Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 



ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

определение концентрации белка >>>

  Ответов в этой теме: 4

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: определение концентрации белка
optima
Пользователь
Ранг: 317

27.06.2006 // 15:27:01     
Можно ли мерять концентрацию белка на 220 нм на спектрофотометре, т.е. по пептидной связи?
ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
vesanna
Пользователь
Ранг: 70


28.06.2006 // 13:00:14     
Если в растворе только один исследуемый белок, тоусловно принято считать, что при оптической плотности белка в растворе с концентрацией, равной 1 мг/мл, величина оптической плотности при 280 нм равна 1, при использовании кюветы с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют растворитель препарата. Концентрация испытуемого белка в растворе должна соответствовать требованиям методики определения. Определению белка данным методом (по одной оптической плотности) мешают присутствие нуклеиновых кислот и нуклеотидов (более 20%).В этом случае оптическую плотностьодного и того же раствора измеряют при двух длинах волн, чаще - 260 - 280 нм, содержание белка Х (мг/мл) рассчитывают по формуле Калькара: Х=1,45*D280-0,74*D260. Большинство белков имеет максимум поглощения при 280 нм, что обусловлено содержанием в них остатков триптофана и тирозина. Существуют и другие методы расчетов, при иных длинах волн.
Tarxan
Пользователь
Ранг: 3


28.06.2006 // 13:28:34     
А если измеряешь концентрацию не белка а полипептида, не содержащего ароматики (полиглицин например) можно при 22 нм мерить?
ЛеонидК
Пользователь
Ранг: 3


31.08.2006 // 11:29:21     

optima пишет:
Можно ли мерять концентрацию белка на 220 нм на спектрофотометре, т.е. по пептидной связи?
А что, Lowry and Biuret не подходят
Spectrometrist
Пользователь
Ранг: 777


31.08.2006 // 16:09:03     

optima пишет:
Можно ли мерять концентрацию белка на 220 нм на спектрофотометре, т.е. по пептидной связи?

210 -220 нм надежнее использовать не на спектрофотометре, а на ВЭЖХ, интегрируя хроматографический пик. В этом случае (если ваш пептид выходит не в мертвом об'еме) измерение не зависит от солей и всяким мыслимых и не мыслимых примесей, ведь в коротком UV поглощает практически все

  Ответов в этой теме: 4

Ответ на тему



ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]

ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2009
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты