Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 


ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Реанимация Perkin Elmer >>>

  Ответов в этой теме: 5

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: Реанимация Perkin Elmer
vetal1987
Пользователь
Ранг: 20

26.11.2014 // 16:25:53     
Добрый день.
Имеется в наличии ЖХ PerkinElmer. Недавно провел квалификацию прибора в соответствии с рекомендациями сайта европейской фармакопеи: Qualification of Equipment Annex 1: Qualification of HPLC Equipment.
Прибор удовлетворяет всем заявленным в спецификации требованиям. Однако при рутином контроле:
колонка IC-Pak,Waters 3.9×150 mm, п.ф. вода, доведенная до рН=2,5 серной кислотой, длина волны 207 нм, Vпотока=0,25 мл/мин, температура колонки 40 С. Инжектируем субстанцию рибавирина.

www.fayloobmennik.net/4351568

www.fayloobmennik.net/4351579

Ведет себя не совсем адекватно, а именно:
Пик, получаемый на хроматографе Waters имеет коэф симметрии 1,1, ЧТТ = 3600, время удерживания = 6,5 мин, на PerkinElmer же получаем два неразделенных по баз.линии пика (заячьи уши), время удерживания 5,5 мин и 6,3 минуты , при этом возле пиков наблюдается значительный дрейф базвой линии.

Предполагал о возможно слишком большом внутреннем объеме системы из-за которого происходит размывание пробы, однако результаты показали, что внутренний объем системы равен 2,8 мл (с колонкой 250*4,6, 5мкм), что абсолютно нормально.
Может причина кроется в загрязненном капилляре где-то внутри системы? Или запачкана проточная кювета? Но с другой стороны при провдении квалификации с применением кофеина получаем идеально симметричный пик.
Одним словом, чисто теоретически имеем исправный прибор, но на практике все далеко не идеально. Просто очень жаль, что прибор простаивает. При необходимости хроматограммы приложу.
Господа какие могут быть варианты?
ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
nipe
Пользователь
Ранг: 304


26.11.2014 // 19:14:29     
Грязь из системы вымывается?
vetal1987
Пользователь
Ранг: 20


27.11.2014 // 13:44:15     
Нет, никакой грязи не видно. Попробую промыть концентрированной азоткой кювету и еще раз перезапустить анализ.
IvanStyskin
Пользователь
Ранг: 147


28.11.2014 // 1:34:04     
Как не видно)) Если на перкине перед пиком нечто, почти такого же размера. А высоты на 6,5 минутах верные и там и там. Инжектор (автосамплер) у Вас грязный на перкине. Привет киеву.
vmu
Пользователь
Ранг: 1010


29.11.2014 // 15:51:02     
Соглашусь, что на Перкине откуда-то лезет грязь.
Добавлю, что скорость 0.25 мл/мин маловата для колонки диаметром 3.9 мм и такого (низкомолекулярного) аналита (при условии, что в колонке частицы диаметром порядка 5-7 мкм или меньше). Скорость 1 мл/мин сократит продолжительность анализа и должна увеличить эффективность (ЧТТ).

Предполагал о возможно слишком большом внутреннем объеме системы из-за которого происходит размывание пробы, однако результаты показали, что внутренний объем системы равен 2,8 мл (с колонкой 250*4,6, 5мкм), что абсолютно нормально.
Этот результат ни о чем не говорит. Если допустить, что мертвый объем колонки составляет 60-65% (типичная величина) от суммарного объема, то мертвый объем колонки размером 250 x 4.6 мм должен быть в районе 2.5-2.7 мл. Соответственно, внеколоночный объем системы может быть и <100 мкл, и >300 мкл. Если хотите сравнить два хроматографа, ставьте вместо колонки переходник нулевого объема и измеряйте только внеколоночный объем.
vetal1987
Пользователь
Ранг: 20


02.12.2014 // 18:59:32     
Редактировано 2 раз(а)

Господа, грязь найдена. К моему стыду проблема оказалась банальна)))
В качестве промывочного раствора инжектора использовали вода-изопропанол, а при замене на воду вся проблема ушла сама собой. Всем спасибо за помощь!
p.s.Москве тоже)

  Ответов в этой теме: 5

Ответ на тему


ААС, ИСП-АЭС, ИСП-МС - прямые поставки в 2022 году

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]


ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2022
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты