| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
ОФ ВЭЖХ: определение гамма-аминомасляной кислоты (ГАМК) с дериватизацией >>>
|
 |
| Автор | Тема: ОФ ВЭЖХ: определение гамма-аминомасляной кислоты (ГАМК) с дериватизацией |
|
romanroman5999 Пользователь Ранг: 3 |
 04.08.2014 // 18:51:44
Здравствуйте всем! задача такова: Идентифицировать гамма-аминомасляную кислоту (ГАМК) в питательном бульоне, содержащем предшественник ГАМК глутаминовой кислоты, после культивирования условного штамма, способного её синтезировать. Для этого применяем метод обращённо-фазной ВЭЖХ. В данной методике описаны условия для проведения хроматографии. Авторы данной методики предлагают для дериватизации ГАМК смешать 20 мкл OPA-MCE с 10 мкл пробы и 100 мкл боратного буфера и вколоть 20 мкл в колонку. Кто-нибудь может объяснить зачем пробу, на стадии дериватизации смешивают с боратным буфером? Получается, что проба здорово разбавляется. HPLC Analysis of GABA. GABA was derived by mixing 10 мкл of the amino acid solution with 20 мкл OPA-MCE and 100 мкл boric acid buffer. The mixture was reacted at room temperature for 5 min. An S1121 Solvent Delivery System (Syknm) with UV/VIS Detector 3200 was used for separation and detection of amino acids. A Hypersil ODS colum (250 x 4.6 mm, 5 m) was used for separation of amino acids. All samples and the mobile phase were filtered with 0.45 m syringe filter discs and degassed by sonication. Sample aliquots of 20 мкл were injected into the analytical column and the mobile phase flow-rate was fixed at 0.8 ml min-1 and at the wavelength of 338 nm. |
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|
абр Пользователь Ранг: 904 |
05.08.2014 // 8:42:35
Для проведения реакции дериватизации при оптимальных значениях рН. 
|
|
Garry VIP Member Ранг: 1076 |
05.08.2014 // 11:11:25
Редактировано 1 раз(а) Чувствительность метода определения через образование аминокислот с орто-фталевым альдегидом (вернее его производным) достаточно велика. А добавление боратного буфера - необходимо для поддержания оптимального рН реакционной среды. |
|
Serga Пользователь Ранг: 1806 |
06.08.2014 // 15:23:09
если "условный штамм" настолько фигово работает, что разбавление в 10+ раз все портит, то к черту такой штамм... В противном случае разбавление буфером только на пользу- меньше дряни попадает в колонку. 
|
| |
||
|
Ответов в этой теме: 3 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
