Lipids
Пользователь
Ранг: 459
|
 12.02.2022 // 4:33:11
Попробуйте ТГФ, я думаю что у вас возможны два варианта (самые распространенные) - воска, тогда они вымываются ТГФ при повышенной температуре колонки, или полисахариды - тут надо переворачивать колонку.
|
ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
|
|
an123456
Пользователь
Ранг: 30
|
12.02.2022 // 10:13:34
Lipids пишет:
Попробуйте ТГФ, я думаю что у вас возможны два варианта (самые распространенные) - воска, тогда они вымываются ТГФ при повышенной температуре колонки, или полисахариды - тут надо переворачивать колонку.
У меня флавоноиды, воды и ацетонитрила хватит на низкой скорости ?
|
Lipids
Пользователь
Ранг: 459
|
12.02.2022 // 20:14:38
an123456 пишет:
Lipids пишет:
Попробуйте ТГФ, я думаю что у вас возможны два варианта (самые распространенные) - воска, тогда они вымываются ТГФ при повышенной температуре колонки, или полисахариды - тут надо переворачивать колонку.
У меня флавоноиды, воды и ацетонитрила хватит на низкой скорости ?
Тут два вопроса, что у вас за биомасса (мокрая, сухая, жирная, нежирная)? и как вы ее экстрагировали?
|
an123456
Пользователь
Ранг: 30
|
12.02.2022 // 21:59:11
Lipids пишет:
an123456 пишет:
Lipids пишет:
Попробуйте ТГФ, я думаю что у вас возможны два варианта (самые распространенные) - воска, тогда они вымываются ТГФ при повышенной температуре колонки, или полисахариды - тут надо переворачивать колонку.
У меня флавоноиды, воды и ацетонитрила хватит на низкой скорости ?
Тут два вопроса, что у вас за биомасса (мокрая, сухая, жирная, нежирная)? и как вы ее экстрагировали?
Измельчённые высушенные листья - экстракция водой.
|
Lipids
Пользователь
Ранг: 459
|
13.02.2022 // 7:06:35
an123456 пишет:
Lipids пишет:
an123456 пишет:
Lipids пишет:
Попробуйте ТГФ, я думаю что у вас возможны два варианта (самые распространенные) - воска, тогда они вымываются ТГФ при повышенной температуре колонки, или полисахариды - тут надо переворачивать колонку.
У меня флавоноиды, воды и ацетонитрила хватит на низкой скорости ?
Тут два вопроса, что у вас за биомасса (мокрая, сухая, жирная, нежирная)? и как вы ее экстрагировали?
Измельчённые высушенные листья - экстракция водой.
Значит у вас сахариды (поли-, олиго-). Надо разворачивать колонку и промывать в обратном направлении водой. Можно водой с кислотой - трифторуксусной, фосфорной и тп.
|
Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246 |
|
Химико-фармацевтический журнал
Ежемесячный научно-технический и производственный журнал. Освещает молекулярно-биологические проблемы создания лекарственных средств, методы синтеза и технологии производства новых лекарственных препаратов, иccледования cтpоения xимичеcкиx cоединений, методы анализа и контpоль пpоизводcтва.
|
|
an123456
Пользователь
Ранг: 30
|
13.02.2022 // 17:39:05
Lipids пишет:
an123456 пишет:
Lipids пишет:
an123456 пишет:
Lipids пишет:
Попробуйте ТГФ, я думаю что у вас возможны два варианта (самые распространенные) - воска, тогда они вымываются ТГФ при повышенной температуре колонки, или полисахариды - тут надо переворачивать колонку.
У меня флавоноиды, воды и ацетонитрила хватит на низкой скорости ?
Тут два вопроса, что у вас за биомасса (мокрая, сухая, жирная, нежирная)? и как вы ее экстрагировали?
Измельчённые высушенные листья - экстракция водой.
Значит у вас сахариды (поли-, олиго-). Надо разворачивать колонку и промывать в обратном направлении водой. Можно водой с кислотой - трифторуксусной, фосфорной и тп.
А потом колонку от кислоты отмывать ?
|
Lipids
Пользователь
Ранг: 459
|
13.02.2022 // 17:49:03
an123456 пишет:
Lipids пишет:
an123456 пишет:
Lipids пишет:
an123456 пишет:
Lipids пишет:
Попробуйте ТГФ, я думаю что у вас возможны два варианта (самые распространенные) - воска, тогда они вымываются ТГФ при повышенной температуре колонки, или полисахариды - тут надо переворачивать колонку.
У меня флавоноиды, воды и ацетонитрила хватит на низкой скорости ?
Тут два вопроса, что у вас за биомасса (мокрая, сухая, жирная, нежирная)? и как вы ее экстрагировали?
Измельчённые высушенные листья - экстракция водой.
Значит у вас сахариды (поли-, олиго-). Надо разворачивать колонку и промывать в обратном направлении водой. Можно водой с кислотой - трифторуксусной, фосфорной и тп.
А потом колонку от кислоты отмывать ?
А эти кислоты на вашей колонке не удерживаются практически (я говорю о концентрациях ниже 1%, разумеется). Если вам кислоты противопоказаны, промывайте без кислот. У вас механическое забивание колонки сахаридами, причем эти сахариды они как медузы (крем) через сито проходят через дырки фильтров для ВЭЖХ и забивают вход колонки (уже сам силикагель).
|
Avet
Пользователь
Ранг: 1071
|
14.02.2022 // 10:01:37
vmu пишет:
an123456 пишет:
например, Сычев в своих учебниках вообще пишет, что необходимо избегать частых промывок ))
Либо это бред, либо вы что-то не так поняли. Что такое "частых промывок"? Сколько надо - столько и моете. В колонке не должно оставаться ничего лишнего.
Да, именно так написано. Это взгляд теоретика, никогда не работавшего в производственной лаборатории, когда анализы идут потоком, и головы не поднять.
|
Avet
Пользователь
Ранг: 1071
|
14.02.2022 // 10:04:10
an123456 пишет:
vmu пишет:
an123456 пишет:
Да, но и осадка визуально можно не заметить, а в колонке он может выпасть
Естественно. Поэтому надо хотя бы примерно знать, что может быть в вашей пробе, в чем оно растворимо, в чем - нет. Хотя с такими сложными многокомпонентными пробами, как у вас, всего не учтешь.
Оказалось, что дело всё-таки не в колонке, а в приборе. Поэтому давление нормализовалось. Быть может, есть какие-то нюансы работы с такими пробами, чтобы сохранить подольше колонку, если нет предколонки (кроме хорошего фильтрования проб)?
И в целом, даже если чистые вещества закалывают - повышение давления больше первоначального - повод списывать колонку ? Сколько колонка может анализов проработать без повышения давления?
Дело в приборе? Это суперинтересно! Сообщите, пожалуйста, подробности. Как обнаружили?
|
an123456
Пользователь
Ранг: 30
|
14.02.2022 // 20:41:49
Avet пишет:
vmu пишет:
an123456 пишет:
например, Сычев в своих учебниках вообще пишет, что необходимо избегать частых промывок ))
Либо это бред, либо вы что-то не так поняли. Что такое "частых промывок"? Сколько надо - столько и моете. В колонке не должно оставаться ничего лишнего.
Да, именно так написано. Это взгляд теоретика, никогда не работавшего в производственной лаборатории, когда анализы идут потоком, и головы не поднять.
Беда в том, что такую информация (связанную именно с практическим использованием колонок и прибора) неопытному пользователю трудно найти, разве что на форумах? И то, где гарантия, что это тоже правда в последней инстанции))
|
[]
