Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 



ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Приготовление раствора при определении примесей методом ВЭЖХ >>>

  Ответов в этой теме: 3

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: Приготовление раствора при определении примесей методом ВЭЖХ
Виктория Ан
Пользователь
Ранг: 70

16.01.2016 // 12:27:36     
Уважаемые коллеги! Помогите разобраться, как понимать текст Британской фармакопеи ( ст. Бензидамина гидрохлорид, метод определения примесей):
...Use as the initial mobile phase with a flow rate of 1.5 mL per minute, a mixture of 50 volumes of solution A and 50 volumes of methanol . Solution A contains 0.01M potassium dihydrogen orthophosphate and 0.005M sodium octyl sulfate in water, adjusted to pH 3.0 ± 0.1 with orthophosphoric acid...
Не понятно, как приготовить раствор А.
Взять равные объемы (например по 500 мл) 0,02 М р-ра калия дигидрофосфата и 0,01 М натрия октилсульфата и смешать? Тогда получим 1 л раствора, который содержит " 0.01M potassium dihydrogen orthophosphate and 0.005M sodium octyl sulfate"? Или рассчитывать на сухое в-во? Что имеется ввиду? Необходимо понять как приготовить раствор А и как приготовить подвижную фазу (почему по 50 объемов?)
Спасибо.
Реклама на ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Размещение рекламы
Виктория Ан
Пользователь
Ранг: 70


16.01.2016 // 12:45:58     
Привожу перевод всей методики (на всякий случай):
Сопутствующие примеси. Определяют методом жидкостной хроматографии, Приложение III D, используя следующие растворы в метаноле (50%). Раствор (1) содержит 0,25% в/об исследуемого вещества. Раствор (2) содержит 0,0005% в/об 3-диметиламинопропил 2-бензиламинобензоата гидрохлорида BPCRS (примесь А) и 0,00125% в/об 3-(1,5-дибензил-1Н-индазол-3-ил) оксипропилдиметиламина гидрохлорида BPCRS (примесь В). Раствор (3) содержит 0,00025% в/об 1-бензил-1Н-индазол-3-ола BPCRS (примесь С). Раствор (4) содержит 0,00025% в/об исследуемого вещества. Раствор (5) содержит равные объемы растворов (1), (2) и (3).

Процедуру хроматографии можно проводить с использованием колонки из нержавеющей стали (25 см х 4,6 мм), заполненной эндкеппированным октадецилсилильным силикагелем для хроматографии (5 мкм) (Suplex pKB-100), с предколонкой из нержавеющей стали (2 см х 4,6 мм), заполненной тем же материалом. В качестве исходной подвижной фазы со скоростью течения 1,5 мл/мин используют смесь из 50 объемов раствора А и 50 объемов метанола. Раствор А содержит 0,01 М калия дигидроортофосфат и 0,005М натрия октилсульфат в воде, приведенный к рН 3,0 ± 0,1 с помощью ортофосфорной кислоты. Проводят линейное градиентное элюирование, увеличивая процентное содержание метанола до 70% на протяжении 20 минут с момента хроматографирования, а затем снижая процентное содержание метанола до 50% на протяжении 2 минут, и поддерживать конечную подвижную фазу до окончания данного цикла. Детектирование проводят при длине волны 320 нм.

Хроматографируют 20 мкл раствора (5) и, при необходимости, меняют скорость изменения подвижной фазы, чтобы получить время удерживания около 10 минут для исследуемого вещества.

Испытание действительно, если на хроматограмме раствора (5) коэффициент разделения между двумя смежными пиками составляет не менее 2,5.

Хроматографируют 20 мкл раствора (1) и продолжают хроматографировать на протяжении 30 минут. На полученной хроматограмме площадь любого пика примеси А или примеси В не превышает площади соответствующего пика на хроматограмме раствора (2) (0,2% примеси А и 0,5% примеси В), площадь любого пика примеси С не превышает площади пика на хроматограмме раствора (3) (0,1%), а площадь любого другого второстепенного пика не превышает площади пика на хроматограмме раствора (4) (0,1%). Сумма площадей любых таких пиков не превышает 1%.
F251
Пользователь
Ранг: 41


17.01.2016 // 4:27:33     
Взять навески калия дигидрофосфата и натрия октилсульфата, растворить в воде, получив необходимую концентрацию и довести рН.
optima
Пользователь
Ранг: 289


17.01.2016 // 21:03:36     
Виктория, и Британской и в Европейской фармакопее есть подробное описание, как готовить все растворы, написанные курсивом. Посмотрите в разделе буфера или реактивы. Там все должно быть. С точным указанием навески и количества растворителя.

  Ответов в этой теме: 3

Ответ на тему



ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]

ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2009
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты