| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Параметры предколонки для ВЭЖХ >>>
|
 |
| Автор | Тема: Параметры предколонки для ВЭЖХ | |||||
|
vas20 Пользователь Ранг: 28 |
 28.05.2014 // 0:59:14
Добрый вечер. Дайте, пожалуйста, совет. Мы собираемся осваивать жидкостной хроматограф Shimadzu LC20. У нас сразу возник вопрос по поводу предколонки. Предколонка обязательно должна быть с аналогичной фазой ( С18) как и колонка? Диаметр и размер частиц предколонки должны быть как и у основной колонки? или может быть больше и меньше? Как все это скажется на разделение? PS: Мы хотели просто установить хроматографическую колонку без предколонки, но мы прочитали, что предколонка выполняет защитные функции и позволит сохранить по времени больший срок основной колонки.. |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
Клим Леонов Пользователь Ранг: 21 |
28.05.2014 // 7:24:56
Здравствуйте! Работаем на приборе Shimadzu LC-20, на обращенно-фазных колонках - Kromasil, Nucleosil, Supelco и т.д. Размеры колонок разные, чаще 150 и 250 мм * 4,6 мм. Используем предколонку С18 Kromasil 10,0 * 4,6 мм. Обязательно ли использовать предколонку с той же фазой? ДА, ОБЯЗАТЕЛЬНО! Вообще использование предколонки зависит от анализируемых объектов. Мы, например, не анализируем на таких колонках биообразцы, хотя и имеем предколонку. Делаем это на более простых колонках меньших размеров. Если дело будет только с растворами веществ, там главное не иметь нерастворимых примесей, которые могут забить входной фильтр колонки. Ставить предколонку или нет - дело каждого аналитика и зависит от бережного отношения к оборудованию! |
|||||
|
trace Пользователь Ранг: 69 |
28.05.2014 // 10:32:23
Предколонка с такой же фазой, размер частиц может быть больше. Уточнения можно посмотреть в мануале на колонку конкретного производителя. |
|||||
|
vas20 Пользователь Ранг: 28 |
29.05.2014 // 0:10:30
Спасибо за советы. Мы тоже подумали, что если использовать одного диаметра, то не прогадаем. А какой у вас детектор и какие объекты анализа? Сколько у вас держится колонка? А есть ли у вас фото как лично у вас состыкована колонка и предколонка? У нас женский коллектив, они всегда хотят увидеть не чертежные варианты, а "оригинальные" |
|||||
|
rezvan e Пользователь Ранг: 43 |
29.05.2014 // 6:23:35
Редактировано 3 раз(а) Фото по данной ссылке: Детектор у нас диодно-матричный SPD-M20A. Объекты анализа в основном лек. средства и фарм. субстанции. Колонка не теряет эффективност в течение нескольких лет, если ее правильно использовать и хранить. |
|||||
|
Zubo4istka Пользователь Ранг: 20 |
29.05.2014 // 9:10:57
Доброе утро! Мы тоже недавно приобрели Shimadzu LC-20A, с спектрофотометричным SPD - 20A и рефрактоиетричным RID - 10A детекторами. Имеем дело с субст. и инфузионными растворами. В первые же дни работы с хроматографом поставили Пласдон С-15 (Повидон) субстанцию на колонку HPLC EC 250/4 NUCLEOSIL 100-5 C18 и предколонкой HPLC EC 4/3 NUCLEOSIL 100-5 C18. После ввода испытуемого раствора, колонку с предколонкой промыли в обратном положении на протяжении 20 минут подвижной фазой (вода-метанол 80:20), так повторяли 5 раз (5 проб,5 раз промыли) все прошло благополучно. На след. день на эту же колонку поставили Метронидазол раствор для инъекций, подвижна фаза метанол-калий дигидрофосфат, все тоже было нормально. Через 2 дня простоя, давление насоса стало превышать норму, он выдавал ошибку (давление могу стабилизировать только при уменьшении потока с 1,0 на 0,2). Поменяла предколонку, толку "0", промывала весь день колонку в обратном положении смесью метанол-вода 50:50, толку "0". Только подключаю предколонку к колонке давление зашкаливает. В сливной емкости после промывки колонки на поверхности образуется налет, забила я колонку?Или уничтожила за 3 дня пользования?( |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
Amphetamin Пользователь Ранг: 94 |
29.05.2014 // 10:37:06
Редактировано 3 раз(а) 1) Колонку в обратном направлении промывать, мягко говоря, не стоит. Не зря на ней нарисована стрелочка, указывающая правильное направление потока. Вы могли колонку забить своей же собственной фазой, отчего она и скончалась. Хотя это маловероятно за такой короткий срок. 2)Предколонку можно промывать в любых направлениях, при этом она должна быть отсоединена от колонки. 3) "буферные фосфатные растворы, являются питательной средой, в которой быстро размножаются многие бактерии, образуя частицы колоний. Эти частицы способны засорять фильтры, нарушать работу клапанов, портить колонки и т.д." Если Вы не промыли колонку после фосфатного буфера - то за 2 дня простоя там наверняка появилась жизнь. ЗЫ Колонку, таки можно промывать в обратку, но с потоком в 0,1-0,2 мл/мин, не больше!! |
|||||
|
Hippi Пользователь Ранг: 37 |
29.05.2014 // 10:42:17
Не обязательно проблема с колонкой. Если есть union, запустите систему без колонки. Сразу выясните проблема в колонке или нет. Если давление будет около нуля то проблема в колонке, нет, то скорее всего где- то в насосе. В юзер мануалах есть способы устранения проблем. |
|||||
|
Zubo4istka Пользователь Ранг: 20 |
29.05.2014 // 11:24:13
Не обязательно проблема с колонкой. Если есть union, запустите систему без колонки. Сразу выясните проблема в колонке или нет. Если давление будет около нуля то проблема в колонке, нет, то скорее всего где- то в насосе. В юзер мануалах есть способы устранения проблем. Дело в том, что запускали так и давление 0,1 МПа, потолок. А колонку ставим, без предколонки и давление 24,6МПа, с предколонкой зашкаливает, хоть предколонку и помяняли на новую. Меня беспокоит еще налет на сливе, вверху на жидкости, не может ли это быть сорбент с колонки? вдруг фильтр порвался?( |
|||||
|
Дмитрий (anchem.ru) Администратор Модератор форума Ранг: 4443 |
29.05.2014 // 11:43:53
Кроме размера частиц может стоит задуматься и об удельной емкости сорбента (НФ) и диаметре предколонки. Иначе можете получить размывание пиков. |
|||||
|
Hippi Пользователь Ранг: 37 |
29.05.2014 // 13:19:45
Попробуйте промыть так как советуют фирмы производители, например: 1. Mobile phase without buffer salts (water/organic) 2. 100% Organic (MeOH or ACN) 3. Is pressure back in normal range? 4. If not, discard column or cons ider more drastic conditions: 75% Acetonitrile:25% Isopropanol, then 5. 100% Isopropanol |
| |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
