Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 



ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Горбатая гора... Двугорбый пик... >>>

  Ответов в этой теме: 19
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: Горбатая гора... Двугорбый пик...
Dionisii
Пользователь
Ранг: 375

20.12.2012 // 16:39:14     
Уважаемые коллеги! Столкнулись со своеобразной проблемой. Работаем на жидкостном хромасе LCQ Fleet фирмы Thermo Fisher scientific. Нужно сделать метод количественного хромато-масс-спектрометрического определения амитриптилина, нортриптилина и флуоксетина (I.S.) в одной пробе. Столкнулись с неожиданной проблемой: пики аналитов двоятся на хроматограмме: Меняли всё, соотношение водной фазы и ацетонитрила, колонки с различными неподвижными фазами. Это не примесь, вещества - стандарты USP, смотрим на MS2, по характеристическим ионам. Это именно наши целевые вещества. Но раздвившиеся на хроматограмме. Нет ли у кого идей, как добиться слияния двух горбов одного пика (именно так) в один "симпатичный" пик.
ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
varban
VIP Member
Ранг: 8699


20.12.2012 // 17:17:27     
Впервые слышу такой вопрос

Но ответить на него легко - чтобы два пика слились, нужно уменьшить разрешающую способность системы.

Как - другой вопрос. На обычном жидкостнике я бы поставил широкий капилляр между колонкой и детектором

Уже серьезно - нужно как следует разобраться в этом.
Если кольнуть другие вещества, то же самое происходит?

Но в любом случае, работать нельзя, пока не разберетесь, кто виноват. И тогда будет видно, что делать
Dionisii
Пользователь
Ранг: 375


20.12.2012 // 17:18:49     

varban пишет:
Впервые слышу такой вопрос

Но ответить на него легко - чтобы два пика слились, нужно уменьшить разрешающую способность системы.

Как - другой вопрос. На обычном жидкостнике я бы поставил широкий капилляр между колонкой и детектором

Уже серьезно - нужно как следует разобраться в этом.
Если кольнуть другие вещества, то же самое происходит?

Но в любом случае, работать нельзя, пока не разберетесь, кто виноват. И тогда будет видно, что делать

Кололи другие вещества. Они себя прилично ведут.
virtu
VIP Member
Ранг: 2130


20.12.2012 // 17:42:25     

Dionisii пишет:
Уважаемые коллеги! Столкнулись со своеобразной проблемой
1. Условия.

2. Данные надо в EIC выкладывать (аналиты и ВС). Чтобы был указан MRM переход, а то так ничего непонятно.
З.Ы.: Это или дискриминация хром. полосы или исходники (валятся, примеси)
Dionisii
Пользователь
Ранг: 375


20.12.2012 // 18:09:39     

virtu пишет:

Dionisii пишет:
Уважаемые коллеги! Столкнулись со своеобразной проблемой
1. Условия.

2. Данные надо в EIC выкладывать (аналиты и ВС). Чтобы был указан MRM переход, а то так ничего непонятно.
З.Ы.: Это или дискриминация хром. полосы или исходники (валятся, примеси)


Если можно, пару слов о дискриминации хром. полосы, что это за зверь такой? Заранее благодарен.
Duke
Пользователь
Ранг: 477


20.12.2012 // 23:04:57     
Извините за любопытство, хроматография это не мое, но время(видимо удерживания) 2.5-3 минуты разве нормально для вэжх? Они точно не в мертвом объеме вываливаются, а то пики и широкие, и косые какие-то.
Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
ОКБ Спектр, ЗАО ОКБ Спектр, ЗАО
Фирма «ОКБ Спектр» создана в 1989 году на базе КБ спектральных приборов АО ЛОМО. Основное направление деятельности – спектральное приборостроение.
varban
VIP Member
Ранг: 8699


21.12.2012 // 0:13:33     


Если можно, пару слов о дискриминации хром. полосы, что это за зверь такой?

Изменение количественного и/или качественного состава пробы по вине хроматографической системы и/или ее оператора
cholesterol
Пользователь
Ранг: 109


21.12.2012 // 0:37:40     

Dionisii пишет:
Меняли всё, соотношение водной фазы и ацетонитрила, колонки с различными неподвижными фазами.

Кислоты, основания и другие соединения, содержащие группы способные ионизироваться делят в присутствии буфера. В Вашем случае возьмите в качестве Буфера А 10-20 мМ ацетат или формиат аммония доведите его до pH=3-3.5 муравьиной кислотой, в качестве органического компонента - ацетонитрил, растворите анализируемые соединения в буфере А и заколите на С18 колонке.
virtu
VIP Member
Ранг: 2130


21.12.2012 // 10:00:33     

Dionisii пишет:
Если можно, пару слов о дискриминации хром. полосы, что это за зверь такой? Заранее благодарен.
"Разрыв" хром. полосы сорбата (не то, о чем пишет varban). Эффект нормально не исследован и не описан. Официального термина не существует. Причины различны. Проявляется в ГХ, ВЭЖХ и др.
Dionisii
Пользователь
Ранг: 375


21.12.2012 // 10:11:25     

cholesterol пишет:

Dionisii пишет:
Меняли всё, соотношение водной фазы и ацетонитрила, колонки с различными неподвижными фазами.
Кислоты, основания и другие соединения, содержащие группы способные ионизироваться делят в присутствии буфера. В Вашем случае возьмите в качестве Буфера А 10-20 мМ ацетат или формиат аммония доведите его до pH=3-3.5 муравьиной кислотой, в качестве органического компонента - ацетонитрил, растворите анализируемые соединения в буфере А и заколите на С18 колонке.


Спасибо за ответ. Используем 10 мМ ацетат аммония, подкисленный муравьинкой до pH 3.5. Колонка C18. Так что в точности по Вашим лекалам.
Dionisii
Пользователь
Ранг: 375


21.12.2012 // 10:14:03     

virtu пишет:

Dionisii пишет:
Если можно, пару слов о дискриминации хром. полосы, что это за зверь такой? Заранее благодарен.
"Разрыв" хром. полосы сорбата (не то, о чем пишет varban). Эффект нормально не исследован и не описан. Официального термина не существует. Причины различны. Проявляется в ГХ, ВЭЖХ и др.


Проблему таки удалось снять путем:
1) Увеличению процента буфера в фазе до 60%
2) Снижению скорости потока до 0,35 мл/мин.

Для меня такое решение - сущий парадокс. Казалось бы увеличишь поток, пики сольются - ан нет. Да и "воду" добавить - сомнительный вариант для этих целей. Однако. Наверное результат связан с особенностями ионизации в электроспрее.

  Ответов в этой теме: 19
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

Ответ на тему



ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]

ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2009
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты