02.06.2020 // 16:46:39

---

Шуша пишет:
Там же написано "раствором соли ПРИ рН=3". Видимо имеется в виду, что серной кислотой рН нужно подправить.

---

03.06.2020 // 9:43:14

---

Avet пишет:

---

Шуша пишет:
Там же написано "раствором соли ПРИ рН=3". Видимо имеется в виду, что серной кислотой рН нужно подправить.

---

Но согласитесь, что написано неоднозначно.

---

03.06.2020 // 12:00:59

---

AA_Alex пишет:

---

Avet пишет:

---

Шуша пишет:
Там же написано "раствором соли ПРИ рН=3". Видимо имеется в виду, что серной кислотой рН нужно подправить.

---

Но согласитесь, что написано неоднозначно.

---

Уважаемый Avet, все там просто. Для каждой конкретной колонки имеется мануал или юзер гид, в котором есть раздел Cleaning. Как правило, рекомендации примерно схожи.
Вот, например, для BioSep и TSKgel Sec, соответственно:

Cleaning Procedure • General protein removal: wash with 30 mL of 0.1 M NaH2 PO4 , pH 3.0 • Hydrophobic protein removal: use Acetonitrile gradient • Strongly adsorbed proteins: wash with 30 mL of 6 M guanidine thiocyanate or 10 % DMSO

1. If the column is contaminated with basic com-pounds, rinse with 3-5 column volumes (CV) of 0.5-1.0 M neutral salt or a buffered solution at low pH (pH 2-3) or high pH (0.1-0.2 N NaOH,pH 13.0).
2. If the column is contaminated with hydrophobic compounds, rinse with 3-5 CV of 20% organic methanol, acetonitrile, THF etc.)
3. For precipitated protein, chaotropic reagents such as 0.1 % SDS, 8 M urea or 6 M guanidine, or proteolytic enzymes such as pepsin may be used. However, an extended washing with buffer is required to remove SDS and guanidine. Unexpected elution behavior can occur if these reagents are not completely removed. Rinse with 5 CV of D. l. water after each cleaning step before proceeding to the next step.

---

03.06.2020 // 17:11:04

---

Avet пишет:

---

AA_Alex пишет:
Уважаемый Avet, все там просто. Для каждой конкретной колонки имеется мануал или юзер гид, в котором есть раздел Cleaning. Как правило, рекомендации примерно схожи.

---

А что такое юзер гайд к колонке? Честно говоря, кроме паспорта других документов не встречал. Спасибо за ответ! Сбил с толку этот калия сульфат с рН3

---

04.06.2020 // 12:14:18

---

AA_Alex пишет:

---

Avet пишет:

---

AA_Alex пишет:
Уважаемый Avet, все там просто. Для каждой конкретной колонки имеется мануал или юзер гид, в котором есть раздел Cleaning. Как правило, рекомендации примерно схожи.

---

А что такое юзер гайд к колонке? Честно говоря, кроме паспорта других документов не встречал. Спасибо за ответ! Сбил с толку этот калия сульфат с рН3

---

User Guide, например, такой:
phx.phenomenex.com/lib/gu54810610.pdf
Вообще-то, практически к любой колонке прилагается паспорт/сертификат и руководство (тот самый User Guide или Manual). Если такового нет, его можно найти на сайте производителя.

По поводу сульфата калия. Можно мыть сульфатом калия или натрия, 0.5М и без подкисления; можно мыть любым совместимым с SEC сорбентами кислым буфером (рН 2.5-3). Можно 0,5М гуанидина гидрохлоридом. Есть еще варианты для оснОвных загрязнителей - 0,1% муравьинка или уксусная в 15% ацетонитриле. Иногда помогает, но ненадолго. В общем, по моему опыту, SEC колонки, особенно без предколонок, живут не очень долго - 300-400 инжекций. Пока у меня рекорд был на Адж-вской (не буду писать марку, а то сочтут за рекламу), которая вынесла почти 800. Если вы видите, что пик аналита (или тестового стандарта) начал выходить позже, и увеличилась его ширина, то это, как правило, не лечится. Это все я имел в виду для аналитических ВЭЖХ колонок.

---

  Ответов в этой теме: 6

Ответ на тему