Российский химико-аналитический портал | химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
|
ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
колонки для пептидов >>>
|
Автор | Тема: колонки для пептидов | |||||
petrovps Пользователь Ранг: 22 |
18.09.2012 // 13:33:16
Добрый день! Столкнулись с проблемой: никак не можем выделить трипептид из реакционной смеси, появилась возможность поделить на препаративном ВЭЖХ. Посоветуйте, пожалуйста, элюент и аналитическую колонку. Спасибо. |
|||||
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
a_jadan Пользователь Ранг: 13 |
18.09.2012 // 16:29:10
немного странное сообщение... сперва выделить и препаративная вэжх, потом спрашивают про аналитическую колонку. но в принципе, трипептиды бывают сильно разные, и по большому счету можно пользовать все что что взбредет в голову, от катионо- анионообменников, обычного силикагеля(полярная адсорбция), до разной гидрофобики, обычно пробуют на том что есть под рукой и если не получается ищут что то другое, условия соответственно будут зависеть от того что выбрали (нашли, дали ) Ну и всетаки что в конце то концов надо? наработка количества (препаратив); выделение из полной каши или все таки боле менее простая смесюга; или просто аналитические пробы того что получилось (с анализом или без побочных продуктов или грязи)? на разные задачи разные подходы разные условия |
|||||
абр Пользователь Ранг: 910 |
18.09.2012 // 16:42:54
не пробовали в гугле/яндексе набрать название пептида + ВЭЖХ, лучше на английском? Мне почему-то кажется, что все трипептиды (из обычных аминокислот) синтезированы-выделены-проанализированы-описаны. |
|||||
petrovps Пользователь Ранг: 22 |
18.09.2012 // 19:19:33
Немного проясню ситуацию: мы синтезируем своего рода пептидомиметики, которые содержат чуждые для пептидов ф.г. Аналитическая колонка нужна для анализа состава реакционных смесей, а выделение планируется на препаративном хроматографе. Пробовали выделять на силикагеле-безрезультатно. Гугл в нашем случае не помощник. |
|||||
kump Пользователь Ранг: 3175 |
18.09.2012 // 19:39:01
М-м-м, ну не знаю, пептиды и подобное обычно выделяли гельфильтрационной хроматографией. Лет 20 назад этим занимался. Носитель что-то типа Cefadex бывает различных типов в зависимости от диаметра пор. Элюент что-то типа фосфатного буфера или физраствора в зависимости от конкретной задачи. Колонку можно сделать хоть из бюретки, насос, УФ-детектор, в принципе можно собрать хроматограф из подручных материалов (кроме детектора разумеется). С правильным заполнением колонки бывает гемор (набухание, осаждение в потоке и все дела) Но это не ВЭЖХ это ооооооооооочень долгий процесс . Забыл уже детали. Но в принципе при правильной калибровке колонки можно определять молекулярные массы пептидов. |
|||||
petrovps Пользователь Ранг: 22 |
18.09.2012 // 19:49:09
Нарисовал бы структуры, с которыми работаем, но не знаю как прикрепить формулы. Подскажите, пожалуйста. |
|||||
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
Spectrometrist Пользователь Ранг: 777 |
18.09.2012 // 20:51:50
На обратной фазе не получается? Если не садится (слишком гидрофильный) тогда на катионообменник. |
|||||
абр Пользователь Ранг: 910 |
18.09.2012 // 22:41:15
По пептидометикам литературы воз и маленькая тележка. Если не ваш, то аналоги точно описаны. Понятно, что для трипептида лучше всего обращенка, а никакой не size exclusion. Конкретнее зависит от очень многого: вашей колонки, аминокислот, ф.г. Играетесь с типом колонки, составом и рН подвижной фазы... Для фанатов есть ион-парные реагенты и прочие Хилик-и. Но про это лучше ВИП-ы напишут |
|||||
cholesterol Пользователь Ранг: 109 |
18.09.2012 // 23:07:49
Найдите в сети книгу "HPLC of Peptides and Proteins Methods and Protocols" Isabel Aguilar 2004 там доступным языком написано как делить и анализировать пептиды. |
|||||
a_jadan Пользователь Ранг: 13 |
20.09.2012 // 10:54:36
Редактировано 1 раз(а) Да уж, в данном случае гель фильтрация совсем ни к чему. Я так понял, если синтез, то растворители в основном органические тогда обращеннофазовая быстрее для подготовки проб(С4 С8 С18) начали описывать проблемму хорошо, но не останавливайтесь после первого шага, вы же чтото попробывали уже, что именно не получается?, нет на выходе компонента? нет деления? все в провале? какие методы детекции? какие условия уже пробывали? Ну и структуру наверное рисовать тоже не совсем обязательно, можно написать какие группы(или клас груп в АК кторые в пептиде) |
|||||
Волгин VIP Member Ранг: 1326 |
20.09.2012 // 12:45:24
Или на HILIC |
|
||
|
ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
Размещение рекламы / Контакты |