| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » Дискуссии ... |
 |
определение протеолитической активности >>>
|
 |
| Автор | Тема: определение протеолитической активности |
|
Margarita00242 Пользователь Ранг: 1 |
 18.10.2016 // 23:05:56
при определении активности акрозина казеинолитическим методом в опытной пробе содержится 1)экстракт сперматозоидов (содержит акрозин), 2)раствор казеина на фосфатном буфере,3) ТХУ; в контрольной пробе 1) экстракт сперматозоидов, 2)фосфатный буфер, 3) ТХУ. После инкубации при 37 и центрифугирования после осаждения ТХУ нерасщепленного казеина оптическая плотность контроля выше чем опытной пробы. С чем это связано? |
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|
Garry VIP Member Ранг: 1076 |
19.10.2016 // 11:32:30
Эксперимент был один или это систематическое превышение оптической плотности, определенное для ряда проведенных повторностей ? Если это результат одного, проведенного Вами эксперимента, то причины могут быть : 1. Грязная посуда, пипетки дозаторы. 2. Следы от пальцев на кварцевой кювете. 3. Для измерения оптической плотности взяты различные кварцевые кюветы (измерения желательно проводить используя одну и ту же кювету). 4. Контрольная проба не подвергалась центрифугированию и из-за этого имеет взвесь неосажденных мех.примесей из того же экстракта сперматозоидов. Если же это система, то возможен пункт 4. (см.выше). Но и меня смущает состав контрольной пробы. В нем отсутствует раствор казеина. (Обычно при определении протеолитической активности в контроль добавляют практически все ингредиенты, но не выполняют инкубацию при 37С и сразу в пробирку добавляют ТХУ) При центрифугировании денатурированного казеина соосаждаются и др. механические примеси. Оптическую плотность при 280 или 260 нм опытной пробы "создают" низкомолекулярные продукты ферментативного протеолиза (триптофан, фенилаланин, тирозин, цистеин и пептиды их содержащие). |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 1 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
