Форумы ANCHEM.RU: ВЭЖХ сахаров не пошло

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

ВЭЖХ сахаров не пошло >>>

Ответов в этой теме: 8

[ Ответ на тему ]

Автор

Тема: ВЭЖХ сахаров не пошло

Nehochyha
Пользователь
Ранг: 64

30.03.2016 // 14:45:45

Делала по станд.методе ВЭЖХ сахаров: колонка Pinnacle II Amino 150*4.6, 5 мкм, элюент - вода/ацетонитрил=25/75, 35 0С, 1мл/мин. Приготовила растворы индивидуальных веществ (фруктоза, глюкоза, сахароза) в растворителе (метанол/вода=10/90) - все по методе. Анализ индивидуальных веществ дает симметричные красивые пики. Когда же готовлю смесь этих веществ в том же растворителе, то пики каждого компонента выходят раздвоенные и очень-очень широкие. Почему??? И как это исправить? Кто-нить сталкивался с подобной аномалией?

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Lipids
Пользователь
Ранг: 459

30.03.2016 // 16:46:17

Nehochyha пишет:
Делала по станд.методе ВЭЖХ сахаров: колонка Pinnacle II Amino 150*4.6, 5 мкм, элюент - вода/ацетонитрил=25/75, 35 0С, 1мл/мин. Приготовила растворы индивидуальных веществ (фруктоза, глюкоза, сахароза) в растворителе (метанол/вода=10/90) - все по методе. Анализ индивидуальных веществ дает симметричные красивые пики. Когда же готовлю смесь этих веществ в том же растворителе, то пики каждого компонента выходят раздвоенные и очень-очень широкие. Почему??? И как это исправить? Кто-нить сталкивался с подобной аномалией?

Мы стремимся растворять анализируемые вещества в подвижной фазе. У вас объем вводимый каков?

Nehochyha
Пользователь
Ранг: 64

30.03.2016 // 16:58:18

По методике написан этот растворитель, что меня так же удивило! От объема пробы не зависит - делала 2, 10 и 30 мкл и всегда одинаковый вид пиков!

Lipids
Пользователь
Ранг: 459

30.03.2016 // 22:12:19

Nehochyha пишет:
По методике написан этот растворитель, что меня так же удивило! От объема пробы не зависит - делала 2, 10 и 30 мкл и всегда одинаковый вид пиков!

Вы растворите в подвижной фазе - попробуйте. У меня никогда такого не было - только с кислотами они переходят из одной формы в другую на колонке при недостаточной закисленности подвижной фазы и на накоторых стационарных фазах. Кстати, так как у вас для сахаров аминная колонка, ежели вы используете подвижную фазу с кислотой (муравьинной, уксусной, фосфорной и т.п.) у вас и из-за этого может быть катастрофа. Проверьте на всякий случай у вас нет этих добавок в фазу?

Шушечка
Пользователь
Ранг: 516

31.03.2016 // 6:26:14

Nehochyha пишет:
Делала по станд.методе ВЭЖХ сахаров: колонка Pinnacle II Amino 150*4.6, 5 мкм, элюент - вода/ацетонитрил=25/75, 35 0С, 1мл/мин. Приготовила растворы индивидуальных веществ (фруктоза, глюкоза, сахароза) в растворителе (метанол/вода=10/90) - все по методе. Анализ индивидуальных веществ дает симметричные красивые пики. Когда же готовлю смесь этих веществ в том же растворителе, то пики каждого компонента выходят раздвоенные и очень-очень широкие. Почему??? И как это исправить? Кто-нить сталкивался с подобной аномалией?

ВАм категорически менять растворитель....

Nehochyha
Пользователь
Ранг: 64

01.04.2016 // 10:40:51

Спасибо всем !
Поменяла растворитель на на элюент и все пошло как по маслу! Вероятно, в методике ошибка была, иначе нет другого объяснения.

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Лаборатория стереохимии сорбционных процессов (ЛССП) ИНЭОС РАН
Анализы различных классов соединений (органический синтез, биотехнология, загрязнения почвы, воды, анализ энантиомерного состава) методами ВЭЖХ и ГХ.

Lipids
Пользователь
Ранг: 459

01.04.2016 // 16:54:26

Nehochyha пишет:
Спасибо всем !
Поменяла растворитель на на элюент и все пошло как по маслу! Вероятно, в методике ошибка была, иначе нет другого объяснения.

Да нет, проблема скорее всего в вашем метаноле или воде. Т.е. там что-то мощное сидит, подозреваю кислота.

Alex75
Пользователь
Ранг: 459

01.04.2016 // 23:02:23

Обычное дело - метанол с продуктами его окисления (много в нем муравьиной кислоты)

Nehochyha
Пользователь
Ранг: 64

04.04.2016 // 7:09:55

Спасибо за ценные советы про метанол! Учту в будущем!


Ответов в этой теме: 8	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты