Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 



ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

октадецилсилилсиликагель С18 >>>

  Ответов в этой теме: 13
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: октадецилсилилсиликагель С18
art709
Пользователь
Ранг: 27

15.12.2015 // 15:03:29     
Здравствуйте, возник вопрос об использовании колонок для ВЭЖХ, с разными типами сорбентов, есть колонка С18, с октадецилсиликагелем в качестве сорбента, в методике указана колонка с сорбетом октадецилсилилсиликагелем С18, вопрос в том, можно ли использовать колонку с октадецилсиликагелем С18?
Реклама на ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Размещение рекламы
Волгин
VIP Member
Ранг: 1285


15.12.2015 // 19:46:53     
Это одно и то же.
art709
Пользователь
Ранг: 27


15.12.2015 // 22:58:51     
Тестируем методику, в ЕФ прописано что пик нифуроксазида должен выходить приблизительно около 8 минуты, но выходит на 5, мобильная фаза А тетрагидрофуран:вода (5:95), мобильная фаза Б - ацетонитрил, градиентный режим, колонка 0,25х4,6, 5мкм, С18, так как в методике, но время выхода основного пика так отличается, может кто-нибудь сталкивался с этой проблемой?
Волгин
VIP Member
Ранг: 1285


15.12.2015 // 23:51:30     

art709 пишет:
Тестируем методику, в ЕФ прописано что пик нифуроксазида должен выходить приблизительно около 8 минуты, но выходит на 5, мобильная фаза А тетрагидрофуран:вода (5:95), мобильная фаза Б - ацетонитрил, градиентный режим, колонка 0,25х4,6, 5мкм, С18, так как в методике, но время выхода основного пика так отличается, может кто-нибудь сталкивался с этой проблемой?
1. Когда указываете размеры колонки, то указывайте пожалуйста в одних единицах, а то у Вас капиллярная получилась.
2. В ЕФ обычно прописывается еще тест на пригодность (колонки, системы). Кажется это называется мудреным словом "валидация". Я этим никогда не занимался, но слышал. Так вот, если колонка (система) не проходит по этому тесту, то анализ на ней проводить по ЕФ не разрешается. Что скорее всего и происходит в Вашем случае.
3. Теперь о существе явления. Сорбент сорбенту "люпус эст". "Октадецил" к поверхности силикагеля может быть привит
а) с разной концентрацией
б) с эндкеппингом или без
в) с различными ухищрениями для смачивания поверхности сорбента водой или нет
г) кроме того, сам силикагель может быть с разной площадью поверхности и диаметром пор, поры могут быть открытые только с одной стороны (пещероподобные ) или сквозные
д), е), ... наверное еще есть параметры, о которых я забыл.
Всё это в конечном итоге влияет на сорбцию каждого конкретного компонента пробы, что сказывается на время его удерживания и селективность системы. Очень полезно прочесть хотя бы пару умных книжек по ВЭЖХ. Начните со Стыскина, Ициксона и Брауде, их книга есть в Сети и читается легко.
art709
Пользователь
Ранг: 27


16.12.2015 // 0:11:49     
Редактировано 1 раз(а)

Спасибо большое, за ответ, и за книгу!
Шушечка
Пользователь
Ранг: 415


16.12.2015 // 6:46:26     

art709 пишет:
Тестируем методику, в ЕФ прописано что пик нифуроксазида должен выходить приблизительно около 8 минуты, но выходит на 5, мобильная фаза А тетрагидрофуран:вода (5:95), мобильная фаза Б - ацетонитрил, градиентный режим, колонка 0,25х4,6, 5мкм, С18, так как в методике, но время выхода основного пика так отличается, может кто-нибудь сталкивался с этой проблемой?
Время выхода пика , это вообще не принципиальный показатель. Относительное время удерживание куда важнее и еще куда важнее ппхс. Если хроматограмма отвечает ппхс, вперед...ничего страшного в изменении времени выхода пика нет.
Реклама на ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Размещение рекламы
Реометр TA Instruments AR1500ex Реометр TA Instruments AR1500ex
Реометр AR1500ex представляет собой высокочувствительный и надежный многоцелевой ротационный реометр для исследования жидкостей и "мягких" твердых образцов. Данный прибор был специально разработан для лабораторий контроля качества и имеет много возможностей специализации под различные задачи.
[ Информация из каталога оборудования ANCHEM.RU ]
art709
Пользователь
Ранг: 27


16.12.2015 // 20:34:11     
В монографии указано, время удерживания около 8 мин., а относительное время удерживания примесей относительно выхода основного пика, у нас пик раньше выходит, проверка пригодности хроматографической системы получается, вся загвоздка во времени, получается что нужно колонку, как в методике покупать
kvot
Пользователь
Ранг: 165


16.12.2015 // 20:41:46     

art709 пишет:
Тестируем методику, в ЕФ прописано что пик нифуроксазида должен выходить приблизительно около 8 минуты, но выходит на 5, мобильная фаза А тетрагидрофуран:вода (5:95), мобильная фаза Б - ацетонитрил, градиентный режим, колонка 0,25х4,6, 5мкм, С18, так как в методике, но время выхода основного пика так отличается, может кто-нибудь сталкивался с этой проблемой?
При воспроизведении методики из EP:
1) старайтесь брать колонку (торговую марку), на которой данная методика разрабатывалась (причину, см. пост Волгина). Информацию по колонке (для EP) можно найти на сайте EDQM. Для вашей субстанции информация здесь: https://extranet.edqm.eu/4DLink1/4DCGI/Web_View/mono/1999 Как вы видите, можно также посмотреть хроматограмму, которую посчитал нужным привести разработчик.
У вас и так методика проблемная: градиент (при этом объем задержки градиента не указан) и идентификация примесей по относительным временам удерживания (без использования стандартов). Вероятность, что вы правильно идентифицируете примеси даже при использовании рекомендованных колонок (Kromasil KR 100-5 C18 or Betasil C18 5µm) крайне сомнительна, а на своей и подавно.
По хорошему надо иметь стандарты всех примесей, тогда у вас будет больше степеней свободы.
2) вы должны руководствоваться не только самой монографией на субстанцию, но и таким разделом, как 2.2.46. CHROMATOGRAPHIC SEPARATION TECHNIQUES, где прописано в каких рамках вы можете работать. Там кстати, указано, что время удерживания при градиентном элюировании должно укладываться +/- 15 % от указанного.

А температуру колонки 10 град С вы соблюдаете?
art709
Пользователь
Ранг: 27


16.12.2015 // 22:07:58     
Да, температура 10 град С, согласно методике
kvot
Пользователь
Ранг: 165


16.12.2015 // 22:30:27     
Можно конечно подкорректировать условия хроматографирования, чтобы основное вещество элюировалось со временем удерживания 8 мин, но идентификация примесей С и D, так и останется под большим вопросом.
Самый оптимальный случай - это покупка стандартов примесей, но это только на мой взгляд.
art709
Пользователь
Ранг: 27


17.12.2015 // 1:39:13     
Спасибо за ответ!

  Ответов в этой теме: 13
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

Ответ на тему



ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]

ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2009
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты