| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
ВЖЭХ пептидов, муки новичка >>>
|
 |
| Автор | Тема: ВЖЭХ пептидов, муки новичка |
|
sAladdin Пользователь Ранг: 2 |
 20.06.2019 // 14:55:48
Добрый день, коллеги! Некоторое время назад начал заниматься синтезом пептидов. Накопились вопросы на котороые ни я, ни кто из тех, с кем я общаюсь дать ответы не могут. Не могу спать и есть. Буду признателен за любую помощь. 1) В чем растворить пептиды, которые ни в чем не растворяются? Метанол, этанол, ацетонитрил, пропанол, ТГФ. Всё пробовал ничего не помогает. 2) На какой фазе можно отанализировать котороткие полярные ди- и трипептиды методом ОФ ВЖЭХ? Стандартные С-18 не справляется, брал синерджи polar rp 4микрона 4,6х50 , тоже не то, эффективность 50 тарелок примерно(( 3) С той же сенерджи поляр провел тест, как указано в поверочном сертификате. Получил 550 тарелок вместо 5530 заявленных производителем. Полагаю, дело в том что пора выбросить хроматограф (beckman 850) или большой экстраколоночный объем, который никак уже не уменьшить и замена хроматографа всё же напрашивается? 4) Какой in-line фильтр нужен для препаративного хроматографа? И нужен ли? Он чем то должен отличаться от аналитического? 5) Отдавали несколько пептидов на лиофилизацию на аутсорсинг. В процессе половина из них "улетела в трубу". На что исполнитель только пожал плечами, мол, сами дураки, ничего не сказали нам про условия. Что сделать, чтобы избежать коллапса? Какие наполнители и в каких количествах добавить? Или можно решить вопрос управляе скоростью и температурой охлаждения? С лиофилкой раньше не стакивался, но на моих плечах лежит задача наладить процесс. В литературе ответов не нашел, только общие фразы. Буду благодарен за ответы. |
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|
virtu VIP Member Ранг: 2135 |
20.06.2019 // 19:38:44
Редактировано 1 раз(а) 0.01-0.1% ТФУК в смеси ацетонитрила с водой (оптимизируете), можно так же пробовать использовать вместо ТФУК более слабые орг. кислоты - муравьиную и уксусную. Нужно вообще уходить с RP-HPLC на HILIC (гидрофильная хроматография). В сети полно инфы на эту тему (HILIC peptides). Если Вы уверены, что никак не уменьшить, то надо менять хроматограф. Нужен, чтобы защитить входной фрит колонки. Отличие от аналитики - ощутимо большая площадь поперечного сечения фильтра. Надо оптимизировать процесс в текущих условиях (заменой растворителя, например) и/или использовать лиофильную сушку с центрифугой. |
|
sAladdin Пользователь Ранг: 2 |
21.06.2019 // 13:30:22
Спасибо за ответ, теперь ясно в какую сторону работать. Только вот ТФУ не справляется с этой задачей, даже в значительно бОльших концентрациях(( Нужно еще что-то. ДМСО хорошо справляется с задачей, он он кушает колонку + его нельзя использовать при наличии Cys, Met и Trp |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 2 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
