоке до 2 мл/мин, один анализ 60 минут, собираю как правило по 2-3 образца и ставлю серию часов на 25 непрерывной работы (других вариантов нет, одна смена).

  Ответов в этой теме: 5

Ответ на тему


ААС, ИСП-АЭС, ИСП-МС - прямые поставки в 2022 году

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]


ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2022
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты